Sprague-dawley sıçanlarda oluşturulan yanık yara modelinde origanum majorana (beyaz kekik/alanya kekiği) bitkisinden elde edilen esansiyel yağın mrsa ile enfekte yaralar üzerindeki tedavi edici etkilerinin in-vivo ve in-vitro yöntemler kullanılarak araştırılması

Abstract

Amaç: Bu çalışmada Alanya ve çevresinde yanık yaralarının iyileştirilmesi içinkullanılan Origanum majorana L. esansiyel yağının sıçanlarda oluşturulan temiz ve MRSAile kontamine edilmiş yanık yaralarındaki antimikrobiyal ve yara iyileştirici özelliğinin invitro ve in-vivo yöntemler kullanılarak araştırılması amaçlanmıştır.Materyal ve Metot: Bu çalışma kapsamında Origanum majorana L. bitkisi 2 farklızamanda toplanarak esansiyel yağ analizi gerçekleştirilmiştir. Esansiyel yağların içerik analiziyapıldıktan sonra in-vitro antimikrobiyal aktiviteleri değerlendirilmiştir. İn-vitro deneylerkapsamında hücre kültürü doz çalışmaları ve hücre kültürü yara modeli gerçekleştirilmiştir.60 sprague-dawley sıçan 10 gruba ayrılarak yanık yara modeli oluşturulmuştur. Temiz yanıkyarası olan gruplar ve MRSA ile kontamine yanık yarası olan grupların iyileşme düzeyi 28gün boyunca takip edilmiştir. 28 günün sonunda kan, doku ve yara sürüntüsü alınmıştır.Mikrobiyolojik, biyokimyasal, histopatolojik ve immünohistokimyasal yöntemlerkullanılarak örneklerde yara iyileşme düzeyi ve inflamasyon parametreleri araştırılmıştır.Bulgular: Esansiyel yağlar in vitro deneylerde kullanılan tüm patojen bakterilere karşıantimikrobiyal etki göstermiştir. Hücre kültürü yara modelinde yaranın daha hızlı ve yoğunşekilde kapanmasını sağlamıştır. Sıçanlarda oluşturulan yara modellerinde düşük doz (500µl/ml) ve yüksek doz (1000 µl/ml) esansiyel yağ grupları hem temiz hem MRSA ilekontamine yara gruplarında pozitif kontrol ve sham grubundan daha hızlı yara kapanmasısağlamıştır. Yüksek doz esansiyel yağ grupları ise yanık kremi gümüş sülfadiazinkarşılaştırıldığında daha hızlı yara kapanması sağlayarak, histopatolojik veimmünohistokimyasal analizlerde daha güçlü tedavi yanıtı oluşturmuştur. Yine yüksek dozesansiyel yağ grubunun bakteriyel yara kültüründe MRSA yoğunluğunun gümüşsülfadiazinden daha düşük olduğu belirlenmiştir.Sonuç: Origanum majorana L. esansiye yağının in-vitro ve in-vivo antimikrobiyal etkisergilediği, sıçanlada oluşturulan temiz ve kontamine yanık yaralarda iyileştirici etkiye sahipolduğu belirlenmiştir. Bu tez çalışmasında elde ettiğimiz veriler ışığında biyoteknolojikyöntemler kullanılarak, yara iyileşmesini hızlandıracak esansiyel yağ kaynaklı yerli ve millibir topikal ürünün geliştirilmesi hedeflenmektedir.

Aim: In this study, it was aimed to investigate the antimicrobial and woundhealing properties of Origanum majorana L. essential oil, which is used for in thetreatment of burn wounds in Alanya and its surroundings, in clean- and MRSAcontaminated burn wounds in rats using in-vitro and in-vivo methods.Material and method: Within the scope of this study, Origanum majorana L.plant was collected at two different times and its essential oil analysis was carried out.After content analysis of this essential oils, their in-vitro antimicrobial activities wereevaluated. In the in-vitro experiments, the doses were determined and the wound modelswere created for the cell culture studies. A burn wound model was created by dividing 60sprague-dawley rats into 10 groups. The healing level of the groups with clean burnwounds and the groups with MRSA-contaminated burn wounds were followed for 28days. At the end of 28 days, blood, tissue and wound swab samples were taken. The levelof wound healing and inflammation parameters of these samples were investigated usingmicrobiological, biochemical, histopathological and immunohistochemical methodsResults: The essential oils obtained from Origanum majorana L. harvested atdifferent times showed antimicrobial activity against all pathogenic bacteria used in thein vitro studies. In the cell culture wound model, faster and more intense closure of thewound was achieved. In the wound models created in rats, low-dosage (500 µl/ml) andhigh-dosage (1000 µl/ml) essential oil groups provided faster wound closure in bothclean- and MRSA-contaminated wound groups than the positive and sham control groups.High-dosage essential oil groups, on the other hand, provided faster wound closurecompared to burn cream, silver sulfadiazine, and produced a stronger treatment responsein the histopathological and immunohistochemical analyzes. Likewise, it was determinedthat the MRSA density in bacterial wound culture of the high-dosage essential oil groupwas lower than that of silver sulfadiazine.Conclusion: In this thesis study, it was determined that one of Origanummajorana L. essential oil exhibited antimicrobial effects in-vitro and in-vivo, and also hada healing effect on clean and contaminated burn wounds in rats. In the light of the newfindings reported in this study, it is aimed to develop a local and national topical productfrom Origanum majorana L. essential oil, which will accelerate wound healing, usingbiotechnological methods.