Yangı oluşturulmuş gökkuşağı alabalık (Oncorhynchusmykiss Walbaum, 1972)`larında karvakrolün biyoetkinliği

Abstract

Bu çalışmada, ön çalışmalarda dâhil olmak üzere toplam 400 gökkuşağı alabalığı(ort. 16,57±7,48 cm uzunluk, 44.71±1,33 gr ağırlık) kullanıldı. Dört deneysel grupoluşturulan araştırmada, ilk grup kontrol grubu olup deney süresince tüm optimal koşullarsağlandı. İkinci gruptaki balıklar 25 µg/ml lipopolisakkarit (LPS) ile intraperitonel olarak(i.p.) enfekte edildi ve infeksiyon grubu olarak değerlendirildi. Üçüncü grup balıklarenfekte edilmedi ve yalnızca karvakrol destekli yem takviyesi (100µg/ml/1 kg yem) ilebeslendi. Son grubu oluşturan balıklar ise LPS ile enfeksiyon sonrası karvakrol destekliyem ile beslendi. Deneme peryodu boyunca su sıcaklığı, pH, çözünmüş oksijen değerlerisırasıyla 15,5 oC, 8.01, 9.57 mg/L olarak sabitlendi. Deneysel aşama 48 saat sonundatamamlandı. Deneme süresi sonunda karaciğer ve böbrek doku örnekleri alındı veproinflamatuar sitokinlerden interferon gama (IFN-γ) ve interlökin 1 beta (IL-1β) genekspresyon seviyeleri araştırıldı. IFN-γ, IL-1β genlerine spesifik dizayn ettirilenprimerlerin en uygun yapışma (annealing) sıcaklıkları 55-60 oC arasında farklı ısıdereceleri uygulanarak, gradient PCR yöntemiyle analiz edildi Karvakrolunantiinflamatuvar etkinliği araştırıldı. LPS ile oluşturulan enfeksiyon sonunda balıklardagöz cidarında, kuyruk bölgelerinde hemorajiler, pullarda dökülmeler gözlendi. Elde edilenveriler göstermiştir ki, LPS ile enfekte edilen gruptan elde edilen karaciğer ve böbrekdokusu IL-1β ekspresyon seviyeleri kontrol grubuna kıyasla sırasıyla % 53 ve % 12,9oranında uyarılmıştır. Enfeksiyonu takiben karvakrol destekli yemleme yapılan grupta isebu artışların sırasıyla % 13 ve % 85 baskılandığı tespit edilmiştir. Enfeksiyon içeren gruptaakut faz proteinlerinden olan IFN-γ karaciğer ve böbrek ekspresyonu seviyeleri ise kontrolgrubuna göre 2, 87 ve 4, 87 misli değişimlerle uyarılmış, ancak karvakrolün bu artışlarısırasıyla 4,78 ve 8,11 misli değişimlerle baskıladığı gözlenmiştir.,Anahtar Kelimeler: Gökkuşağı Alabalığı, Lipopolisakkarit, Karvakrol, İnterferon Gama,

In this study, including preliminary studies total 400 rainbow trout (mean16.57±7.48 cm of length and 44.71±1.33 g of weight) was used. In this research created thefour experimental groups, the first group is the control group was provided optimalconditions during all experiments. The fish in the second group were intraperitoneally (i.p.)infected by 25 mg / ml of lipopolysaccharide (LPS) and was evaluated as infection group.The fish in the third group was not infected and only the feed supported with carvacrol(100µg/ml/1 kg of feed) was fed. The fish included the last group was fed by the feedsupported carvacrol after infection with LPS. Water temperature, pH, dissolved oxygenvalues during the experimental period were fixed as 15.5 ° C, 8.01, 9.57 mg / Lrespectively. The experimental stage was completed after 48 hours. The liver and kidneystissue samples were removed at the end of the trial period and interferon-gamma (IFN-γ)and interleukin 1 beta (IL-1β) gene expression levels from pro-inflammatory cytokineswere investigated. Optimal adhesion (annealing) temperatures of the primers designedspecifically IFN-γ and IL-1β genes analyzed by gradient PCR with applying differenttemperatures between 55-60 °C. Anti-inflammatory activity of carvacrol was investigated.Hemorrhages in the eye wall and the tail region of the fish and loss of fish scales wereobserved at the end of infection caused by LPS. The obtained data have shown that liverand kidney tissues IL-1β expression levels obtained from the group infected by LPS werecompared to the control group and were stimulated 53 % and 12.9 %, respectively. Theseincreases in the group of feeding supplemented carvacrol following infection wereinhibited the rate of 13 % and 85 %, respectively. IFN-γ liver and kidney expression levelsto be acute phase proteins in the group-included infection were compared by the controlgroup and were stimulated 2.87 and 4.87 fold changes, respectively, however theseincreases were inhibited by 4.78 and 8.11 fold changes.Key Words: Rainbow Trout, LPS, Carvacrol, Interferon gamma, Interleukin 1 Beta