İntrasitoplazmik sperm enjeksiyonu uygulamalarına giren açıklanamayan kısırlık teşhisi konan hastalarda, yumurtalık kapasitesinin ve yumurta kalitesinin değerlendirilmesinde yeni bir belirteç olarak serum midkin protein düzeylerinin anti-müllerian hormon düzeyleri ile birlikte araştırılması

Abstract

Çalışmanın amacı, açıklanamayan kadın infertilite (AKİ) olgularında sitokin görevi olan büyüme faktörü midkin (MK) proteininin, tanı ve tedavide yeni bir belirteç olup olamayacağının araştırılmasıdır. Bu çalışmada, ICSI işlemi için kayıt olmuş erkek faktörü (EF; N:90), AKİ (N:90) ve polikistik over sendromu (PKOS; N:90) tanısı konmuş 20-45 yaş aralığındaki hastaların serum, folikül sıvıları (FS'ları) ve kümulus hücreleri (KH'leri) kullanıldı. Hastaların yaş, BKİ, endometrium kalınlığı, AFS, oosit sayısı, GV ve MI-MII oosit sayısı, fertilize oosit sayısı, fertilizasyon yüzdesi, embriyo sayısı, iyi kalite embriyo sayısı ve gebelik yüzdesi değerlendirildi. Hastaların menstrual sikluslarının 3. gününde kanlarından izole edilen serumlarında FSH, LH, E2, PRL, TSH ve Anti-Müllerian hormon (AMH; EKLİA), INH B (ELİZA) hormonları ile MK (ELİZA) seviyeleri araştırıldı. Yumurta toplanması esnasında hastaların KH'leri ve FS'ları izole edildi. KH'lerinde, proliferasyon ve canlılık-apoptotik indeks oranları (Akım sitometri) ile ultrastrüktürel analizler, FS'larında ise AMH (EKLİA) ve MK (ELİZA) seviyeleri değerlendirildi. İki grubun ve ikiden fazla grubun karşılaştırılması sırasıyla Student-T-test ve ANOVA testi kullanılarak gerçekleştirildi. Sonuçlar, ortalama±SD olarak gösterildi. p<0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. En düşük ve en yüksek KH sayısı, sırasıyla AKİ ve PKOS'da bulundu (p <0.05). En yüksek apoptoz oranına sahip olmakla birlikte en düşük canlılık oranı PKOS'da belirlendi (p<0.05). En yüksek canlılık oranını, en düşük apoptoz oranı ile birllikte EF'de değerlendirildi (p<0.05). Yapılan ultrastrüktür değerlendirmede, PKOS'da yaygın otofajik vakuoller ve EF ile AKİ'de ise yaygın lipit damlacıkları olduğunu ortaya koydu. PKOS'da apoptotik görünümlü KH'ler yaygın olarak görüldü. PKOS'da en yüksek AMH ve MK seviyeleri (S, FS'ları) bulundu, ancak bunların en düşük seviyeleri AKİ'de tespit edildi (p<0.05). AKİ'de bulunan AMH ve MK seviyeleri, EF'deki seviyeler ile benzer olarak değerlendirildi (p>0.05). Bu çalışmada, ilk defa MK proteininin AKİ olgularının tanı ve tedavisinde yeni bir belirteç olarak kabul edilemeyeceği sonucuna varıldı.

This study aimed to investigate whether growth factor midkine (MK) protein with a cytokine function can be a new marker in the diagnosis and the treatment of unexplained female infertility (UFI) cases. In this study, serum and follicle fluids (FFs) and cumulus cells (CCs) of the patients aged 20-45 years who were diagnosed with male factor (MF, N:90), UFI (N:90) and polycystic ovary syndrome (PCOS, N:90) undergoing ICSI procedure were used. Age, BMI, endometrial thickness, AFS, oocyte number, GV and MI- MII oocyte number, fertilized oocyte number, fertilization rate, embryo number, good quality embryo number and pregnancy rate were evaluated. FSH, LH, E2, PRL, TSH, and AMH (Anti-Müllerian hormone; ECLIA), INH B (ELISA) hormones with MK (ELISA) levels were investigated at the serums isolated from the blood of patients taken on the 3rd day of their menstrual cycles. During oocyte pick-up, CCs and FFs of the patients were isolated. Proliferation with viability-apoptotic index rates (Flow cytometry) and ultrastructural analyzes at CCs, AMH (ECLIA) and MK (ELISA) levels at FFs was evaluated. The comparison of the two groups and more than two groups were performed using Student-T-test and ANOVA test, respectively. Results were shown as means ± (SD). p <0.05 was considered statistically significant. The lowest and highest numbers of CCs were found at UFI and PCOS, respectively (p<0.05). The lowest viability rate with the highest apoptosis rate was determined at PCOS (p<0.05). The lowest apoptosis rate with the highest viability rate was evaluated at MF (p<0.05). The ultrastructural evaluation revealed that there were widespread autophagic vacuoles at PCOS and lipid droplets at UFI with MF. CCs with apoptotic appearance was frequently detected at PCOS. Highest AMH and MK levels (S, FFs) were found at PCOS; however, the lowest levels of them were detected at UFI (p<0.05). AMH and MK levels found at UFI were evaluated similarly to MFs' levels (p>0.05). In this study, it was concluded for the first time that MK protein cannot be accepted as a new marker in the diagnosis and treatment of UFI.