Wistar ve Wag/rij (Absans epilepsili) sıçanlarda beyin dokusundaki yaşa bağlı değişikliklerin Ft-ır spektroskopisi ile incelenmesi

Abstract

Epilepsi tedavisine yönelik çalışmalarda kullanılan Wistar Albino Glaxo from Rijswijk (WAG/Rij) sıçanlarda 2 aylıktan 6 aylığa kadar absans nöbetler tam olarak görülmezken, 6 aylıktan itibaren spontan diken dalga deşarjları ile karakterize nöbetler tam olarak görülür. Bu sıçanların epileptogenezinde büyümeyle birlikte beyin gelişimine bağlı bazı faktörlerin rol oynadığını kanıtlayan çalışmalar mevcuttur. Fakat yine de WAG/Rij sıçanlarda nöbetleri oluşturan epileptojenik mekanizmalar tam olarak açıklanamamaktadır. Konuya katkı sağlamak amacıyla çalışmamızda 2 ve 6 aylık WAG/Rij sıçanların beyinleri, 2 ve 6 aylık Wistar sıçanların beyinleri ile karşılaştırılmalı olarak Fourier Dönüşüm Kızılötesi (FT-IR) spektroskopisi ile incelendi. Ayrıca spektroskopik sonuçları desteklemek amacıyla Bradford ve TBARs testleri çalışmaya dahil edildi. Çalışma kapsamında, olefinik, CH2 asimetrik, CH2 simetrik, amid I, amid II, C=O, PO-2 simetrik ve RNA bantlarının frekans ve alanları analiz edildi. Spektral analizlere göre, Wistar grupları ile karşılaştırıldığında, WAG/Rij gruplarında olefinik, CH2 asimetrik, CH2 simetrik ve C=O bantlarının alanlarındaki anlamlı düşüş (p<0.05) doymamış ve doymuş lipitlerde, kolesterol esterlerinde, fosfolipitlerde ve triaçilgliserollerde azalma olduğu bulgusunu verdi. Ayrıca, amid I ve amid II bant alanlarındaki anlamlı düşüş (p<0.05) protein miktarında bir azalma olduğunu gösterdi. CH2 asimetrik bant genişliğinde daralma zar akışkanlığında düşüş olduğu, PO-2 simetrik ve CH2 asimetrik frekanslarındaki değişiklikler ise zar lipitlerinin paketlenme derecelerinde farklılık olduğu bilgisini verdi. Hiyerarşik kümeleme analiziyle (HCA) spektral farklılıklara göre 2-6 aylık Wistar ve 2-6 aylık WAG/Rij grupları başarılı bir şekilde ayrıldı. Bu tez çalışması sayesinde WAGRij sıçanların epileptogenezinde rol oynayabilecek bazı moleküler değişiklikler biyofiziksel parametreler üzerinden FT-IR spektroskopi metodu ile tespit edildi.

Wistar Albino Glaxo from Rijswijk (WAG/Rij) rats, used in the studies for treatment of epilepsy, have no complete absence seizure until 6 months age, whereas the seizures characterized by spontaneous wave discharges are seen from 6 months. Although, brain growth related factors which may play a role in the epileptogenesis of such rats were shown by some studies, the mechanisms of seizures cannot be fully explained. To provide information to this, 2 and 6 months WAG / Rij rat brains were analyzed by Fourier Transform Infrared spectroscopy in comparison to age matched Wistar rats. Bradford and TBARs tests were also performed. Olefinic, CH2 asymmetric, CH2 symmetric, amid I, amid II, C=O, PO-2 symmetric, RNA frequencies and areas were analyzed. When compared to Wistars, significant decrease (p <0.05) in the areas of olefinic, the CH2 asymmetric, the CH2 symmetric and C=O modes revealed a reduction in unsaturated and saturated lipids, cholesterol ester, phospholipid and triacylglycerol. Additionally, significantly lowered (p <0.05) the amide I and amide II band areas suggested a decrease in the amount of protein. The reduction in the CH2 asymmetric bandwidth resulted in a decrease in membrane fluidity, while the shiftings in frequencies of PO-2 simetric and CH2 asymmetric bands showed differences in membrane package. Hierarchical clustering analysis separated Wistar and WAG / Rij groups depending on spectral differences. Hence, some molecular changes that may play a role in the epileptogenesis of WAG/Rij rats were determined by FT-IR spectroscopy method on biophysical parameters.