Servikste Notch sinyalizasyonu üzerinde indometazin ile surfaktan-A` nın rolünün belirlenmesi ve preterm doğumun önlenmesi

Abstract

Amaç: Mekanizmalar açık olmasa da, enfeksiyon preterm doğum için öne sürülen enönemli nedenlerden biridir. Bu nedenle tedavi odaklı pek çok çalışma yapılmaktadır.Surfactant A (SP-A) gebelik için mükemmel bir güvenlik profiline sahip endojen fetal birmaddedir. Bu çalışmanın amacı; SP-A ve bir prostaglandin inhibitörü olan İndomethacin(IND)' nin erken doğumu önleme potansiyelini daha ayrıntılı tanımlamak ve SP-A' nıngebelerde preterm doğum için koruyucu bir ajan olarak kullanım potansiyelinibelirleyebilmektir.Yöntem: RAW (267.7 Mouse Macrophage Cell) ve RAW Blue (267.7 MouseMacrophage Reporter Cell Line) hücrelerinin kullanıldığı kültür ortamında, SP-A ilefragmentlerine ait doz ve etki süresi belirlemesi yapılarak, SP-A ve IND'nin etkisi,lipopolysaccharide (LPS) indüklü cerrahi model üzerinde, koitus sonrası 14.5 günlük gebeCD-1 fareleri kullanılarak değerlendirilmiştir.Bulgular: 5 saatlik 0.2 ng/ml LPS indüksiyonu sonrası RAW hücrelerinde PolymeraseChain Reaction (PCR) ile doğrulanan Interlökin 1 beta (IL1ß) ekspresyonununoluşturduğu inflamatuar cevabı, SP-A; 20 ug/ul ile baskılamaktadır. Aynı doz LPS ileindüklenen deney hayvanı modelinde LPS aracılı erken doğum yapan grupta Notchaktivitesinin arttığı ve SPA ve IND' nin özellikle mast hücreleri ile Jag-2 aracılımodülasyon yaptığı görüldü.Sonuç: SP-A ve fragmentlerine ait doz zaman eğrisi incelendiğinde, SP-A' nıninflamatuar yanıtı baskıladığı ancak SP-A'yı oluşturan parçaların farklı cevapözelliklerine sahip olabileceği görülmüştür. Ayrıca, SP-A'nın moleküler etkimekanizmasının karakterize edilmesinde Notch sinyali ile bağlantısının incelenmesininönemli olduğu tespit edildi. Bu alanda daha çok araştırmanın yapılmasına ihtiyaçduyulmakla birlikte, bu çalışma, SP-A için, tedavi amaçlı ilaç dizaynına yardımcıolacaktır.Anahtar Kelimeler: SP-A, Indomethacin, Notch, Serviks

Objective: Although the mechanisms are not clear, infection is one of the most importantreasons for preterm labor. For this reason, many studies are carried out for treatment.Surfactant A (SP-A) is an endogenous fetal substance with an excellent safety profile forpregnancy. The aim of this study is to identify the potential of indomethacin (IND) whichis a prostaglandin inhibitor and of the SP-A as a protective agent for preterm delivery inpregnant women.Method: The dose-effect duration of SP-A and fragments was determined using RAWand RAW Blue cells. The effect of SP-A and Indomethacin was evaluated on a LPSinduced surgical model using 14.5 dpc CD-1 mice.Results: After induction with 0.2 ng/ml LPS for 5 hours, expression of IL1β by PCR inRAW cells was evaluated. This effect was suppressed in RAW Blue cells with 20 ug/mland evaluated by Quanti Blue analysis. The response of the fragments is differentdepending on the dose and time. Molecular structure after Commassie Blue staining; themonomeric (24 kDa) and dimeric (50-60 kDa) for the full-length SP-A. KINK (22 kDa)was detected as CDM (4 kDa) with GLOB (28 kDa) and PL (2 kDa) with smallerfragments. In the experimental animal model induced by the same dose LPS. The Notchactivity in the LPS-mediated preterm delivery group was increased. At the same time,SPA and IND affected the Jag-2 mediated mast cell modulation.Conclusion: When the dose time curve of SP-A and fragments was examined, it was seenthat SP-A suppressed the inflammatory response, but SP-A components had differentresponse characteristics. In addition, it was determined that SP-A was important toinvestigate the linkage of Notch signal in characterizing the molecular mechanism ofaction. Although more research is needed in this area, this study will be help the design todrug for SP-A.Keywords: SP-A, Indomethacin, Notch, Cervix