Thimerosal`in insan lenfosit hücre kültürlerinde genotoksik, mutajenik ve toksik etkilerinin belirlenmesi

Abstract

Bu çalışmada, organik bir civa bileşiği olan Thimerosal'in ve S-9 lu ortamdaoluşan metabolitlerinin , insan lenfositleri üzerindeki genotoksik, toksik ve mutajeniketkileri araştırılmıştır. Çalışmada; in vitro Kardeş Kromatid Değişimi (KKD) vesitokinez blok mikronukleus (MN) teknikleri kullanılmış ayrıca mitotik indeks (MI)ve sitokinez blok hücre proliferasyon indeksi (CBPI) hesaplanmıştır.Sodyum etil civa ve tiosalisilattan oluşan bu bileşik, biyolojik ürünlerde veaşılarda ; 0.003 - 0,01% (30-100?g/ml) konsantrasyon aralığında bulunmakta veantibakterial , antifungal olarak kullanılmaktadır. 49,6% sı civadan oluşanThimerosal vücuda girdikten sonra etil civaya metabolize olmakta ve özellikle beyinve böbreklerde biriken ve membran ile DNA hasarına neden olan inorganik civayadönüşmektedir.Bu çalışma için kullanılan kan örnekleri sigara kullanmayan sağlıklı üçerkek bireyden alınmıştır. Doz aralığı aşılardaki miktarı göz önüne alınarakbelirlenmiştir. Thimerosal, 100?l lik saf su çözeltisi şeklinde lenfosit kültürlerineeklenmiş ve son konsantrasyonlar; 0,2 ?g/ml 0,4 ?g/ml 0,6 ?g/ml olacak şekildeayarlanmıştır. Negatif kontrol hücre kültürlerine, 100?l lik saf su, pozitif kontrolhücre kültürlerine ise 2?g/ml lik mitomisin-C yada S-9 kullanılan kültürleresiklofosfamid (cyclophosphamid) (1,4?g/ml) eklenmiştir.Sonuçlar tek yönlü varyans analizinde değerlendirilmiştir. İstatistikselanalizde SPSS windows 11 post hoc analiz LSD testi uygulanmıştır. Sonuçlarkontrol guruplarıyla kıyaslandığında; KKD ve MN oranı düşerken MI ve CBPI oranıartmıştır. KKD ve MI değerleri S-9 un varlığından etkilenirken MN ve CBPIdeğerleri etkilenmemiştir.ANAHTAR KELİMELER; Thimerosal , mutajenite, toksisite, mikronukleu

In this study, the genotoxic, toxic and mutagenic potential of thimerosal, anorganic mercury compound, and the metabolite of thimerosal in cultures with S-9were investigated in human lymphocyt cells, using Sister Chromatid Exchange(SCE), micro nucleus (MN), mitotic indeks (MI) and Cytokinezis blok cellprolipheration indeks (CBPI).This compound (sodium ethyl mercury-thiosalicylate) is an antibacterial andantifuncal in biological production and vaccines, in concentrations ranging from0.003 to 0,01% (30-100?g/ml). Thimerosal containings 49,6% mercury weight andrealises ethyl mercury as a metabolite. In the body ethylmercury can be converted tothe inorganic mercury , which then preferentially accumulats in the kidneys andbrain inorganic mercury is known to induce membran and DNA demage.The study was carry out by using blood samples from three healtynonsmoking male donors , aged 25 years. The dose range was selected according toamount in vaccines of thimerosal. Thimerosal was added to cell cultures in 100?l ofdouble-distilled water to final concentrations of 0,2?g/ml 0,4 ?g/ml 0,6 ?g/ml.Negative control cell cultures received 100?l of water without thimerosal.Mitomycin C (2?g/ml) or cyclophosphamide for culture with S-9 (1,4?g/ml) wasused as a positive control.Data were compared by one-way variance analysis. Statistical analysis wasperformed using the SPSS for Windows 11 package program post hoc analysis wasperformed by lest significant difference (LSD) test. The results of the frequency ofSCE , MN, and the values MI and CBPI for each dose and control groups arecompaired. All doses of Thimerosal caused the increase in the frequency ofSCE,MN, and a decrease in the frequency of MI, CBPI. Values of SCE and MIwere affected from S-9 and values of MN CBPI were not affected from S-9.KEY WORDS; Thimerosal, mutagenity, toxicity, micronucleus