İnsan renal arter organ kültüründe in vitro anjiyoplasti sonrası gelişen restenozda BrdU ve p53 ün yeri
- Global styles
- Apa
- Bibtex
- Chicago Fullnote
- Help
Abstract
37 ÖZET Restenoz, anjiyoplastinin oluşturduğu yaralanmaya cevap olarak aktive olmuş dokunun kendini tamir mekanizmasıdır. Restenozla ilgili bir çok çalışma yapılmış olmasına rağmen insan arteryel organ kültürü çalışmalarının sayısı azdır ve uzun dönem sonuçlan da yoktur. Bir transkripsiyon faktörü olan p53 hücre proliferasyonunun ve ölümünün düzenlenmesinde önemli rol oynamaktadır. Bu modeli kullanarak p53un anjiyoplasti sonrası restenoz gelişimindeki rolü araştırılmıştır. Rutin nefrektomiler sırasında 10 hastanın böbrek arterinin bir kısmı alınarak organ kültürü için hazırlanmıştır. Damar duvarına dik bir şekilde 3 er mm.lik kesitler halinde kesilen arter parçaları 5F standard anjiyoplasti balonu kullanılarak 60 saniye süreyle 12 bar.lık basınca tabi tutulmuştur. Anjiyoplasti işlemi sonrası organ segmentleri % 15 fetal calf serum içeren, Waymouth MB752/1 ve Ham F12 karışımı içerisinde kültür edilmiştir. 15 gün sonra organ kültürleri %4 lük paraformaldehid içerisinde tesbit edilerek parafine alınmıştır. Damar duvarının tabakaları hematoksilen ile boyandıktan sonra değerlendirilmiştir. DNA sentezine giden hücrelerin miktarını saptamak için tesbitten 18 saat önce kültür ortamına bromodeoksiüridin (BrdU) ilave edilmiş ve BrdU pozitifliği özgül bir monoklonal antikor kullanılarak saptanmıştır. Damar duvarında p53'ün saptanması için p53'e özgü bir monoklonal antikor kullanılmıştır. BrdU-pozitif hücrelerin anjiyoplasti uygulanmış olan organ kültürlerinin neointimasında belirgin bir şekilde artmış olduğu, dolayısıyla bu bölgede işlem sonrası proliferasyon artışı olduğu görülmüştür. Anjiyoplasti sonrası vakaların %85'inde neointima oluştuğu gözlenmiştir. P53 antikoru ile pozitif reaksiyon veren hücrelerin anjiyoplasti sonrası artmış olduğu ve p53-pozitif olan hücrelerin daha çok yeni oluşan neointimada ve mediada olduğu saptanmıştır. Organ kültür modeli, postanjiyoplasti restenozun in vitro olarak çalışılabileceği bir ortam oluşturmaktadır. P53'ün anjiyoplasti sonrası neointima hücrelerinde gözlenmesi bu proteinin intimal hiperplazide yeri olduğunu düşündürmektedir.
Collections