Deneysel olarak oluşturulan, kontamine edilmiş kritik boyuttaki kemik defektlerinde nigella sativa`nın (timokinon) kemik iyileşmesi üzerine etkilerinin histolojik ve histomorfometrik olarak incelenmesi

Abstract

YILMAZ, A. (2016) Deneysel olarak oluşturulan, Porphyromonas gingivalis ile kontamine edilmiş kritik boyuttaki kemik defektlerinde Nigella Sativa'nın (Timokinon) kemik iyileşmesi üzerine histolojik ve histomorfometrik etkilerinin incelenmesi, Yeditepe Üniversitesi Sağlık Bilimleri Enstitüsü Ağız, Diş ve Çene Cerrahisi Anabilim Dalı Doktora Tezi, İstanbul. Bu deneysel çalışmanın amacı, Nigella sativa (N. Sativa) içeren kollajen membranın P. gingivalis ile enfekte edilen kritik boyutlu kemik defektlerinde kemik iyileşmesi üzerine olan etkisinin histolojik ve histomorfometrik olarak incelenmesidir. Çalışmamızda 42 adet ortalama 250±20 gr ağırlığında dişi Sprague Dawley cinsi sıçan kullanıldı. Sıçanlar randomize olarak altı gruba ayrıldı. Deneklerin tibialarına 3x3 mm boyutunda tek defekt açıldı. Grup 1: Kontrol; Kritik boyutlu defekt bölgesi kendi kendine iyileşmeye bırakıldı. Grup 2: PG; Kritik boyutlu defekt bölgesi, P. gingivalis ile kontamine edilerek hiçbir tedavi uygulamadan kendi kendine iyileşmeye bırakıldı. Grup 3: L-KOL; Kritik boyutlu defekt bölgesine lokal olarak kollajen membran uygulandı. Grup 4: PG+L-KOL; Kritik boyutlu defekt bölgesi P. gingivalis ile kontamine edilip, lokal olarak kollajen membran uygulandı. Grup 5: L-KOL+NS; Kritik boyutlu defekt bölgesine lokal olarak N. sativa içeren kollajen membran uygulandı. Grup 6: PG+L-KOL+NS; Kritik boyutlu defekt bölgesi P. gingivalis ile kontamine edilip lokal olarak N. sativa içeren kollajen membran uygulandı. Deney hayvanları ise 28. günde sakrifiye edildikten sonra histolojik ve histomorfometrik olarak değerlendirildi. İnceleme esnasında bütün gruplardan elde edilen kesitler, yeni kemik oluşumu, yeni kemik yüzeyindeki osteoblast sayısı, kapiller yoğunluk ve doku yanıtı açısından değerlendirildi. Yeni kemik oluşumu N. sativa uygulanan gruplarda diğer gruplara göre istatistiksel olarak daha fazlaydı (p<0,001). Kemik yüzeyindeki osteoblast sayıları açısından değerlendirildiğinde; N. sativa uygulanan gruplarda osteoblast sayısında istatistiksel olarak anlamlı derecede artış olmuştur (p<0.05).N. sativa uygulanan gruplarda diğer gruplara göre kapiller yoğunluğunda istatistiksel olarak anlamlı derecede artış olmuştur (p<0.05). Doku yanıtı açısından değerlendirildiğinde kontrol grubu ile PG, PG+L-KOL ve PG+L-NS grupları arasında ileri derecede anlamlı bir fark bulunmuştur (p<0.001); (p=0,02); (p=0,041). Sonuç olarak lokal olarak N. sativa uygulanan gruplarda yeni kemik oluşumunun diğer gruplara kıyasla anlamlı olarak daha fazla olduğu görülmektedir. Cerrahi olarak oluşturulan P. gingivalis ile kontamine edilen kritik boyutlu kemik defektlerinin iyileşmesinde N. sativa içeren kollajen membran, anti-bakteriyel etkisine bağlı olarak kemik iyileşmesini olumlu yönde etkilemektedir. Anahtar Kelimeler: Nigella Sativa (N. sativa); sıçan tibia; kritik boyutlu kemik defekti; Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis)

YILMAZ, A. (2016). Histological and Histomorphometric Evaluation of Nigella sativa (Thymoquinone) containing collagen membrane on Bone Healing in Experimental Bone Defects contaminated with Porphyromonas gingivalis. Yeditepe University, Health Sciences Institute, Department of Oral and Maxillofacial Surgery, PhD Thesis, İstanbul. The aim of this study was to evaluate the influence of Nigella Sativa (N. sativa) containing collagen membrane on bone healing in experimental critical size bone defects contaminated with Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis), both histologically and histomorphometrically. Forty two female Sprague Dawley rats, weighing 250±20 g were used in this study. Rats were randomly divided into six groups. 3x3mm defects were created on tibia of each rat. The following procedures were performed for each group: Group 1 (Control group): Only critical size defect was created; Group 2 (PG): critical size defect was created and contaminated with P. gingivalis; Group 3 (L-COL): critical size defect was created and covered with collagen membrane; Group 4 (PG-L-COL): critical size defect was created, contaminated with P. gingivalis and covered with collagen membrane; Group 5 (L-COL+NS): critical size defect was created and covered with collagen membrane containing N. sativa; Group 6 (PG+L-COL+NS): critical size defect was created, contaminated with P. gingivalis and covered with collagen membrane containing N. sativa. Rats were sacrificed at 28 days and evaluated both histologically and histomorphometrically. Quantitative measurement for new bone formation and osteoblast lining; semi-quantitative measurement of capillary intensities and tissue response were statistically analyzed. The new bone formation was significantly greater in the N. sativa administered groups compared to other groups (p<0.01). When compared in terms of osteoblast numbers, the number of osteoblasts were significantly found to increase in N. sativa administered groups (p<0.05). N. sativa administered groups showed an increase in capillaries compared to other groups (p<0.05). When control and PG, PG+L-COL and PG+L-COL+NS groups were compared in terms of tissue response, the difference was statistically significant (p<0.001); (p=0,02); (p=0,041). As a result the new bone formation was significantly higher in the N. sativa administered groups compared to other groups. It can be concluded that local administration of N. sativa containing collagen membrane positively affects bone healing due to its antibacterial effects on P. gingivalis contaminated critical size bone defects.Key Words: Nigella Sativa (N. sativa); rat tibia; critical size bone defect; Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis)