İloprost`un deneysel aortik iskemi-reperfüzyon modelinde femoral arter endoteli ve gastroknemius kası hasarı üzerine etkisi

Abstract

Amaç: Bu çalışmanın amacı, infrarenal abdominal aorta ( AA) okluzyon-reperfüzyonu sonrasıfemoral arter endoteli ve gastroknemius kasında oluşan iskemi-reperfüzyon ( -R) hasarınailoprost'un etkisini araştırmaktır.Materyal ve Metod: Yirmi dört adet Wistar-Albino rat rastgele ve eşit sayıda (n = 8) olarak üçgruba ayrıldı. Kontrol grubunda, laparotomi ve AA diseksiyonu yapıldı ama AA'ya oklüzyonuygulanmadı. Aortik iskemi reperfüzyon (A R) grubunda, AA diseksiyonu sonrası AA'ya kros-klemp konularak 120 dakika iskemi ve kros-klemp kaldırılarak 120 dakika reperfüzyon uygulandı.A R+iloprost grubunda, A R işlemine ek olarak, 120 dakikalık reperfüzyon süresince, kuyruk venikullanılarak i.v 0,45 µg/kg/saat dozda iloprost ( lomedin®, Bayer Schering Pharma AG, Berlin,Germany) infüzyonu yapıldı. Deney sonunda tüm ratlardan, biyokimyasal analizler için kan örneğive histopatolojik değerlendirme için gastrokunemius kas ve femoral arter doku örnekleri alındı. Kanörneklerinde malondialdehid (MDA), kreatin fosfokinaz (CPK), intercellular adhesion molecule-1(ICAM-I), vascular cell adhesion molecule-1 (VCAM-I) ve P selektin plazma düzeyleri ölçüldü.Femoral arter ve gastroknemius kas doku örneklerinde ise, ışık mikroskobu kullanılarak, P selektin,L selektin, tumor necrosis factor-α (TNF-α), CD11b, CD18, ICAM-1 ve cyclooxygenase-2 (COX-2) için immünohistokimyasal değerlendirme yapıldı.Sonuçlar: Biyokimyasal incelemede, A R grubu MDA, CPK, P Selektin, VCAM-1 ve ICAM-1plazma düzeyleri kontrol grubu düzeylerine göre anlamlı derecede yüksekti (p < 0.05).A R+iloprost grubu MDA, CPK, P selektin ve ICAM-1 plazma düzeyleri ise A R grubudüzeylerine göre anlamlı derecede düşüktü (p < 0.05). Femoral arter örneklerinin histopatolojikincelemesinde, A R grubu P selektin, L selektin, TNF-α, CD11b, CD18, ICAM-1 ve COX-2(endotel ve adventisya) immünoreaktivitesinin kontrol grubuna göre anlamlı derecede yüksekolduğu (p < 0.05), A R+iloprost grubunda ise P selektin, L selektin, TNF-α, CD11b, ICAM-1 veCOX-2 (endotel ve adventisya) immünoreaktivitesinin A R grubuna göre anlamlı derecede düşükolduğu (p < 0.05) saptandı. Gastroknemius kas örneklerinin histopatolojik incelemesinde, A Rgrubu P selektin, L selektin, TNF-α, CD11b, CD18, ICAM-1 ve COX-2 immünoreaktivitesininkontrol grubuna göre anlamlı derecede yüksek olduğu (p<0.05), A R+iloprost grubunda ise Pselektin, L selektin, CD18 ve COX-2 immünoreaktivitesinin A R grubuna göre anlamlı derecededüşük olduğu saptandı (p < 0.05).Tartışma: Bu çalışmanın sonuçları, iloprost'un, AA okluzyon-reperfüzyonu sonrası femoral arterendoteli ve gastroknemius kasında oluşan -R hasarını azalttığını göstermektedir. loprost'un buyararlı etkisi, A R sonrası artmış lokal ve sistemik adezyon molekülleri ifadesini azaltmasınabağlıdır.

Purpose: The purpose of the present study was to examine the effect of iloprost on ischemia-reperfusion ( -R) injury at femoral artery endothelium and gastrocunemius muscle after occlusion-reperfusion of infrarenal abdominal aorta (IAA).Material and Methods: Twenty four Wistar-Albino rats were randomized in equal numbers (eightper group) into three groups. Control group underwent laparotomy and dissection of the IAAwithout occlusion. Aortic ischemia reperfusion (AIR) group underwent dissection of the IAA andthen ischemia and reperfusion performed by clamping of the IAA for 120 minutes and declampingof the IAA for 120 minutes respectively. In AIR+iloprost group, in addition to AIR, rats receivedintravenous infusion of iloprost ( lomedin®, Bayer Schering Pharma AG, Berlin, Germany), with adosage of 0,45 µg/kg/hour via tail vein during 120 min of reperfusion. At the end of the experiment,blood samples for biochemical analysis and, femoral artery and gastrocunemius muscle tissuesamples for histopathological examinations were taken from all rats. In blood samples, plasmalevels of malondialdehyde (MDA), creatine phosphokinase (CPK), intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-I), vascular cell adhesion molecule (VCAM-1) and P selectin were measured. In femoralartery and gastrocunemius muscle tissue sections, by using light microscope, immunohistochemicalanalyses were done for P selectin, L selectin, tumor necrosis factor-α (TNF-α), CD11b, CD18,ICAM-1 (CD54) and cyclooxygenase-2 (COX-2).Results: Biochemical analysis showed that, in the AIR group, plasma levels of MDA, CPK, Pselectin, VCAM-1 and ICAM-1 were significantly higher than the levels in the control group(p<0.05). In the AIR+iloprost group, plasma levels of MDA, CPK, P selectin and ICAM-1 weresignificantly lower than the levels in the AIR group (p < 0.05). Histopathological examination ofthe femoral artery sections showed that, in the AIR group, immunoreactivity of P selectin, Lselectin, TNF-α, CD11b, CD18, ICAM-1 and COX-2 (endothel and adventitia) were significantlyhigher than in the control group (p < 0.05). In AIR+iloprost group, immunoreactivity of P selectin,L selectin, TNF-α, CD11b, ICAM-1 and COX-2 (both endothelial and adventitial expression) weresignificantly lower than in the AIR group (p < 0.05). Histopathological examination of thegastrocunemius sections showed that, in the A R group, immunoreactivity of P selectin, L selectin,TNF-α, CD11b, CD18, ICAM-1 and COX-2 were significantly higher than in the control group (p <0.05). In the AIR+iloprost group, immunoreactivity of P selectin, L selectin, CD18 and COX-2were significantly lower than in the AIR group (p < 0.05).Conclusion: The results of this study show that, iloprost attenuates I-R injury in femoral arteryendothelium and gastrocunemius muscle after occlusion-reperfusion of IAA. This beneficial effectof iloprost is due to decrement of increased local and systemic expression of adhesion molecullesafter AIR.