Endometriyum kanserinde RASSF1A ve RASSF2a tümör baskılayıcı genlerinin promotör metilasyon analizi

Abstract

Amaç: Çalışmamızda RASSF1A ve RASSF2A tümör baskılayıcı genlerininhipermetilasyon durumlarının endometriyal kansere etkisinin incelenmesiamaçlanmıştır.Materyal Metod: Ondokuz Mayıs Üniversitesi Kadın Hastalıkları ve Doğum Kliniği'nde Endometriyal CA tanısı konan 15 hasta çalışmaya dâhil edildi. EDTA' lı tüplereperiferik kan örnekleri alındı. Ayrıca, Endometriyal CA tanısı konulmuş bu 15 hastanınOndokuz Mayıs Üniversitesi Patoloji bölümünden, formaline fikse edilmiş parafingömülü tümör doku örnekleri temin edildi. Kontrol grubu için, Ondokuz MayısÜniversitesi Kadın Hastalıkları ve Doğum Kliniği'nden sezeryan doğum sırasında 10sağlıklı kadından rahim doku örnekleri alındı. Periferik kan, rahim doku ve parafinegömülü tümör doku örneklerinden DNA izolasyonu yapıldı. Daha sonra DNAörneklerine bisülfit modifikasyon yöntemi uygulandı ve metilasyon spesifik PCRyapıldı. PCR ürünleri agaroz jelde yürütülerek, RASSF1A ve RASSF2A genlerininpromoter CpG metilasyon analizi yapıldı. Elde edilen sonuçlar SPSS ve Ki-kare analiziile değerlendirildi.Bulgular: RASSF1A geni promotor bölgesi metilasyona spesifik PCR analizi sonuçları,hasta kanı, tümör dokusu ve kontrol grubu örnekleri ile karşılaştırıldığında istatistikselolarak anlamlı bir fark saptanmazken (p=0,08), RASSF2A geni promotor bölgesimetilasyona spesifik PCR analizi sonuçları, hasta kanı, tümör dokusu ve kontrol grubuörnekleri ile karşılaştırıldığında istatistiksel olarak anlamlı derecede fark görüldü(p<0,001).Sonuç: Çalışmamızın sonucuna göre, Türk popülasyonunda RASSF1A geni promotorbölgesi metilasyonu endometrium kanseri gelişiminde önemli bir rol oynamazken,RASSF2A geni promotor bölgesi metilasyonunun önemli derecede rol oynadığısaptanmıştır.Anahtar Kelimeler: Endometriyal kanser; RASSF1A tümör baskılayıcı geni; RASSF2Atümör baskılayıcı geni; metilasyon; promotor bölge

Aim: In this study, it is aimed to evaluate effects of RASSF1A and RASSF2A tumorsuppressor genes hypermethylation status in endometrial cancer.Material and Method: We evaluated 15 endometrial CA diagnosed patients inOndokuz Mayıs University Obstetrics and Gynecology Clinic. Peripheral blood sampleswere taken into EDTA tubes. Besides, formalin fixed paraffin embedded tumor tissuesamples of these 15 patients were collected from Ondokuz Mayıs University PathologyDepartment. For control group, womb tissue samples of 10 healthy women were takenin Cesarian section delivery operation from Ondokuz Mayıs University Obstetrics andGynecology Clinic. DNA isolations were performed from peripheral blood, wombtissue and paraffin embedded tumor tissue samples. Then, bisulfite modification methodwas applied to DNA samples and methylation specific PCR was performed. PCRproducts were analyzed in agarose gel and RASSF1A and RASSF2A genes' promoterCpG methylation status were registered. The results were evaluated with SPSS and Chisquare statistical analysis.Results: As a result of the study, there is no statistical significant difference ofRASSF1A gene promoter region methylation status between patients' blood and tumortissue samples and healthy womb tissue samples (p=0.08). Also according to results ofRASSF2A gene promoter region methylation status, there is statistical significantdifference when comparing patients' blood and tissue samples and healthy womb tissuesamples (p<0.001).Conclusion: According to results of our study, RASSF1A gene promoter regionmethylation status doesn't have an important role in endometrium cancer cases inTurkish population. However, RASSF2A gene promoter region methylation status has animportant role in endometrium cancer cases in Turkish population.Keywords: Endometrial cancer; RASSF1A tumor suppressor gene; RASSF2A tumorsuppressor gene; methylation; promoter region