Peroksinitritin in vivo ve in vitro şartlarda plazma bileşenleri üzerine olan etkisi ve 3-Nitrotirozin düzeyinin ölçümü

Abstract

73 6. ÖZET Bu çalışma da peroksinitrit aracılıklı oksidatif harabiyeti inceleyebilmek amacıyla ilk önce sentez edilen peroksinitrit gittikçe artan konsantrasyonlarda ( 0.5 - 1 - 2 ve 4 mmol/L ) sağlıklı insan plazmalarına ilave edildi ve plazma bileşenleri üzerine direkt etkisi araştınldı.Peroksinitrit aracılıklı etkiyi gösterebilmek için bu plazmada stabil bir son ürün olan 3 -NT düzeyi ölçüldü ve eklenen peroksinitrit konsantrasyonuna bağlı olarak bu düzeyin arttığı gözlendi.( p < 0.0001) Araştırmanın deneysel (in vivo) kısmında ise kobaylara 12x1 09 cfu/ml/kg dozunda E.coli intraperitoneal olarak uygulandı ve 6 saat sonra intrakardiak olarak alman kanlarda 3- NT düzeyi ve plazma bileşenlerinin miktarı ölçüldü ve 3-NT düzeyinin arttığı gözlendi.( p< 0.0001) Hem in vitro hem de in vivo şartlarda plazma askorbik asit,ürik asit seviyeleri ve LDL ile MDA düzeyleri (lipid peroksidasyon son ürünü) ölçüldü. Her iki durumda da askorbik asit ve ürik asidin azaldığı (p < 0.0001) MDA'nın arttığı (p < 0.0001) gözlenirken LDL düzeyinin in vivo şartlarda arttığı (p < 0.0001), in vitro şartlarda ise değişmediği (NS=No Significante) saptandı. Sonuç olarak peroksinitrit doza bağlı olarak değişik mekanizmalarla önemli plazma antioksidanlanndan olan ürat ve askorbatı azaltmaktadır.Plazma lipid bileşenlerini peroksidasyona uğratarak MDA artışına neden olmuştur ancak plazma LDL T üzerine in vitro şartlarda bir etki göstermemesine rağmen hayvan modellerinde artışa yol açmıştır.Gerek in vitro gerekse in vivo şartlarda peroksinitrit aracılıklı harabiyet, HPLC yöntemiyle plazma 3- NT'nin varlığı ve peroksinitritin konsantrasyonuna bağlı artışı ile kanıtlanmıştır.