Kuduz aşısından antijen hazırlayarak aşılanmış kişilerde antikor düzeylerinin belirlenmesi

Abstract

1. ÖZET Anahtar Sözcükler: Kuduz, nötralizan antikor, ELISA, HDCV, Semple Kuduz Aşısından Antijen Hazırlayarak, Aşılanmış Kişilerde Antikor Düzeylerinin Belirlenmesi Dr. G. Eser Ok Dünyada ve ülkemizde kuduz enfeksiyonu önemini günümüzde de korumaktadır. Temas sonrası profılakside, Semple aşısının yeterli antikor oluşturamadığı ve ağır komplikasyonlara yol açabildiği, buna karşın insan diploid hücre kökenli aşının (HDCV) ise maliyetinin yüksek olduğu bilinmektedir. Aşılama sonrası veya klinik hastalığa bağlı olarak gelişen antikorlan saptamaya yönelik gerek referans gerekse tarama amaçlı bir çok yöntem geliştirilmiştir. Piyasaya ticari amaçlı olarak ta sunulmuş olan bu testler ülkemiz koşullannda pahalı olması nedeniyle yaygın kullanım alanı bulamamıştır. Bu çalışmada piyasada bulunan HDCVnin antijen olarak kullanıldığı, sonuçların spektrofotometrik olarak okunabileceği, çalışması kolay, ELISA tekniğine dayalı bir yöntem hedeflenmiş, bu amaca yönelik olarak aşı antijenli mikro-ELISA (AA-ELISA) yöntemi geliştirilmiş ve testin çalışırlığını saptamak için sonuçlar Platelia Rabies mikro-ELISA testi ile karşılaştınlmıştır. izmir Konak Kuduz Tedavi Merkezi'ne başvuran 20'si aşılanmamış, 176'sına HDCV, 17'sine Semple uygulanmış, toplam 213 olgudan sağlanan birer serum örneğinin tümü AA-ELISA ile değerlendirilmiş, serumların 142'si aynı zamanda kuduz antiglikoprotein antikorlarını saptamaya yönelik Platelia Rabies kiti ile de çalışılmıştır. İki yöntem arasında korelasyon katsayısı 0.88 gibi yüksek bir değerde bulunmuştur. Hazır kit temel alındığında AA-ELISA'nın duyarlılığı (sens'ıtivite) %99.1, seçiciliği (spesifıte) %94.1 olduğu gözlenmiştir. Her iki test ile çalışmaya alınan serumlarda, aşısız grubun hiçbirinde antikor saptanmamıştır. Beş doz HDCV aşısı uygulananlarda AA-ELISA ile %100.0, Platelia Rabies kiti ile %97.9'unda koruyucu düzey olan 0.5 IU/ml'nin üzerinde antikor varlığı saptanmıştır. Semple aşı uygulananlarda ise bu düzeyler sırası ile %35.3 ve %29.4'dür. Çalışmadaki veriler doğrultusunda HDCV aşısının etkin olduğu, geliştirilen AA- ELISA testinin oluşan bağışıklığı ölçmede kullanılabileceği sonucuna varılmıştır.

2. SUMMARY Key Words: Rabies, neutralizing antibody, ELISA, HDCV, Semple Determination of Antibody Levels in Vaccinated Cases with the Use of Human Diploid Cell Vaccine (HDCV) as Antigen G. Eser Ok, M.D. Rabies infection is still attracting attention in the world and in our country. For post-exposure prophylaxis, it is known that Semple vaccine can not induce enough antibody and can cause severe complications. Meanwhile the cost of Human Diploid Cell Vaccine is very high. Many reference and scanning tests has been improved to detect antibodies produced due to vaccination or clinical disease. These tests are now commercially available in the market, but not widespread in our country, because of their high prices. In this study, we aimed to perform an easy ELISA test in which results can be evaluated by a spectrophotometer, and commercially available HDCV is used as antigen. With this aim, we improved a Vaccine Antigen-ELISA (VA- ELISA) technique and compared the results with a commercially available micro-ELISA test (Platelia Rabies) to evaluate the validity of our test. Total 213 sera samples, obtained from 23 unvaccinated, 176 HDCV and 23 Semple vaccinated cases applied to Rabies Control Unit, Konak, izmir, were examined by VA-ELISA and 142 of the sera were also tested with Platelia Rabies for detecting neutralizing antibodies. The correlation coefficient between two tests was high as 0.88. The sensitivity and specificity of VA-ELISA were 99.1% and 94.1%, respectively, when Platelia Rabies was accepted as reference test. All of the sera obtained from unvaccinated cases were negative by both tests. Protective antibody levels (>0.5 lU/ml) were observed in cases vaccinated with five HDCV doses, with the ratio of 100.0% and 97.9%, by VA- ELISA and Platelia Rabies, respectively. These ratios were 35.3 and 29.4, respectively, in cases vaccinated with Semple. These data suggests that HDCV is effective in protection and AA-ELISA can be used for evaluation of immunity against rabies.