Deneysel siklosporin-A nefrotoksisitesinde Kolşisin`in etkisi

Abstract

ÖZET Nefrotoksisite, Siklosporin A (CysA) kullanımı sırasında ortaya çıkan en önemli yan etkilerdendir. İntersitisyel fibrozis, tübüler atrofi ve af&ent arteriyoler hiyalinizasyon tipik histopatolojik bulgulardır CysA nefrotoksisitesinden sorumlu proinflamatuvar ve fibrozis oluşturan sitokinlerin varlığı gösterilmiştir. Artmış apoptozis, serbest oksijen radikalleri ve transforming growth faktör-p (TGF-P) nefrotoksisite patogenezinde önemli rol oynar. Bu çalışmada deneysel olarak oluşturulan CysA nefrotoksisitesinde kolşisinin etkilerini araştırmayı amaç edindik Çalışmada 24 adet Wistar-albino türü sıçan kullanıldı. Toplam 4 hafta boyunca 3 ayrı gruba ayrılan sıçanlara 15mg/kg dozunda CysA.(cilt altına) ± Kolşisin 30ug/kg (oral) ve kontrol grubunada eşit hacimde zeytinyağı verildi. Dört haftanın sonunda renal fonksiyon testleri, serum CysA, malonil dialdehid (MDA) düzeyleri çalışıldı. TÜNEL metodu ile apoptozis ve immünohistokimyasal metod ile TGF-P ekspresyonu böbrek dokusunda değerlendirildi. Diğer bulgular ışık mikroskopunda değerlendirildi. Dört haftanın sonunda ışık mikroskopisinde fîbrozise rastlanmadı. Belirgin tübüler hasarlarıma ve afferent arteriyoler hiyalinizasyon CysA grubunda diğerlerine göre belirgindi. (p<0.05) TGF-p ekspresyonu kolşisin grubunda kontrolle aynı oranda olup CysA grubundan belirgin olarak azdı (p<0.05). TÜNEL metodu ile apoptozis, kolşisin grubunda CysA grubuna göre önemli azdı (p<0.05). Serum CysA düzeyi her iki grupta da yüksekti. Kreatinin klerensi her iki grupta da kontrole oranla azalmıştı (p<0.05). MDA düzeyleri kolşisin grubunda CysAgrubuna göre daha düşüktü (p>0.05) Sonuç olarak dört haftanın sonunda kolşisin ile CysA nefrotoksisitesinin daha az olduğu gözlendi. Apoptotik hücre ölümü (TÜNEL) ve TGF-p ekspresyonunda da belirgin azalma sağlandı. Tüm gruplarda fibrozis gözlenmedi. MDA seviyesinde kolşisin ile azalma saptandı. Sonuç olarak, kolşisin CysA nefrotoksisitesinde patogenezden sorumlu olan TGF-P, apoptozis ve oksidatif sistemin zararlı etkilerini belirgin olarak azalttığı söylenebilir. Anahtar kelimeler: Apoptozis, Kolşisin, Nefrotoksisite, Siklosporin A, TGF-P

ABSTRACT Nephrotoxicity is the one of the most important side effects in the course of CysA usage. Typical histopathological findings that, stripped interstitial fibrosis, proxymal tubular atrophy and afferent arteriolar hyalinization. Many proinflammatory and profibrotic cytokine presences may be responsible for the CysA nephrotoxicity. Increased apoptosis, free oxygen radicals and transforming growth factor beta may play an important role in the pathogenesis of nephrotoxicity. In this study, we aimed that, investigate the colchicine effects on the CysA nephrotoxicity. Twenty-four Wistar-albino rats were used and divided into three groups; applied in order to 15mg/kg CysA (subcutaneus) ± colchicine 30u.g/kg (orally), and equally dose only olive oil in control group. Renal functions, serum CysA and malonyl dialdehit (MDA) levels were evaluated at the end of four weeks. Apoptosis and TGF-p were detected in renal tissue with TUNEL method and immunohistochemical method, respectively. Other findings were evaluated on the light microscope in routine staining methods. At the end of the fourth weeks, intersititial fibrosis was not found on renal biopsy specimen. Tubulointerstitial toxicity and afferent arteriolar hyalinization was more prominent in CysA group than other groups (p<0.05). TGF-P expression in colchicine group was found to be similar as in the control group, but significantly lower than in CysA group (p<0.05). With TUNEL method, apoptosis was found very low than CysA group in colchicine group (p<0.05). Serum CysA level were similar in two groups. Creatinin clearence was low in the two groups than in controls. Serum MDA level were found lower than CysA group (p<0.05). Finally; colchicine prevented some findings of CysA nephrotoxicity findings and to provide evident decreasing expression in TGF-P and apoptotic cell death (TUNEL). In all groups fibrosis was not found. In period of four weeks reactive oxygen species products level was decreased with colchicine. Colchicine was clearly decreased the apoptosis and TGF-P expressions and harmfull effects of reactive oxygen species products, which responsible of the pathogenesis of the CysA nephrotoxicity. Keywords: Apoptosis, Colchicine, Nephrotoxicity, CyclosporinA, TGF-P, VI