UVB ışığına maruz kalan epidermal hücrelerde insan adipoz doku mezenkimal kök hücrelerinin onarıcı ve canlandırıcı etkilerinin araştırılması

Abstract

Epidermal hücreler, ciltte oluşan yaraların iyileşmesi için önemli bir rejeneratif kaynaktır. UVB (Ultraviyole B) ışığına maruz kalarak yaşlanma etkisi oluşturulan epidermal hücrelerin kendilerini yenileme ve cilt hasarını onarmadaki yetenekleri azalmıştır. UV radyasyonu özellikle UVB, insan epidermal hücrelerin canlılığını baskılayarak cildin foton yoluyla yaşlanmasına neden olurlar. Adipoz doku mezenkimal kök hücre ortam medyumunun rejeneratif özelliklere sahip olduğu düşünülmektedir. Bu çalışmada amaç, insan adipoz doku mezenkimal kök hücrelerin UVB ışığına maruz kalan insan keratinositlerinde (HaCaT cell lines) onarıcı ve canlandırıcı etkilerin araştırılmasıdır. Ayrıca, kök hücrelerin canlandırıcı etkilerini araştırmak amacıyla Mcl-1 ve p-ERK 1/2 proteinleri ELISA yöntemiyle saptanmıştır. Böylece, sayısal veriler kullanılarak yapılan istatiksel değerlendirme sonucunda daha kantitatif sonuçlara ulaşmak hedeflenmiştir. Epidermal hücrteler dört kez pasajlandı ve UVB ışınına maruz bırakıldı. Işın almayan hücreler ise kontrol grubu olarak kullanıldı. Hücreler farklı konsantrasyonlarda ADMSC (adipoz doku mezenkimal kök hücre ortam medyumu) ile tedavi edildi. UVB (-) hücreler ile kıyaslandığında UVB (+) hücrelerde proliferasyon hızı önemli ölçüde azaldı (p<0.05). ADMSC ortam medyumunun uygulanmasıyla hücre canlılığının arttığı ve %100'lük ADMSC ortam medyumunda en yüksek değere ulaştığı saptandı. ADMSC ortam medyumunun migrasyonu artırdığı belirlendi. Apoptoz analizinde ADMSC ortam medyumu ile apoptozun arttığı saptandı. UVB (+) HaCaT hücrelerinde, Mcl-1 ve p-ERK 1/2 proteinlerinin düzeyleri azalmış ancak ADMSC ortam medyumunun uygulanması ile birlikte doza bağlı artışlar görülmüştür. Her iki protein düzeyi de %100'lük konsantrasyonda en yüksek değerine ulaşmıştır. ADMSC ortam medyumu içindeki faktörlerin, özellikle UVB (+) keratinositlerin prolifeasyonunu desteklediği, rejeneratif ve reperatif etkilere sahip olduğu saptanmıştır.Anahtar Kelimeler: İnsan Adipoz Doku, Mezenkimal Kök Hücre, Epidermal Hücre, UVBIşını, Onarıcı, Canlandırıcı.

Epidermal cells are an important regenerative source for the healing of wounds on the skin. Exposure to UVB (Ultraviolet B) light has reduced the ability of epidermal cells to regenerate and repair skin damage. UV radiation, in particular UVB, causes skin aging through photon by suppressing the viability of human epidermal cells. Adipose tissue mesenchymal stem cell media medium is thought to have regenerative properties. The aim of this study was to investigate the restorative and invigorating effects of human adipose tissue mesenchymal stem cells on human keratinocytes exposed to UVB light (HaCaT cell lines). In addition, Mcl-1 and p-ERK 1/2 proteins were determined by ELISA method to investigate the invigorating effects of stem cells. Thus, it is aimed to reach more quantitative results as a result of statistical evaluation using numerical data.Epidermal cells were passaged four times and exposed to UVB. Non-radiating cells were used as the control group. Cells were treated with different concentrations of ADMSC (adipose tissue mesenchymal stem cell media medium). When compared with UVB (-) cells, the rate of proliferation in UVB (+) cells decreased significantly (p <0.05). It was determined that the cell viability increased with the application of ADMSC medium media and it reached the highest value in the ADMSC medium media of 100%. ADMSC media medium increased migration. Apoptosis analysis showed that apoptosis was increased with ADMSC medium medium. In UVB (+) HaCaT cells, the levels of Mcl-1 and p-ERK 1/2 proteins were decreased but dose-dependent increases were observed with the application of ADMSC medium medium. Both protein levels reached the highest value at a concentration of 100%. The factors within the ADMSC medium medium were found to support the proliferation of UVB (+) keratinocytes, and to have regenerative and reperative effects.Key words: Human Adipose Tissue, Mesenchymal Stem Cell, Epidermal Cell, UVB Ray,Regenerative,Reparative.