Nitric oksid donörü deta/no ile guanilat siklaz aktivatörü YC-1`in term gebe sıçan myometrial kontraktil aktivite ve siklin GMP düzeyleri üzerine etkilerinin araştırılması

Abstract

IV NİTRİK OKSİD DONÖRÜ DETA/NO İLE GUANİLAT SİKLAZ AKTİVATÖRÜ YC-1'İN TERM GEBE SIÇAN MYOMETRİAL KONTRAKTİL AKTİVİTE VE SİKLİK GMP DÜZEYLERİ ÜZERİNE ETKİLERİNİN ARAŞTIRILMASI ÖZET Bu çalışma, nitrik oksid donörü dietiltriamin-NONOate (DETA/NO) ile NO'dan bağımsız direkt soluble-guanilat siklaz (sGC) aktivatörü YC-1'in (3-(5'- hydroxymethyl-2'-furyl)-1 -benzyl indazole) term gebe sıçan myometrial şeritlerinin spontan kasılmaları ve cGMP düzeyleri üzerindeki etkilerini araştırmak amacıyla yapıldı. Myometrial şeritler 8 term gebe sıçandan elde edildi ve organ banyolarına asılarak izometrik gerilimleri kaydedildi. YC-1 (10` 9-3x10`5 M) ve DETA/NO (lO'Mu`4 M) artan dozlarda uygulanarak spontan kasılmalar üzerine olan etkileri kaydedildi. Önceden bir sGC inhibitörü olan metilen mavisi (10`5 M) ile muamele edilmiş myometrial şeritlere artan dozlarda YC-1 (1(r9-3x1Cr5 M) ve DETA/NO (10`7-1<r* M) uygulanarak etkileri kaydedildi. Ayrıca, 6 term gebe sıçandan elde edilen myometrial şeritler ayrı ayrı YC-1 için 10`5 M ve 10`6 M ve DETA/NO için 10`5 ve 10`6 M ile inkube edilerek cGMP düzeyleri değerlendirildi. Artan dozlarda uygulanan YC-1, spontan myometrial kasılmaların amplitüd ve frekansını anlamlı şekilde azalttı ve metilen mavisi bulunan ortamda bu etkisi ortadan kalktı (p<0.05). DETA/NO'un ise spontan myometrial kasılmaların amplitüd ve frekansını değiştirmediği görüldü. Bunun yanısıra, YC-1 10`5 M ile inkube edilen myometrial şeritlerdeki cGMP düzeylerinin, YC-1 10`6 M, DETA/NO 10`5ve 10`6 M ile inkube edilen şeritlerdeki cGMP düzeylerinden anlamlı şekilde yüksek olduğu saptandı (p<0.05). Sonuç olarak, YC-1 'in term gebe sıçan myometriumundaki gevşetici etkisinin sGC enzim aktivasyonu sonrası cGMP'i arttırmak yolu ile olduğu, cGMP'in gebelik süresince uterin sessizliğin sağlanmasında rolü olabileceği düşünülebilir. Anahtar Kelimeler: Nitrik oksit, soluble guanilat siklaz aktivatör, myometrium, sıçan

THE EFFECTS OF YC-1 AND DETA/NO ON SPONTANEOUS CONTRACTIONS AND THE LEVELS OF CGMP OF İSOLATED PREGNANT RAT MYOMETRİUM SUMMARY The aim of this study was to investigate the effect of YC-1(3-(5'~ hydroxymethyl-2'-furyl)-1 -benzyl indazole) and diethylenetriamine-NONOate (DETA/NO) on spontaneous contractions and the levels of cyclic GMP (cGMP) of myometrial strips isolated from term pregnant rats. YC-1 is a nitric oxide-independent soluble guanylate cyclase activator and DETA/NO is a nitric oxide donor. We evaluated the effect of increasing concentrations of YC-1 and DETA/NO on spontaneous myometrial contractions and contractions of myometrial smooth muscle pretreated with methylene-blue (10`5 M) (n=8). We also evaluated the effect of YC-1 and DETA/NO on the levels of cGMP in myometrial strips obtained from timed-pregnant rat uterine horns (n=6). YC-1 (10`9-3x10`5 M) concentration-dependently decreased the amplitude and frequency of spontaneous contractions of myometrial strips isolated from term-pregnant rats. The inhibition of the amplitude and frequency of spontaneous contractions by YC-1 were antagonized with methylene-blue (10`5 M). However, DETA/NO did not change the amplitude and frequency of spontaneous contractions of myometrial strips. In addition, YC-1 -stimulated myometrial strips showed excessive elevation in myometrial cGMP that declined slowly during the subsequent washout period than that of DETA/NO (p<0.05). In this study, we demonstrated that while the NO- independent sGC activator YC-1 concentration-dependently decreased the amplitude and frequency of spontaneous contractions of myometrial strips isolated from pregnant rats, the NO donor DETA/NO did not change the spontaneous contractile activity of myometrial strips isolated from pregnant rats. We also found out that YC-1 -induced relaxation is associated with significant increases in cGMP. These results might suggest that cGMP may plays a role for the maintenance of uterine quiescence during pregnancy. Keywords: Nitric oxide, soluble guanylate cyclase activator, myometrium, rat