Ureaplasma Urealyt`un neden olduğu ürogenital sistem enfeksiyonlarının tanısında Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) ve kültür yöntemlerinin karşılaştırılması

Abstract

Bu çalışmada U.urealyticum'a bağlı servisit ve üretrit olgularının tanımlanmasında ELISA yönteminin U.urealyticum antikorlarının gösterilmesinde duyarlılık, özgüllük ve kullanılabilirliği incelenerek kültür yöntemine bir alternatif oluşturup oluşturamıyacağının belirlenmesi amaçlanmıştır. Bu amaçla 102 servisitli ve kontrol grubu olarak 50 sağlıklı kadın ile, 50 üretritli erkekte U9 B broth-A7 B agar kültür kombinasyonuyla U.urealyticum izolasyonu yapılmıştır. Yine hazırlanan ELISA antijen kiti ile, servisitli kadın ve üretritli erkekler ile aynı yaş grubundan sağlıklı 40 kadın ve 40 erkekte, U.urealyticum antikoru araştırılmıştır. 102 servisitli kadının 31'inde (%30.4) ve 50 sağlıklı kadının 5'inde (%10) U.urealyticum üretilmiş ve servisitli kadınlardaki U.urealyticum izolasyon oranı sağlıklı kontrol grubuna göre anlamlı düzeyde yüksek bulunmuştur (p<0.05). 50 üretritli erkeğin 9'unda (%18) U.urealyticum üretilmiştir. Ayrıca bütün gruplarda kantitatif kültür yapılarak örneğin bir mililitresinde üreyen U.urealyticum kolonileri sayılmıştır. U.urealyticum üretilen 31 sevisitli kadının 30'unun (%96.77) serumunda ELISA ile antikor belirlenirken, U.urealyticum üretilemeyen 71 kadının 5'inde (%7.05) antikor bulunmuş ve servisitli kadınlardaki antikor69 bulunuş oranı, kontrol grubuna göre anlamlı düzeyde yüksek bulunmuştur (p<0.05). U.urealyticum üretilen 9 üretritli erkeğin 9'unda (%100), üretilemeyen 41 erkeğin 2'sinde (%4.87) ELISA ile antikor gösterilmiş ve yine aradaki fark önemli bulunmuştur (p<0.05). Bu çalışmada servisitli kadın ve üretritli erkek hastalarda kültür ve ELISA sonuçları arasında korelasyon sırasıyla %86 ve %88 oranında belirlenmiştir. Antikor araştırılmasında kontrol grubunu oluşturan 40 kadının 3'ünde (%7.5) ve 40 erkeğin 1'inde (%2.5) antikor belirlenmiştir. Hasta gruplarındaki antikor bulunuş sıklığı kontrol gruplarına göre anlamlı düzeyde yüksek bulunmuştur. Kantitatif kültürde >107ml koloni saptanan kişilerin serumlarında ölçülen antikor titreleri, <107ml koloni saptananlara göre yüksek bulunmuştur. Yani kantitatif kültür sonuçlarıyla ELISA antikor titreleri arasında anlamlı bir korelasyon bulunmuş (p<0.05) ve ELISA yönteminin aktif enfeksiyonu belirlemede etkili olacağı görülmüştür. ELISA testinin kültür yöntemi temel alındığında %98.4 duyarlılık, %94 özgüllük gösterdiği hesaplanmıştır. Standart bir ELISA yönteminin geliştirilmesi halinde ELISA' nın, U.urealyticum enfeksiyonlarının kültür yöntemiyle tanımlanmasına alternatif olabilecek güvenilir, ucuz ve kolay uygulanabilen, çabuk sonuçlanan bir yöntem olduğu sonucuna varılmıştır. Böylece bir laboratuarda zorlukları nedeniyle kültürü yapılmadığı için atlanan U.urealyticum enfeksiyonlarının kolaylıkla bu yöntemle tanımlanmasının mümkün olacağını düşünmekteyiz.

The aim of this study is to describe whether the ELISA method taking into consideration its sensitivity, specifity and utility can become an alternative to the method of culture in the prescription and definition of cervicitis and urethritis due to U.urealyticum. For this purpose, U.urealyticum isolation with U9 B broth-A7 B agar cultural combination was made on a group of 102 cervicitis and control group comprising 50 healthy women and 50 urethritis men. Again with the prepared ELISA antigen kit, U.urealyticum antibody has been studied in groups of cervicitis women and urethritis men, and same age group. It was found that U.urealyticum has been grown in 31 (30.4%) of 102 cervicitis female and in 5 (10%) of 50 healthy female and the percentage of U.urealyticum isolation in cervicitis female had been considerably high (p<0.05). U.urealyticum was found in 9 (18%) of 50 urethritis male. Apart from this, in all the groups, quantitative culture were made and the U.urealyticum colonies on one mililiter of the sample was counted. In 30 (96.77%) of the sera of 31 cervicitis women in whom U.urealyticum was grown, antibody was found with ELISA, while in 5 (7.05%) of 71 women not growing U.urealyticum, antibody was found. And the ratio of antibody in the cervicitis women was considerably high71 compared with the control group (p<0.05). In 9 (100%) of 9 male growing U.urealyticum and in 2 (4.87%) of 41 men not growing U.urealyticum, antibody was found with ELISA, and this difference was also found meaningful (p<0.05). In patients with cervicitis women and urethritis men, correlation rate between culture and ELISA of results was found 86% and 88%. In researches made over the control group about antibody, antibody was found in 3 (7.5%) of 40 women and 1 (2.5%) of 40 men constituting the gruop. It was established that the intensity of the antibody in the patients compared with the control group was very high. The antibody level measured in the sera of the individuals having > 107ml colony in quantitative culture, has been higher that having < 107ml colony. That is to say, a good correlation has been found between ELISA antibody levels and the results of quantitative culture (p<0.05). And it has been also seen that ELISA method is effective in determining active infection. In ELISA test, when the culture method is taken as basis, has 98.4% sensitivity and 94% specifity. In case, a standard ELISA method is developed, it has been established that, the ELISA method can become an alternetive to the cultural identification of U.urealyticum infections and it is a method which is also reliable, cheap, easily applicable and giving fast results. In this way, we think that, in a laboratory where it is difficult to make culture, overlooked U.urealyticum infection can easily identified through this method.