Dupuytren hastalığında ex vivo hyalüronik asit uygulamasının miyofibroblastlar ve kollajen tiplerinin değişimi üzerindeki etkilerinin araştırılması

Abstract

AmaçDupuytren hastalığı, palmar fasyanın anormal kalınlaşması sonucu fibrozis,palmar nodüller ve parmaklarda kontraktürlerle sonuçlanan, yaygın görülen vetedavisi zor bir hastalıktır. El fonksiyonlarının yeniden kazandırılabilmesinden dolayıhastalığın cerrahi tedavisinde tatmin edici sonuçlar elde edilmektedir. Kollajenaz vesteroid enjeksiyonları gibi medikal tedavi modaliteleri de mevcut fakat nüks oranlarıyüksektir. Son yıllarda kullanımı yaygınlaşan ve ekstraselüler matriksin önemli birkomponenti olan hyalüronik asitin fibroblastlar ve kollajen üzerinde antifibrotiketkileri olduğu görülmüştür. Yapılan araştırmalarda hyalüronik asitin fibroblastproliferasyonunu azalttığı, tip1/tip3 kollajen oranını artıdığı ve miyofibroblastaktivitesini sınırladığı gösterilmiştir. Dupuytren hastalığının patogenezinde artmışfibroblast ve miyofibroblast aktivitesi ve tip3/tip1 kollajen oranında artış olmasındanyola çıkarak hyalüronik asitin bu hastalıkta kullanılabilecek medikal tedavi yöntemleriarasına girebileceği, hastalığın erken evrelerinde uygulandığında cerrahi ihtiyacınıazaltabileceği ve ileri evrelerde cerrahiyle kombine şekilde uygulandığında nüksoranlarını azaltabileceği düşünülmüştür.YöntemÇalışma kliniğimizde ameliyat edilen 4 adet hasta ile gerçekleştirildi. Herhastanın patolojik palmar fasyası ve sağlıklı ön kol yüzeyel kas fasyasından dokuörnekleri alınarak fibroblastlar kültüre edildi. Kültür ortamları daha sonra ikiyebölünerek birer gruba 24 saat boyunca 100 μg/ml HA maruziyeti uygulandı. Ardındanwestern blot yöntemi ile α-SMA, kollajen tip1 ve kollajen tip3 ölçümleri yapıldı.BulgularHA eklenen sağlıklı ve dupuytren hastalıklı dokularda kontrol gruplarına görekollajen tip3/tip1 oranında anlamlı düşüş saptandı. HA eklenen sağlıklı dokulardakontrol gruplarına göre miyofibroblast tanısal markerı olan α-SMA nın anlamlı ölçüdeazalmadığı görüldü. HA eklenen dupuytren hastalıklı dokularda kontrol gruplarınagöre miyofibroblast tanısal markerı olan α-SMA nın istatistiksel olarak anlamlı ölçüdeazaldığı saptandı.SonuçYapmış olduğumuz çalışmanın sonucu hyalüronik asitin dupuytrenhastalığının patogenezinde rol oynayan tip3/tip1 kollajen artışı ve miyofibroblastaktivitesi artışı gibi süreçleri geri çevirdiğini göstermiştir ve bu sayede hastalığıncerrahi dışı tedavi seçenekleri arasında yeni bir seçenek olabileceği söylenebilir.Anahtar Kelimeler: Dupuytren, hyalüronik asit, fibroblast, kollajen

AimDupuytren's disease is a frequently seen condition with a difficult treatment,manifests with fibrotic palmar nodules and contractures of the fingers as a resultof abnormal thickening of the palmar fascia. Surgery is a choice of treatment,usually with satisfying results in terms of functional recovery of the hand. Variousnon-surgical treatment modalities like collagenase and steroid injections have beendescribed but their recurrence rates are high. Hyaluronic acid, a major componentof the extracellular matrix, has become popular over the past several years. Thehypothesis of this research is based on the fact that HA reduces the fibroblastproliferation, increases the type1/type3 collagen ratio and limits the myofibroblastactivity which has been proven by previous studies on the subject. The pathologybehind Dupuytren's disease is the very same condition of increasedmyofibroblast/fibroblast activity and type3/type1 collagen ratio; therefore thepurpose of the research was to open the path on the way to define the usage of HAas a new approach at medical treatment. As a treatment modality, it may diminishthe need for surgery when used at early stages of the disease and also may decreasethe recurrence incidence when used in combined with surgery at advanced stages.MethodOur research has been done with 4 patients operated at our clinic. Eachpatient's pathological palmar fascia and healthy superficial forearm fascia sampleswere taken and obtained fibroblasts were cultivated. Each culture medium thandivided into two groups and 100 μg/ml of HA applied for the following 24 hoursto one of the groups. Collagen type1, collagen type3 and α-SMA measurementswere performed via western blot technique.ResultsCollagen type3/type1 ratio showed a significant decrease at HA appliedexperiment groups, both healthy and pathological tissues, in comparison to controlgroups. Myofibroblast diagnostic marker α-SMA was another parameter studied,while HA administered healthy tissue groups didn't show any significantdifference regarding α-SMA; HA administered pathological tissue groups revealeda statistically significant decrease at α-SMA levels.ConclusionOur results revealed that HA has reversing effects on the pathogenesis ofDupuytren's disease; such as lowering type3/type1 collagen ratio and limitingmyofibroblast activity. Hence with further studies, HA may become a promisingnon-surgical treatment modality.Keywords: Dupuytren, hyaluronic acid, fibroblast, collagen