Büyüme hormonu gen anlatımı arttırılmış meme kanseri hücrelerinde curcuminin apoptotik hücre ölümü üzerine etkisinde inflamasyonun rolü

Abstract

Dünya genelinde kadınlarda en sık görülen kanser türü meme kanseridir. Kanserkaynaklı ölümler arasında meme kanseri akciğer kanserinden sonra kadınlarda ikincisırada gelmektedir. Meme kanseri gelişiminde HER2/neu (insan epidermal büyümefaktörü reseptörü 2) gibi büyüme faktörleri, östrojen ve prolaktin (PRL) gibihormonların etkisi bilinmektedir. Son zamanlarda yapılan çalışmalara göre postnataldönemde hipofiz bezinden salınan BH'nin meme tümör biyopsi örneklerinde normalmeme epitel hücresine kıyasla artmış olduğu belirlenmiştir. Akromegali hastalığı gibimalign durumların sıklıkla görüldüğü endokrin bozuklukların meme kanseri gelişiminitetiklediği ve BH meme bezi gelişiminde prolaktin gibi indükleyici etkisi olduğu tespitedilmiştir. Otokrin BH anlatımı kazandırılan meme kanseri hücre hatlarında hücreinvazyon, metastaz ve kanserojenik artış belirlenmiştir. Curcumin,`Curcuma longa'' bitkisinin kökünden üretilen doğal bir bileşik olup, prostat, kolon,servikal, melanoma, pankreas ve meme kanserleri üzerinde anti-oksidan, antiinflammatuar, anti-proliferatif ve anti-kanserojenik etkisi olduğu görülmüştür. In vitrove in vivo kanser modellerinde curcuminin kanser hacmini azalttığı, metastazıengellediği gösterilmiş olsada klinik çalışmalar curcuminin stabilite kaynaklı etkisiniazaldığını ifade etmektedir. Ancak NF-B inhibitörü gibi görev yapan curcumininklinik çalışmalarda bazı kemotörapatik ilaçların (5-FU, docetaksel, gemsitamib)karsinojenik etkisini arttırdığı pankreas, kolon ve meme kanseri vakalarındagösterilmiştir. BH sinyalinde anahtar moleküllerden sinyal transdüseri vetranskripsiyon aktivatörü 3 (STAT-3)'ün inhibitörü olarak görev yapan atiprimod,anti-inflamatuar, anti-anjiyogenenik ve anti-karsinojenik ajan olarak meme kanseri,melanoma ve hepatosellüler karsinomada etkisi gösterilmiştir. Bu tez ile amacımız,otokrin BH anlatımı kazandırılan MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 ve T47Dmeme kanseri hücre hatları üzerinde atiprimod'un curcumin uygulamasına bağlıapoptotik hücre ölümü üzerine etkisinin irdelenmesidir. Atiprimod, MCF-7, MDAMB-231, MDA-MB-453 ve T47D hem doğal tip hem de BH anlatımı kazandırılanmeme kanseri hücrelerinde curcumin uygulaması kaynaklı hücre canlılığına ket vurmapotansiyelini arttırdığı tespit edilmiştir. Ayrıca atiprimodun, curcumin kaynaklı hücreölümü, mitokondri membran potansiyeline ket vurma potansiyelini ve apoptotikölümü tüm meme kanseri modellerinde BH anlatımına bağlı kalmadan arttırdığı PI,xviDAPI, DiOC6 floresan boyamaları, PI ve Annexin V/PI hücre akış sitometresi ilegösterilmiştir. Böylece atiprimod uygulamasının otokrin BH bağlı curcumine karşı ilaçdirencini MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 ve T47 meme kanseri hücrelerindeapoptotik hücre ölüm mekanizmasını aktive ederek gerçekleştirildiği tespit edilmiştir

The most common cancer type in women worldwide is breast cancer. Among cancerrelated deaths, breast cancer is the second most common cancer after lung cancer inwomen. Growth factors such as HER2/neu in the development of breast cancer, theeffects of hormones such as estrogen and prolactin (PRL) are known. According torecent studies, growth hormone (GH) released from the pituitary gland in the postnatalperiod was found to be increased in breast tumor biopsy specimens compared tonormal breast epithelial cells. Malignant conditions, such as acromegaly, arefrequently observed in endocrine disorders, leading to breast cancer development. Likeprolactin, GH is found to be an inducer in mammary gland development. Forced GHexpression in breast cancer cell lines induced cell invasion, metastasis andcarcinogenesis. Curcumin is a natural compound produced from the root of ''CurcumaIonga'' and has anti-oxidant, anti-inflammatory, anti-proliferative and anticarcinogenic effects on prostate, colon, cervical, melanoma, pancreas and breastcancers. Although curcumin has been shown to reduce cancer volume, inhibitmetastasis in vitro and in vivo cancer models, clinical studies suggest that the anticarcinogenic effect of curcumin is declined because of its stability problem in serumsampels. However, in clinical trials curcumin, which acts as an NF-B inhibitor, hasbeen shown in the pancreatic, colon, and breast cancer cases to increase thecarcinogenic effect of some chemotherapeutic drugs (5-FU, docetaxel, gemcitabine).Atiprimod, which acts as an inhibitor of STAT-3 from key molecules in the GH signal,has been shown to be effective in breast cancer, melanoma and hepatocellularcarcinoma as anti-inflammatory, anti-angiogenic and anti-carcinogenic agents. Thepurpose of this thesis is to investigate the effect of atiprimod on curcumin-inducedapoptotic cell death on autocrine GH expressing MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 and T47D breast cancer cell lines. Atiprimod significantly increased cell viabilityinduced by curcumin MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 and T47D wild type andGH+ breast cancer cells. It has also been shown that atiprimod has the potential toinhibit curcumin-induced cell death, mitochondrial membrane potential loss, andapoptotic death regardless of GH expression in all breast cancer models according toPI, DAPI, DiOC6 staining, PI cell cycle and Annexin V/PI apoptotic cell deathanalysis. Thus, it has been determined that atiprimod exposure increased the curcuminxviiiinduced apoptotic cell death in MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 and T47DGH+ breast cancer cells