Sıçanlarda hızlı üst çene genişletmesi sonrası vasküler epitelyal büyüme faktörünün nano taşıyıcılarla uygulanması ile üst çene sutural bölgesinde oluşan değişikliklerin incelenmesi

Abstract

Çalışmanın amacı, deneysel üst çene genişletmesi sonrasında altın nano taşıyıcılar ile uygulanan vasküler epitelyal büyüme faktörünün sıçanların üst çene sutural bölgesinde kemik remodelingine etkisinin histomorfometrik olarak incelenmesidir.Çalışmada, 14 haftalık, 250g ağırlığında 5 grup, toplam 30 adet Wistar cinsi sıçanın üst çeneleri, 0,014 inç çapında paslanmaz çelik telden hazırlanmış heliksli genişletme aygıtı kullanılarak transversal olarak genişletilmiştir. Genişletme işleminin 5. gününde laboratuvar şartlarında hazırlanmış altın nano-parçacıklar (AuNP) ve vasküler epitelyal büyüme faktöründen (VEGF) oluşan kimyasal yapıdaki solüsyon sıçanların üst keser dişleri arasından başlayarak palatinal sub-mukozal alana enjekte edilmiştir. Çalışmada 5 grup vardır ve bu grupların hepsinde üst çene genişletmesi yapılmıştır. Bu 5 grupta, enjeksiyonu yapılan kimyasallar farklıdır, bu kimyasallar; serum fizyolojik, AuNP, VEGF, AuNP ile VEGF?nin karışımı ve AuNP+Oligonükleotid+VEGF?dir. Enjeksiyonu takip eden 10. günde sıçanlar sakrifiye edilmişlerdir. Deneyin sonunda, sıçanların üst çeneleri diseke edilmiş ve histomorfometrik inceleme için histolojik kesitler hazırlanmıştır. Boyanan kesitler, Stereoinvestigator 7.0.5 programı kullanılarak analiz edilmiştir. Hacim ölçümleri için Leica C Plan X10 objektif (NA = 0,22) kullanılmıştır.Yapılan çalışmada, izotonik serum fizyolojik enjekte edilmiş kontrol grubu ile AuNP, VEGF, AuNP+VEGF ve AuNP+Oligonükleotid+VEGF enjekte edilmiş deney grupları yumuşak doku, kemik dokusu ve total kemik hacmi açısından karşılaştırılmıştır. Grupların homojenitesini değerlendirmek için Levene testi yapılmıştır (p=0,216, p<0,05). Homojen dağılım gösteren grupların karşılaştırılmasında ANOVA testi ve gruplar arası ikili karşılaştırmalar için de Tukey testi kullanılmıştır. Çalışmanın histolojik değerlendirmesinde VEGF ve AuNP+VEGF grupları arasında ölçülen yumuşak dokuları ve kemik dokusunu içeren total hacim incelendiğinde, VEGF grubunda ölçülen total hacim miktarı AuNP+VEGF grubunda gözlenen total hacimden istatistiksel olarak anlamlı derecede fazla bulunmuştur (p<0,05, p=0,028). AuNP ve VEGF grupları arasında, yumuşak dokuları ve kemik dokusunu içeren total hacim ve tek başına yumuşak doku hacmi karşılaştırmasında, VEGF grubunda ölçülen total hacim ve yumuşak doku hacmi, AuNP grubunda gözlenen total hacim ve yumuşak doku hacmi miktarından istatistiksel olarak anlamlı derecede fazladır (p<0,05, p=0,046), (p<0,05, p=0,046). VEGF ve AuNP+Oligonükleotid+VEGF grupları arasında, ölçülen yumuşak doku hacimleri açısından karşılaştırma yapıldığında VEGF grubunda, AuNP+Oligonükleotid+VEGF grubuna göre yumuşak doku hacminin istatistiksel olarak anlamlı derecede fazla olduğu görülmektedir (p<0,05, p=0,046).Çalışmada elde edilen sonuçlar, VEGF?nin kemik gelişimini arttırdığını; ancak bu tezde anlatılan yöntem ile AuNP?ların VEGF?in hücre içine taşınmasında kullanılmasının kemik gelişimini arttırmadığını ve VEGF?in yumuşak doku gelişiminde önemli role sahip olduğunu göstermiştir.

The aim of the study was to evaluate the bone remodelling effects of vascular epithelial growth factor (VEGF) applied through gold nano-particle (AuNP) carriers at the maxillary sutural region of rats after experimental maxillary expansion by histomorphometric analysis.In this study, a total of 30 Wistar rats that were 14 week old, 250 g weight were divided in 5 groups. Their maxillas were expanded transversally by expansion appliance with helixes that were bended from 0.014 inch diameter stainless steel arch wire. Chemical solution with gold nano particles and vascular endothelial growth factor was prepared in laboratuary conditions and at the 5th day of expansion they were injected between central teeth to the palatinal submucosal region of rats. In the experiment there are 5 groups to which palatal expansion done. In this 5 groups, different chemical solutions as isotonic saline, AuNP, VEGF, AuNP-VEGF mixture and AuNP+Oligonucleotide+VEGF were injected. 10 days after injection rats were sacrificed. At the end of the experiment, maxillas of rats were dissected and histological sections were prepared for histomorphometric evaluation. Stained sections were analysed using Sterioinvestigator 7.0.5 program. For volumetric measurements Leica C Plan X10 objektive (NA = 0.22) was used.In the study, soft tissue, hard tissue and total volumes were evaluated in groups to which isotonic saline (control), AuNP, VEGF, AuNP+VEGF and AuNP+Oligonucleotide+VEGF were injected. Homogenity of variances were examined with Levene test (p= 0.216, p<0.05). Homogeneous distributed groups were compared with ANOVA test and Tukey test was used for paired comparisons. In the histological evaluation of the study when total bone volume that includes soft and hard tissue volumes was considered, a statistically significant increase was seen in VEGF group compared to AuNP+VEGF group (p<0.05, p=0.028). Likewise, a similar statistically significant increase was recorded when soft tissue volume and total volume were considered, again in VEGF group when it was compared to AuNP group (p<0.05, p=0.046), (p<0.05, p=0.046). When soft tissue volume was considered, a statistically significant increase was seen in VEGF group compared to AuNP+Oligonucleotide+VEGF group (p<0.05, p=0.046).Results of the study revealed that even though VEGF accelerates bone remodelling, the use of AuNPs for VEGF transfer into the cell with the method of this study, do not increase bone remodelling. It was also found that VEGF had an important role in soft tissue development.