Siklosporin A içeren katı lipit nanopartikül, mikroemülsiyon ve polimerik nanopartikül formülasyonlarının hazırlanması ve in vitro-in vivo değerlendirilmesi

Abstract

Kornea nakillerinden sonraki ve kuru göz sendromu gibi rahatsızlıklarıntedavisinde siklosporin A (CsA) göze topik olarak uygulanmaktadır. CsA'nınsistemik emilimi oldukça düşük olup, uygulanan dozaj şeklinin yapısı ve hastanındurumuna bağlı olarak plazma konsantrasyonları bireyler arasında farklılıkgöstermektedir. Bu nedenle, bu çalışmada, oküler uygulamaya yönelik olarak katılipit nanopartikül (SLN), mikroemülsiyon (ME) ve polimerik nanopartikül (PN)formülasyonları hazırlanmış ve topik uygulama ile CsA'nın emilimininarttırılması yolu ile, bireyler arasındaki farklılıklar en aza indirilmeye çalışılmıştır.Kararlılık çalışmalarında, hazırlanan sistemlerin farklı sıcaklık ortamlarındakidavranışları incelenmiştir. Formülasyonların parçacık ve damlacık büyüklükleriçalışma süresince nanometre aralığında kalmıştır. Katyonik lipit eklenerek pozitifduruma getirilen elektriksel iletkenlik değerleri, saklama süresince değişmeyerekhazırlanan sistemlerin kararlılığını göstermiştir. SLN sistemlerinde lipit yapılarındeğişmediği X-ışını kırınım (XRD), infrared (IR) ve nükleer manyetik rezonans(NMR) analizleri ile kanıtlanmıştır.Hazırlanan üç farklı sistemden birer formülasyon kararlılık çalışmaları sonuçlarıdoğrultusunda in vivo çalışmalar için belirlenmiştir.Koyunlarda gerçekleştirilen in vivo çalışmalarda, seçilen formülasyonlarkoyunların gözlerinden birine uygulanmış, diğer göze kontrol amacı ile ilaçuygulanmamıştır. Belli sürelerde gerçekleştirilen kesimler sonrasında koyunlarınher iki gözleri de çıkartılarak hümör aköz ve hümör vitröz sıvıları toplanmış ve busıvılarda enzim immün yöntemi analiz cihazı (EIA) ile belirlenen CsA miktarlarıyardımıyla maddenin oküler emilimi araştırılmıştır.Elde edilen in vivo analiz sonuçlarına göre, CsA'nın 48 saat süresince hümör aközve hümör vitrözde bulunduğu saptanmıştır. CsA'nın hümör vitrözde bulunmasıile, emilimin gözün iç kısımlarına kadar arttırılabildiği gözlenmiştir. Analizsonuçlarının birbirine olan yakınlıkları, bireyler arasındaki farklılığınformülasyonların emilim derecesini değiştirmediğini ortaya koymuştur.Anahtar Kelimeler: Siklosporin A, oküler emilim, hümör aköz, hümör vitröz

Cyclosporine A (CsA) is applied topically in the therapy of disorders after cornealtransplantation and dry eye syndrome. Systemic absorption of CsA is quite lowand there is inter-individual variation in plasma concentrations depending on thedosage form applied and the story of the patient. Therefore, in this study, solidlipid nanoparticle (SLN), microemulsion (ME) and polymeric nanoparticle (PN)formulations were prepared aiming the ocular delivery of CsA with an attempt todecrease the inter-individual variation through increasing the topical absorption.In the stability studies, behaviours of the formulations prepared were investigatedat different conditions. Particle and globule sizes of the formulations remained inthe nanometer range during the stability studies. Positively charged zeta potentialsobtained with the addition of cationic lipid remained unchanged showing thestability of the formulations. Lipid strucrures of SLNs were verified to beunchanged by the X-ray diffraction (XRD), infrared (IR) and nuclear magneticresonance (NMR) analyses.Three formulations among the three different systems were selected for the invivo studies considering the stability test results.In the in vivo studies carried on the sheep, formulations were applied topically tothe one of the eye and the other eye remained untreated as a reference. Atappropriate time intervals, sheep were sacrificed and the aqueous and vitreoushumour samples of the eyes were collected and analysed by enzyme immuneassay (EIA) analyzer. Ocular absorption of CsA was evaluated according to theEIA results of the CsA samples obtained previously.According to the in vivo analysis results, CsA was determined in the aqueous andvitreous humour samples in 48 hours. Detection of CsA in the vitreous humourshowed the efficient absorption of the drug to the deeper layers of the eye.Similarity of the analysis results demonstrated that inter-individual variance didnot affect the absorption level.Key Words : Cyclosporine A, ocular absorption, aqueous humour, vitreoushumour