Ratlarda kafeik asit fenetil ester (CAPE) uygulamasının üreme sistemi ve antioksidan sistem üzerine etkisi

Abstract

Bu çalışmada, Kafeik Asit Fenetil Ester (CAPE) uygulamasının ratlarda yavru sayısı, ovaryum, uterus dokuları ile plazma total oksidan/antioksidan düzeyleri ve plazma progesteron düzeyleri üzerine etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır.Bu amaçla, 32 adet Sprague?Dawley cinsi rat kullanıldı. Hayvanlar 2 deney ve 2 kontrol olmak üzere, her grupta 8 rat bulunan 4 gruba ayrıldı. Gruplar CAPE 1, KONTROL 1, CAPE 2 ve KONTROL 2 şeklinde oluşturuldu. CAPE 1 ve CAPE 2 gruplarına gebelikten 10 gün önce başlanarak 10 mg/kg/gün CAPE içme suyu içinde verildi. KONTROL 1 ve KONTROL 2 gruplarına ise herhangi bir uygulama yapılmadı. Deneme gruplarının 10 günlük CAPE uygulamasının sonunda tüm grupların östrusu senkronize edildi. Senkronizasyon sağlamak amacıyla 20 mg/kg kas içi GnRH agonisti olan buserelin uygulaması yapıldıktan 24 saat sonra intraperitonal 5 IU FSH ve takiben, 48 saat sonra ise subkutan olarak 5 IU hCG enjeksiyonu yapıldı. CAPE 1 ve KONTROL 1 grupları gebeliğin 11. gününde, CAPE 2 ve KONTROL 2 grupları ise gebeliğin 21. gününde dekapite edilerek yavru sayıları tespit edildi. İntrakardiyal yolla EDTA'lı tüplere kan örnekleri alındı ve doku örnekleri ise naylon poşetlerde -20 oC'de saklandı. Histolojik inceleme için alınan karaciğer ve bağırsak doku örnekleri ise %10'luk formaldehit solusyonunda tespit edildi.Plazma Total Antioksidan Düzeyleri gruplara göre kıyaslama yapıldığında, kontrol grubunun TAS düzeylerinin CAPE uygulanan gruba göre 11. ve 21. günlerde istatistiksel olarak yüksek olduğu belirlenmiştir (p<0.001). Plazma Total Oksidan düzeyleri gruplara göre kıyaslandığında, CAPE uygulanan grubun TOS düzeylerinin kontrol grubuna göre 11. günde istatistiksel olarak önemli düzeyde artmış olduğu belirlenmiştir (p<0.05). Plazma progesteron düzeyleri gruplara göre kıyaslandığında, CAPE uygulanan grubun kontrol grubuna göre progesteron düzeylerinin 21. günde istatistiksel olarak yüksek olduğu belirlenmiştir (p<0.05). Deney süresi boyunca CAPE uygulanan gruplar ve kontrol gruplarındaki hayvanların batındaki yavru sayıları arasında istatistiksel olarak bir farklılık gözlemlenmemiştir. Ovaryum Dokusu Total Antioksidan düzeyleri gruplara göre değerlendirildiğinde CAPE grubunun TAS düzeyinin 11. günde kontrol grubuna göre istatistiksel olarak önemsiz olduğu belirlenmiştir. 21. günde CAPE grubunun TAS düzeyinin kontrol grubuna göre istatistiksel olarak önemli düzeyde yüksek olduğu tespit edilmiştir (p<0.05). Ovaryum dokusu Total Oksidan düzeylerinde gruplara göre kıyaslandığında, 11. günde kontrol ve CAPE grupları arasında istatistiksel olarak önemli bir farklılık tespit edilmedi. TOS düzeylerinin 21. günde CAPE grubunda kontrol grubuna göre istatistiksel olarak oldukça yüksek olduğu belirlenmiştir (p<0.05). Uterus dokusunda TAS seviyesisinde meydana gelen değişiklikler gruplara göre karşılaştırıldığında 11. günde CAPE grubunda kontrol grubuna göre istatistiksel olarak önemli düşüş tespit edilmiştir (p<0.001). Kontrol grubu ile CAPE grubu arasındaki TAS düzeylerinde belirlenen farklılık 21. günde istatistiksel olarak önemli bulunmamıştır. Uterus dokusu Total Oksidan düzeylerinin gruplara göre kıyaslanması yapıldığında 11. günde kontrol grubunun TOS düzeylerinin CAPE grubuna göre istatistiksel olarak daha yüksek olduğu (p<0.01), 21. günde ise gruplar arasında istatistiksel olarak önemli bir fark olmadığı tespit edilmiştir. Karaciğer ve bağırsak dokularında yapılan histopatolojik incelemede bir değişiklik tespit edilmemiştir.Sonuç olarak, CAPE uygulaması gebelik döneminde serbest radikal oluşumu üzerine plazma ve dokuda önemli bir değişikliğe sebep olmazken, yavru canlılığının sürdürülmesi ve gebeliğin sonlandırılmasında etki gösterebileceği kanaatine varılmıştır.

In this study, the effect of Caffeic Acid Phenethyl Ester (CAPE ) application on the number of offsprings, the level of plasma total oxidant and antioxidants in ovarium and uterus tissues and the level of plasma progesterone have been studied in rats.For this purpose, 32 Sprague-Dawley rats were used. Animals were divided into 4 groups in which 2 experiment and 2 control. In each group had 8 rats. Groups were designed as CAPE 1, CONTROL 1, CAPE 2 and CONTROL 2. CAPE 1 and CAPE 2 groups were given 10 mg/kg/day CAPE in their drinking water, starting before 10 day of pregnancy. CONTROL 1 and CONTROL 2 were not made any applications. At the end of 10 day of CAPE applications in the experimental groups, östrus of all groups were synchronised. In order to provide superovulotion, after 24 hours performing intramuscular buserelin, which has 20 mg/kg GnRH agonist, intraperitoneally 5 IU FSH and after 48 hours subkutan 5 IU hCG were injected. The number of offsprings were determined after decapitating CAPE 1 and CONTROL 1 groups at the 11th day of pregnancy and CAPE 2 and CONTROL 2 groups at the 21st day of pregnancy. Blood samples were taken into EDTA tubes through intracardial method and tissue samples were taken in plastic pouches that stored in -20oC. Kidney and instestine tissue samples collected for histological analyses were fixed in 10% phosphate buffered formaldehyde solution.It was found that TAS levels of the control group were statistically higher than the the CAPE applied group on the 11th and 21st days of pregnancy (p<0.001). When oxidation rates were compared according to groups, it was found that TOS level of the CAPE applied group were statistically higher than the control group on the 11th day (p<0.005). If groups were compared, progestorene levels of the CAPE applied group were statistically higher than the control group on the 21st day of pregnancy (p<0.005). During the experiment, no statistical differences were found among the offsprings in uterus of the CAPE applied and the control groups.When the level of TAS in ovarium tissue were evaluated according to the groups, it was found that TAS level of the CAPE group was not statistically important on the 11th day. On the other hand, TAS level of the CAPE group was statistically higher than the control group on the 21st day of pregnancy (p<0.05). If the level of TOS in ovarium tissue were compared according to the groups, no statistically importance were determined on the 11th day of pregnancy. In contrast, the level of TOS in ovarium tissue in the CAPE group higher than the control group on the 21st day of pregnancy (p<0.05).When the changes of the TAS level in uterus tissue was compared with in groups, a statistically important decrease in the CAPE group was found on the 11th day (p<0.001). No statistically important differences were found in the TAS levels of the CAPE applied and the control groups on the 21st day of pregnancy. When comparison of the TOS levels of uterus tissue was made according to the groups, it was found that TOS levels of the control group was statistically higher than the CAPE group on the 11th day of pregnancy (p<0.01). There were not statistical differences in terms of the TOS levels among the groups on the 21st day of pregnancy. No changes were found in the histopathological analyses of the liver and instetine tissues.In conclusion, while CAPE application on the formation of free radicals during pregnancy isn?t causes significant changes in plasma and tissue, it was considered that CAPE may effect maintaining viability of the offspring and the termination of pregnancy.