Sıçanlarda iskemi-reperfüzyon modelinde iskemik ön koşullamanın miyokardiyal apopitoza etkisi

Abstract

SIÇANLARDA İSKEMİ-REPERFÜZYON MODELİNDE İSKEMİK ÖNKOŞULLAMANIN MİYOKARDİYAL APOPİTOZA ETKİSİ Sevgi ÇAVDAR Yüksek Lisans Tezi Gaziantep Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Fizyoloji Anabilim Dalı Tez Yöneticisi: Prof Dr. Cahit BAĞCI Yrd. Doç. Dr. M. Adnan CELKAN Şubat-2005, 40 Sayfa ÖZET Bir organın arteryel beslenmesinin herhangi bir nedenle bozulması ile oluşan iskemik hasar, hücrenin disfonksiyonu, intraselüler ve interstisyel ödem ve sonuçta da hücrenin ölümü ile karakterizedir. İskemik hücresel hasarlanmayı önlemek veya azaltmak için, bazı yaklaşımlar geliştirilmiştir. Bunlardan biri de iskemik önkoşullama (Ischemic Preconditioning, İP) dır. Bu çalışmada 30 dak koroner iskemiden (İ) sonra 120 daks reperfüzyona (R) maruz kalmış sıçanlarda, 5' İ ve 5' R olacak şekilde iskemik önkoşullamanın, miyokardiyal apopitotik hücre ölümüne etkisini test etmeyi amaçladık. Çalışmada, 30 adet Wistar cinsi erkek sıçan kullanıldı ve 3 eşit gruba ayrıldı: Grup I sham grubu (hiçbir şey uygulanmayan), Grup II önkoşullama yapılan grup (5' İ ve 5' R sonrası 30' İ ardından 120' R), Grup III ise iskemi kontrol grubu (30' İ ve 120' R). Deneyler sonunda kalpler çıkarıldı ve bcl-2 immunohistokimyasal boyama metoduyla bcl-2 indeks belirlendi. Gruplardaki ortalamalar arasındaki farkın karşılaştırılmasında tek yönlü varyans analizi (one-way ANOVA), grupların birbirleriyle olan anlamlılıklarında ise Tukey testi kullanıldı. P<0.05 anlamlı kabul edildi. Bcl-2 immunohistokimyasal boyama metoduyla, iskemik önkoşullama yapılan Grup II' de, infarkt alanındaki apopitotik hücre ortalaması % 40 ± 4.27,önkoşullama yapılmayan yani sadece iskemi ve reperfüzyon yapılan Grup III teki ortalama % 65 ± 4.11 ve sham grubunda ise bu oran % 2 ± 0.66 olarak bulunmuştur. Önkoşullama yapılan grup ile yapılmayan grup arasında apopitotik hücre ortalamasında anlamlı bir azalma (p<0.001) tespit edilmiştir. Yine sham grubu ile diğer iki grup karşılaştırıldığında da anlamlı farklılık mevcuttu (p<0.001). Sonuç olarak 30' İ ve120' R maruz kalan sıçanlarda önkoşullama yapılan grupla yapılmayan gruplar arasındaki anlamlılık göz önüne alınırsa iskemik önkoşullama miyokardiyal apopitoz oluşumunu azalmaktadır. Anahtar Kelimeler: İskemi, reperfüzyon, iskemik önkoşullama, apopitoz

IN ISCHEMIA-REPERFUSION MODEL OF RATS THE EFFECT OF ISCHEMIC PRECONDITIONING TO THE MYOCARDIAL APOPTOSIS Sevgi ÇAVDAR M. S. Thesis Gaziantep University Graduate School of Healty Sciences, Department of Physiology Supervisor: Prof Dr. Cahit BA?CI Assist. Prof. Dr. M. Adnan CELKAN February-2005,40 Pages ABSTRACT Ischemic damage due to impediment of arterial blood supply to an organ which is characterized by dysfunction of the cell, intracellular and interstitial edema and consequently death of the cell. Some approaches were developed to prevent or to reduce the ischemic cell damage. One of them was ischemic preconditioning (IP). In this study we aimed to test the ischemic preconditioning (as a 5 min ischemia and a 5 min reperfusion) would affect myocardial apoptotic cell death in rats who were exposed to reperfusion (R) for about 120 min after coronary ischemia (I) of 30 minutes. In this study, Wistar type 30 male rats were used and divided equally into three groups: Group I as sham group (nothing was applied); Group II is the preconditioning performed group (120' R right after 30' I subsequently 5' I and 5' R); Group III is ischemia control group (30' I and 120' R). At the end of the experiments the hearts were extracted and Bcl-2 index was determined with immunohistochemical dying. The differences between the mean values were determined by a one way analysis (one-way ANOVA), for the significance between groups a Tukey test was used and p values p<0.05 was considered to be significant. Through the Bcl-2 immunuhistochemical dying method we found that in Group II, in which an ischemic preconditioning performed, within the infarct area the mean number of apoptotic cells was 40 ± 4.27 % ; whereas this rate inin Group II, in which a preconditionig was not performed, in other words, only ischemia and reperfusion were performed, was 65 ± 4.11 % and in Sham group was 2 ± 0.66 %. We observed a significant reduction in the mean values of apoptotic cells between groups for which preconditioning performed and not performed (p<0.001). Again there was a significant difference between sham group and other two goups (p<0.001). In conclusion, in rats exposed to 30' I and 120' R, when the significance between groups for whicw preconditioning performed and not performed is considered, the ischemic preconditioning reduced the occurence of myocardial apoptosis. Key Words: Ischemia, reperfusion, ischemic preconditioning, apoptosis IV