Farklı CAD/CAM tam seramik materyallerinin insan gingival fibroblastları üzerine etkileri

Abstract

Bilgisayar destekli tasarım ve bilgisayar destekli üretim (CAD/CAM) sistemleri, klinisyenlerin geleneksel restorasyon malzemelerinden farklı restoratif materyaller seçebilmelerine olanak tanır, hasta başı restorasyonların yapımını sağlar ve laboratuvar aşamalarını azaltır. Bu çalışmanın amacı, altı farklı CAD/CAM tam seramik protetik materyalinin (IPS Empress CAD, Vita Mark II, IPS e-max CAD, Vita Suprinity, Vita Enamic, Lava Ultimate), insan gingival fibroblastlarının (İGF) proliferasyonu, hücre ataçmanları ile ekstraselüler matriks, doku inhibitörleri, oksidatif stres enzimleri, pro-enflamatuar ve anti-enflamatuvar sitokinlerin mRNA ekspresyonları üzerine etkilerini incelemektir.Bu amaçla, her gruptan 3 ve 10 gün boyunca ekstratlar toplandı. Daha sonra, İGF hücreleri bu ekstratlarla muamele edildi. Proliferasyon deneyleri, gerçek zamanlı hücre analizi (RTCA-SP) sistemi ile 200 saat izlenerek gerçekleştirildi. Toplam RNA, 24. saatte izole edildi ve gen ekspresyonları, gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu (RT-PCR) ile analiz edildi. Ayrıca, hücre ataçmanı için taramalı elektron mikroskobu (SEM) kullanıldı.Proliferasyon deneyi sonuçlarına göre, 3 günlük ekstraktlarda, Vita Enamic materyalinde istatistiksel olarak anlamlı farklılık gözlendi (p<0.01). Tüm materyallerde 10 günlük ekstratlarda istatistiksel olarak anlamlı farklılıklar bulundu (p<0.01). Bu dönem boyunca, 72. saatte Lava Ultimate, 96. saatte Lava Ultimate ve Vita Suprinity, 190. saatte ise tüm materyallerde kontrol grubuna kıyasla istatistiksel olarak anlamlı azalma gözlendi (p<0.01). SEM analizinde, IPS e-max CAD grubunda diğer tüm test edilen materyallere göre İGF için artmış ataçman yeteneği görüldü. RT-PCR sonuçlarına göre, tüm materyallerin 10. gün ekstraktları, SOD, GPX, TNF-α, IL-6, IL-8 ve IL-10' un mRNA ekspresyonunu arttırdı. Ek olarak, seramik materyallerin 3 ve 10 günlük ekstraktlarında, değişken seviyelerde IL-1β, MMP-1, 2, 3, 9 ile TIMP-1 ve TIMP-2 mRNA ekspresyonu gözlendi.Tam seramik restorasyon materyalleri, İGF hücrelerinin proliferasyonlarını azaltmış, pro-enflamatuvar sitokinlerin mRNA ekspresyonlarını regüle etmiş, yıkım ve yıkımın inhibisyonundan sorumlu enzimlerin ekspresyonlarını ise farklı düzeylerde etkilemiştir. İGF hücrelerinin yüzey ataçmanlarını ise pozitif yönde etkilediği gözlenmiştir.

Computer aided design and computer aided manufacturing (CAD/CAM) systems lets the practitioners choose different restorative materials than the conventional ones, place chairside restorations and also decrease the laboratory procedures. The purpose of this study was to investigate the impact of 6 CAD/CAM full ceramic restoration materials (IPS Empress CAD, Vita mark II, IPS e-max CAD, Vita Suprinity, Vita Enamic, Lava Ultimate ) on the proliferation, cell attachment and gene expressions, extracellular matrix degrading enzymes and their tissue inhibitors, oxidative stress enzymes, pro-enflamatuar and anti-enflamatuar cytokines, col-1 of human gingival fibroblast (HGF).For this purpose, extracts were collected at the 3rd and 10th day for each group. Then, HGF was treated these extracts. Proliferation experiments were performed using real time cell analyzer (RTCA-SP) system to 200 hours. Total RNA was isolated on 24th hour and genes expressions were analyzed by quantitative real-time polymerase chain reaction (RT-PCR). Furthermore, scanning electron microscope (SEM) was used to evaluate cell atachment.The proliferation result of VE showed significant differences after the 3rd day of incubation period (p<0.01). There were significant differences within the ceramic groups in 10th day of incubation period regarding cell index (p<0.01). Throughout the entire test period, only LU at the 72th hour, LU and VS at the 96th and the all materials at the 190th hour revealed statistically significant decrease as compared with the control group (p<0.01). SEM analyse demonstrated an increased atachment ability for HGF on IPS e-max CAD, whereas the other all tested materials at all points of measurement. According to RT-PCR results, all materials increased mRNA expression of SOD, GPX, TNF-α, IL-6, IL-8, IL-10 in 10th day extract. Additionally, ceramic materials have resulted in varying IL-1β, MMP-1, 2, 3,9; TIMP-1 ve TIMP-2 mRNA expression levels in 3 and 10 day extracts.CAD/CAM restoration materials reduced the proliferation of IGF cells, regulated mRNA expression of proinflammatory cytokines, and affected expression of enzymes responsible for inhibition of destruction and destruction at different levels. It was observed that IGF cells surface attachment affected positively.