5-amino-1,3,4-tiyadiazol türevlerinin karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkilerinin araştırılması

Abstract

Karbonik anhidraz (EC. 4. 2. 1. 1), CO2'in, HCO3- ve H+ iyonlarına iki basamaktadönüsümlü hidratasyonunu katalizleyen, çinko iyonlu metaloenzimlerden biridir. nsan gözündeCA-I, CA-II ve CA-IV izoenzimleri bulunur. Karbonik anhidraz inhibitörleri, aköz humorunsalgılanmasıyla olusan yüksek göz içi basıncın (IOP) düsürdükleri için, glaucoma hastalıgıtedavisinde etkili olarak kullanılırlar.Bu çalısmada glaucoma hastalıgı tedavisinde kullanılmaya aday yeni karbonik anhidraz(CA) inhibitörlerinin, karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri arastırılmıstır.Önce sıgır eritrositlerinden karbonik anhidraz enzimleri afinite jeli kullanılarak(Sepharose-4B-L-tirozin-sülfonilamid) saflastırılmıs ve daha sonra bu enzimlerle kinetikçalısmalar yapılmıstır.Daha sonra sentezlenen yeni bilesiklerin (1, 2, 3) sıgır eritrosit BCA enzimleriüzerindeki inhibisyon etkisi incelendi. Çalısmalarda karbonik anhidraz aktivitesininbelirlenmesinde hidrataz ve esteraz aktivitelerinden faydalanıldı. BCA'nın hidrataz ve esterazaktivitesi üzerinde 1, 2, 3 no'lu bilesiklerin inhibisyon etkisi gösterdigi belirlenmistir.nhibisyon etkisi gösteren ilaçlar için % aktivite-[I] grafikleri çizilerek I50 degerleribulunmustur. CO2-Hidrataz aktivitesine göre inhibisyon gösteren 1, 2 ve 3 bilesiklerinin I50degerleri (enzimli reaksiyon süresini yarıya düsüren inhibitör konsantrasyonu); BCA için1,79.10-7 ile 9,78.10-7 M arasında bulundu. p-Nitrofenil asetatı hidroliz aktivitesi olan esterazaktivitesine göre ise; BCA için 1,94.10-7 ile 2,25.10-7 M arasında I50 degerleri bulundu.Anahtar Kelimeler: Glokom, I50 Degerleri, Karbonik Anhidraz, Sülfonamidler

Carbonic anhydrases (E.C. 4.2.1.1.) are family of zinc metalloenzymes that catalyze thereversible hydration of carbon dioxiede in a two-stop reaction to yield bicarbonate and proton.The isoenzymes of human eye are CA-I, CAII and CA-IV. Carbonic anhydrase inhibitors,which reduce aqueous production with a corresponding decrease in intraocular pressure (IOP),have been used as ocular hypotensive agents for the treatment of glaucoma.In this study, new carbonic anhydrase inhibitors?s effects on carbonic anhydraseenzyme as candidates for treatment of glaucoma were investigated.First, carsonic anhydrase enzymes from bovine erythrocyte were, purifed using affinitygel and all of the investigations were carried out with these enzymes.Later, inhibition effects of these new compounds (1, 2, 3) on bovine carbonic anhydraseenzymes (BCA) have been investigated in vitro. In the studies, it was taken advantage ofhydrates and esterase activites for determining of carbonic anhydrase activitates. It wasobserved that (1, 2, 3) compounds show inhibition effect on BCA hydratase and esteraseactivity. I50 values were determined by drawing % activity-[I] graphs for drugs showinginhibition effects. For (1), (2), (3), compounds of CO2-hydratase activity, inhibition effectranged from 1,79.10-7 to 9,78.10-7 M for BCA with I50 (molarity of inhibitor producing a %50inhibition of CA activity). As for esterase activity of p-nitrophenyl acetate, (1), (2), (3)compounds have inhibition ranging from 1,94.10-7 to 2,25.10-7 M for BCA with I50.Key Words: Glaucoma, I50 Values, Carbonic Anhydrase, Sulfonamides