Tocilizumab`ın deneysel subaraknoid kanama sonrası serebral vazospazm üzerine etkileri

Abstract

Amaç: IL-6 inhibitörü olan tocilizumab hem romatoid artrit hem de Behçet hastalığı gibiotoimmün rahatsızlıklarda anti-inflamatuvar etkili bir ilaç olarak kullanılmıştır. Bunun yanındapatofizyolojisinde inflamasyonun da yer aldığı serebral iskemide de aynı şekildekullanılmıştır.Ancak SAK sonrası gelişen vazospazm da etkisi bilinmemektedir. Bu çalışmanınamacı tocilizumabın SAK sonrası gelişen vazospazm üzerine etkilerini biyokimyasal,histopatolojik ve fonksiyonel etkilerini olarak incelemektir.Yöntem:Bu çalışmada 48 adet erişkin 300-350 gr ağırlığında erkek Wistar albino ratkullanılmıştır. Ratlar 4 gruba ayrılmıştır: grup 1 (kontrol), grup 2(SAK), grup 3(SAK+salin), grup4(SAK+tocilizumab). Tocilizumab tedavisi (8mg/kg/gün ip) olarak verilmiş ve tedaviye SAKoluşturulduktan sonra başlanarak tedavi 72 saat sürdürülmüştür. Ratlar sakrifiye edildikten sonraratların beyin dokularında bcl-2(bax), caspase-3, STAT-3, IL-6, IL-1, TNF- ve VEGFdüzeyleri ve beyin sapından elde edilen baziller arter kesitlerinde Hemotoksilen-Eozin ve Tunelyöntemleri ile nöronal hasar, baziller arter çapı ve apopitozis skoru hesaplanacaktır Çalışmasonrası elde edilen değerler SPSS 21.0 (Windows için SPSS, version 21.0; SPSS, Chicago,ABD) programı ile değerlendirilmiştir.Verilerin gruplar arası karşılaştırılmasında KruskalWallis varyans analizi kullanıldı. Gruplar arası veri farkları bulunduğunda gruplararası hangiverilerin farklı olduğunu belirlemek için Mann Whitney U kullanıldı. İstatistiksel olarak p<0.05anlamlı olarak kabul edildi. Sonuçlar tablo ve grafiklerle gösterildi.Bulgular:Yaptığımız histolojik çalışmada apopitozis varlığını gösteren TUNEL pozitifendotel hücre yüzde ortalamalarının SAK ve SAK+Salin grubunda kontrol grubuna göreistatistiksel olarak anlamlı arttığı belirlendi. Toc'un ise TUNEL pozitif endotel hücre yüzdeortalamasını istatistiksel olarak anlamlı düşürdüğü belirlendi.Çalışmamızda, SAK sonrasındabaziller arter duvar kalınlığında artış ve lümen alanı ortalama ölçüm değerlerinde ise azalmameydana gelmiştir. İnflamatuar Sitokinler olan IL6, TNF- ve IL-1 seviyesinde SAK veSAK+salin grubuna göre anlamlı oranda azalma, propopitotik bax ve caspaz seviyesinde SAK veSAK+salin grubuna göre anlamlı azalma, anjiogenez molekulü olan VEGF'de SAK veSAK+Salin grubuna göre anlamlı zalma tespit ettik.Sonuç: Tocilizumab tedavisininin etkilerini araştırdığımız deneysel çalışmamızda SAKsonrası artan endotel apopitozisini ve arter duvar kalınlığını azalttığı, lümen alanında meydanagelen daralmayı engellediği, nöroprotektif etkide artış sağladığı ve inflamasyonda azalmasağladığı gösterilmiştir.Anahtar Kelimeler: Subaraknoid Kanama, Vazospazm, Tocilizumab, Rat

AIM: . Tocilizumab, which is an IL-6 inhibitor, has been used as a medication with antiinflammatoryeffects in autoimmune diseases like rheumatoid arthritis and Behcet's disease. Inaddition, it has been used in the same way in cerebral ischemia whose pathology includesinflammation. However, its effects are not known in vasospasm that develops after SAH.METHODS:In this study, 48 adult male Wistar albino rats weighing 300-350 grams wereused.Rats were divided into 4 groups: group 1 (control), group 2 (SAH), group 3 (SAH + saline),group 4 (SAH + tocilizumab).Tocilizumab treatment was given at a dose of 8mg / kg / day andtreatment was continued for 72 hours after the SAH was established.After the rats are sacrificed,bcl-2(bax), caspase-3, STAT-3, IL-6, IL-1, TNF- and VEGF levels in the brain tissues ofratsand neuronal damage, basilar artery diameter, and apoptosis score will be calculated byHemotoxylin-Eosin and Tunel methods in basilar artery sections obtained from brain stem.Values obtained after the study were evaluated by SPSS 21.0 (SPSS for Windows, version 21.0;SPSS, Chicago, USA) program.Kruskal Wallis analysis of variance was used for comparison ofdata between groups. Mann Whitney U test were used to determine which data differ betweengroups when data differences between groups were found.Statistically, p <0.05 was consideredsignificant. The results are shown in tables and graphs.RESULTS: In our histological study, it was determined that the percentages of TUNELpositive endothelial cells that reveal the existence of apoptosis increased statistically significantlyin the SAH and SAH + Saline group compared to the control group.Tocilizumab decreased themean percentage of TUNEL positive endothelial cells in a statistically significant manner.In ourstudy, basilar artery wall thickness was increased and mean luminal area was decreased afterSAH. In our study we found significant reduction in levels of inflammatory cytokines (IL6, TNF- and IL-1) compared to SAK and SAK + Saline group. Propitotic bax and caspase levels weresignificantly lower than the SAK and SAK + saline groups and alsothere is a significant decreasein the angiogenesis molecule VEGF compared to the SAK and SAK + Saline group.CONCLUSION:In our experimental study investigating the effects of Tocilizumabtreatment, it has been shown that tocilizumab reduces the endothelial apoptosis and increasedarterial wall thickening after SAK, prevents narrowing in the lumen area, increasesneuroprotective effect and decreases inflammation.Keywords: Subarachnoid Hemorrhage, Vasospasm, Tocilizumab, Rats