Sığır böbrek transamidinazının izolasyonu, saflaştırılması ve kinetik özelliklerinin araştırılması

Abstract

Bu çalışmamızda sığır böbreğinden izole edilerek kısmen saflaştırılan transa- midinaz enziminin bazı, fizikokimyasal ve kinetik özellikleri incelenmiştir. Önce enzimin L-Arginin, glisin ve L-ornitin için Michaelis-Menten ve Line- weaver-Burk grafikleri çizilerek her biri için Km değerleri hesaplanmıştır. Daha sonra yaptığımız deneylerde kullanılan L-ornitinin mfazlasının enzimi ürün inbihisyonuna uğrattığını gözledik. Ayrıca değişik pH'larda fosfat tamponları hazırlayarak enzim için optimum pH aralığnı tesbit ettik. Ayrıca böbrek homojenatından hazırlanan değişik enzim konsantrasyonlarının aktivite üzerine tesirleri araştırıldı. Saflaştırma basamaklarına ve kinetik çalışmalara ait bütün sonuçlar tablo ve grafikler halinde gösterilmiştir.

In the present study, we investigated some physicochemical and kinetic properties of transamidinase enzyme which was isolated from cow kidneys and then partly purified. Michaelis-Menten and Lineweaver-Burk graphics of the enzyme were drawn by using L-Arginine, glycine and L-ornithine as substrates and Km values were calculated. In the later parts of the study, it has been observed that excess L-ornithine Causes product inhibition on the enzyme activity. In addition, we established optimum pH range for the enzyme by using phosphate buffer solutions of various pH values. The effects of different enzyme concentrations on the activity were also investigated. All the results in the purification and kinetic steps were given in tables and graphics.