Deneysel alerjik rinit modelinde siklosporin ve siklofosfamid`in topikal intranazal kullanılmasının etkileri

Abstract

Bu çalışmada, ağırlıkları 1500-2500 gr arasında değişen 40 adet beyaz YeniZelanda yetişkin erkek tavşanı çalışmaya dahil edildi. Hayvanlar her grupta 10 tavşanolmak üzere 4 gruba ayrıldı. 1. gruba 7 gün süreyle intranazal serum fizyolojik (Kontrolgrubu) verildi. 2. grup chicken serum albumin (OVA, grade III) (Sigma-AldrichChemical CO. St. Louis, MO) ile sensitize edildi ve başka ilaç verilmedi. 3. grupOvalbumin ile sensitize edildi Siklosporin (Sandimmun® Novartis) topikal intranazalyedi gün süreyle verildi. 4.grup Ovalbumin ile sensitize edildi ve Siklofosfamid(Endoxan® Baxter Oncology GmbH) topikal intranazal yedi gün süreyle verildi.Birinci grup hayvanlar 15. günde, ikinci grup hayvanlar sensitizasyonabaşladıktan sonraki 15. günde, topikal ilaç uygulanan üçüncü ve dördüncü grup topikalilaç uygulaması bitiminden yirmidört saat sonra anestezi sağlandıktan sonra sakrifiyeedildi.Hayvanların nazal kavite, nazal septum, paranazal sinüs ve konkaları blokolarak çıkarılarak %10'luk nötral formaldehit ile fikse edildikten sonra %10'luk nitrikasit ile dekalsifiye edildi ve 3-5 mikrometre kalınlığında kesitler alındı veHematoksilen- Eozin ile boyandı. Işık mikroskobu altında her bir hayvana ait kesitlerayrı ayrı, silyum kaybı, yassı hücreli metaplazi, goblet hücre artışı, bağ dokusu artışı,vasküler konjesyon, vasküler proliferasyon, inflamatuar hücre infiltrasyonu, eozinofilinfiltrasyonu, kondrositlerde hipertrofi, mukozal bezlerde dejenerasyon derecesideğerlendirilerek skorlandı.Siklosporin grubunda inflamatuar hücre infiltrasyonu, vasküler konjesyon,vasküler proliferasyon, silyum kaybı, yassı hücreli metaplazi Ovalbumin grubuna göreistatistiksel olarak anlamlı derecede düşük tespit edildi (p=0.023, p=0.000, p=0.000,p=0.007, p=0.002). Eozinofil infiltrasyonunda ve Goblet hücre sayısında ise düşüklüktespit edildi fakat istatistiksel olarak anlamlı değildi (p=0.052, p=0.529 ).Siklofosfamid grubunda inflamatuar hücre infiltrasyonu, vasküler konjesyon vevasküler proliferasyon Ovalbumin grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı derecededüşük tespit edildi (p=0.019, p=0.000, p=0.000). Eozinofil infiltrasyonunda ve Goblethücre sayısında ise düşüklük tespit edildi fakat istatistiksel olarak anlamlı değildi(p=0.123, p=0.190).Goblet hücre hiperplazisi kontrol grubu hariç tüm gruplarda görüldü. Gruplarbirbiri ile kıyaslandığında (Ovalbumin-siklosporin, ovalbumin-siklofosfamid,siklosporin-siklofosfamid) istatistiksel olarak anlamlı fark görülmedi (p=0.529,p=0.190, p=0.481).Ovalbumin ile sensitizasyon sonrası OVA spesifik IgE değerlerinin yükseldiğitespit edildi. Siklosporin ve Siklofosfamid uygulaması sonrası değerlerin düştüğünügörüldü ve bu sonuçlar istatistiksel olarak anlamlı bulundu (p=0.000, p=0.000).Sonuç olarak, Siklosporin ve Siklofosfamid alerjik rinitte alternatif tedaviolarak kullanılabilir. Bunun için kontrollü klinik çalışmalara ihtiyaç vardır.Anahtar kelimeler: Siklosporin, siklofosfamid, ovalbumin, alerjik rinit

In this study, 40 white New Zeland adult male rabbits which the weightsranging 1500-2500 gram were used. Animals divided into 4 groups that each groupcontains 10 animals.In the first group, intranasal saline was administered for 7 days. In the secondgroup, sensitization was completed by chicken serum albumin (OVA, grade III) (Sigma-Aldrich Chemical CO. St. Louis, MO) and no other drug was administered. In the thirdgroup, sensitization was completed by OVA and Cyclosporine (Sandimmun® Novartis)was administered topical intranasal for 7 days. In the fourth group, sensitization wascompleted by OVA and Cyclophosphamide (Endoxan® Baxter Oncology GmbH) wasadministered for 7 days.In the first group, animals were sacrificed at the end of the second week, in thesecond group animals were sacrificed at the 15.day after beginning sensitisation; thethird and fourth group were sacrificed after 24 hours stopping of topical drugadministration.Nasal cavity, nasal septum, paranasal sinuses and turbinates of animals weredissected without disintegrating and put in 10 % neutral buffered formalin, thendecalcified with 10 % nitric acid and 3-5 micrometer sections were taken and stainedwith Hematoxylen-Eosine.All the sections were examined and scored with respect to ciliary loss ofepithelial cells, squamous cell metaplasia, quantity of goblet cells, thickness ofconnective tissue, vascular congestion, vascular proliferation, severity of inflammatorycell infiltration, eosinophile infiltration, hypertrophy of chondrocyte and degenerationof mucosal glands.Cyclosporine statistically significantly gave rise to lesser inflammatory cellsaccumulation, vascular congestion, vascular proliferation, ciliary loss of epithelial cells,squamous cell metaplasia compared to ovalbumin group (p=0.023, p=0.000, p=0.000,p=0.007, p=0.002). Cyclosporine caused to lesser eosinophile infiltration and quantityof goblet cells compared to ovalbumin, but this was statistically insignificant (p=0.052,p=0.529).Cyclophosphamide statistically significantly gave rise to lesser inflammatorycells accumulation, vascular congestion, vascular proliferation compared to ovalbumingroup (p=0.019, p=0.000, p=0.000). Cyclophosphamide caused to lesser eosinophileinfiltration and quantity of goblet cells compared to ovalbumin, but this was statisticallyinsignificant (p=0.123, p=0.190).Goblet cell hyperplasia was seen in all groups except in (saline) control group.According to Goblet cell hyperplasia when the groups compared to each other(Ovalbumin - Cyclosporine, ovalbumin - Cyclophosphamide, Cyclosporine-Cyclophosphamide) the difference was statistically insignificant (p=0.000, p=0.000).After sensitisation with Ovalbumine, OVA spesific IgE was increased. Afteradministration of Cyclosporine and Cyclophosphamide OVA specific IgE wasdecreased, this was statistically significant (p=0.000, p=0.000).In conclusion; Cyclosporine and Cyclophosphamide are preferable agents inallergic rhinitis, in which further clinical trials are needed.Key words: Cyclosporine, Cyclophosphamide, ovalbumin, allergic rhinitis