Hücre çoğalma siklusuna etki eden faktörler

Abstract

ÖZET Bir immünosupresif ilaç olan siklosporin A(CsA) 'm şu ana kadar tespit edilen özelliklerinin immün hücre aktivasyonunun özgün inhibisyonundaki raoleküler mekanizmayı açıklamakta yeterliği olmadığı bildirilmektedir. Bir T hücresi için ise bir antijene yanıtta aktive olması ve çoğalması için hücre siklusunun S fazına girmesi kaçınılmazdır. Bu özelliğine dayanılarak Fitohemaglütinin (PHA), Konkanavalin-A (ConA), CD3 /TCR, Miks lenfosit (MLR) ve protein kinaz C (PKC) bağımlı T hücre büyüme ve çoğalma siklusunda normal ve PKC si tüketilmiş aksesuar hücre bağımlı hücre kültür sistemlerinde, PKC inhibitörü H-7 kullanarak PKC aktivasyonunun, kalmodulin (CaM) blokörü W-7 ve Ca++-CaM inhibitörü TRIF kullanarak Ca++-CaM bağımlı aktiflenen sistemlerin, tirozin kinaz inhibitörü genistein (Gen) kullanılarak tirozin fosforilasyonlarının ve CsA'nın etkilerini inceledik. Sonuçlarımızı maddeleyecek olursak; 1- Hücrelerin antijenik/mitojenik uyarım öncesi 3 günlük bir çeryodda CsA ile preinkübasyonları yanıtları değişmemektedir. Uç günden daha fazla preinkübasyon süresi içeren CsA uygulamaları hücre vital itesinde azalmalara neden olmaktadır. Sağlıklı hücrelerin CsA inhibisyon/hasarına karşı tamir mekanizmaları yoktur. 2- Uyarım tipine bağlı olmaksızın PKC aktivasyonu ve Ca++-CaM kompleksinin oluşumuyla regüle edilen olaylar T hücre replikasyonunun temel öğel erindendir. 3- T hücre yanıtı gelişiminde Tirozin kinaz aktivasyonunun PMA uyarımında yer yokken, ConA ve CD3/TCR bağımlı mekanizmalarda etkin biyokimyasal akışın bir kısmı, PHA ve MLR bağımlı mekanizmalarda da ise temel mekanizmalardan biridir. 4- PKC siz hücrenin replikatif siklusunu uyarımda ConA, CD3 /TCR ve MLR ile karşılaştırıldığında PHA1 in alternatif biyokimyasal yollara sahiptir. 5- PKC Aktivasyon bağımlı uyarım düşük CsA konsantrasyonlarına dayanıklıdır. 6- Düşük CsA konsantrasyonların normal hücrelerde uyarım ılıman duyarlı iken PKC siz hücrede CD3/TCR ve MLR uyarımı eş özelliğe sahiptir. Bu özellik CsA'nın PKC üzerinden etki ettiği muhtemel bir yolun varlığı sorusunu akla getirmektedir. 7- PKC inhibisyonu yalnız başına CD3/TCR ve ConA uyarımlı T hücre IL-2r ekspresyonu üzerine etkisiz iken,CsA ile kombine edildiğinde onun inhibitif etkisini potansiyalize etmektedir.Tirozin kinaz inhibisyonunda CsA'nın IL-2r ekspresyonundaki baskılayıcı etkisi CD3/TCR uyarımında potansiyalize edici iken, ConA uyarımında sinerjik özelliktedir. 9- CaM blokasyonu Tirozin kinaz inhibisyonu yalnız başlarına veya CsA ile kombinasyonları ayrıca CsA ile PKC aktivasyonu inhibisyonunun kombinasyonu T hücresinin CD3/TCR ve ConA bağımlı uyarımında Go/Gı blokasyonuna neden olmakta iken, yalnız başına PKC inhibisyonu Go/Gı' den S fazına geçişi ve G2 yapılanmasını arttırmaktadır. 10- 5,6,7 ve 9. maddeler incelendiğinde PKC inhibisyonu ile akyivasyonu engellenen ve IL-2r ekspresyonu üzerinde muhtemel baskılayıcı regülasyonu olan bir biyokimyasal mekanizmanın CsA ile aktive edildiğini göstermektedir.