3-kloro-6sübstitüepiridazin, 6-sübstitüe- 3(2H)piridazinon ve etil 6-sübstitüe-3(2H)-pridazinon- 2-İL asetat türevlerinin anti-tüberküloz aktivitelerinin araştırılması

Abstract

Mycobacterium tuberculosis kompleks (MTC) tüm dünyadaki enfeksiyonkaynaklı ölümlerin en sık nedenlerinden biridir. Tedavide kullanılan antitüberkülozilaçlar; Tüberküloz tedavisinde kullanılan ilaçlar başlıca iki grupta incelenebilir. Primerilaçlar; izoniazid (İNH), rifampisin (RİF), pirazinamid (PZA), etambutol (ETM),streptomisin (SM) ve tiasetazon (T)'dur. Rifabutin, rifapentin, sikloserin, etiyonamid,amikasin, kanamisin, kapreomisin, paraaminosalisilik asit, levofloksasin vemoksifloksasin gibi daha toksik ve zor tolere edilebilen ilaçlar ise sekonder ilaçlargrubunda yer alır. Hidrazit türevleri de yeni seçenek ilaçlar olarak araştırılmaktadır.3-kloro-6sübstitüepiridazin, 6-sübstitüe-3(2h)piridazinon ve etil 6-sübstitüe-3(2h)-pridazinon-2-il asetat türevleri çalışma için hazırlandılar. Mersin Üniversitesi TıpFakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı Mikobakteriyoloji Laboratuvarıstoklarında bulunan birinci seçenek antitüberküloz ilaçların en az ikisine rezistanolduğutespit edilen 5 suş ile birinci seçenek antitüberküloz ilaçlara sensitif olduğu bilinen 5 suşve bir standart M. tuberculosis suşu (H37Rv) olmak üzere toplam 11 M. tuberculosissuşu bu çalışmaya dahil edilmiştir.Klinik örneklerden izole edilen suşların en az iki en çok üç antitüberkülozarezistanolduğu, suşların yarısının izoniazid'e rezistanolduğu ve tüm suşların daetambutole sensitif olduğu gözlendi. BACTEC MGIT 960 sistemi ile elde edilenantitüberküloz ilaçlara karşı sensitiflık için kullanıldı.Çalışmaya dahil edilen hastaların BACTEC MGIT 960 sistemi ile birinci seçenekantitüberküloz ilaçlara karşı sensitiflık paterni incelendi.H37Rv ve çalışmaya dahil edilen hastaların agar proporsiyon yöntemi ve alamarmavisi yöntemi ile 3-kloro-6sübstitüepiridazin, 6-sübstitüe-3(2h)piridazinon ve etil 6sübstitüe-3(2h)-pridazinon-2-il asetat türevlerine karşı sensitiflık paternlerideğerlendirilmiştir. Agar proporsiyon yöntemi ile 3-kloro-6-sübstitüepiridazin I'e karşı10-4 dilüsyonunda 40 μg/ml konsantrasyonunda sensitiflık göstermiştir. Çalışmayaalınan suşlardan yeni sentezlenen 6-Sübstitüe-3(2H)piridazinon II'ne karşı 10-4dilüsyonunda 40 μg/ml konsantrasyonunda sadece bir hastanın sensitiflık gösterdiğigörülmektedir. Çalışmada elde edilen olgulara göre; birincil seçenek ilaçlara karşıdaxsensitif olan iki hasta suşunun, agar proporsiyon yöntemi ile yeni sentezlenen Etil 6-sübstitüe-3(2H)-pridazinon-2-il asetat III'ne karşı 10-2 ve 10-4 dilüsyonlarınnın 40 μg/mlkonsantrasyonlarında ilaca karşı sensitiflık gösterdiği görülmektedir.Çalışmada elde edilen olgulara göre; Agar proporsiyon yöntemi ile birincilseçenek ilaçlara karşı da sensitif olan üç hasta suşunun, yeni sentezlenen 6-sübstitüe-3(2H)-pridazinon-2-il asetohidrazit IV'e karşı 10-2 ve 10-4 dilüsyonlarınnın 40 μg/mlkonsantrasyonlarında ilaca karşı sensitiflık gösterdiği görülmektedir. Bununla birlikteçalışma sonuçları incelenmeye devam edildiğinde 6-sübstitüe-3(2H)-pridazinon-2-ilasetohidrazit IV'e karşı 10-4 dilüsyonunda 40 μg/ml konsantrasyonunda üç hastasuşunun daha yeni sentezlenen ilaca karşı sensitiflık gösterdiği görülmektedir. Yenisentezlenen 6-sübstitüe-3(2H)-pridazinon-2-il asetohidrazit IV'e karşı sensitiflıkgösteren hastaların birinci seçenek ilaçlardan RİF ve EMB' e karşı da sensitiflıkgösterdiği bilinmektedir.Alamar mavisi yöntemiyle 10-2 dilüsyonunda 50 μg/ml konsantrasyonunda yenisentezlenen hidrazit türevlerine karşı seçilen suşların direnç ve sensitiflık patentleriincelenmiştir. Alamar mavisi yöntemiyle yaptığımız çalışma sonucunda 3-kloro-6-sübstitüepiridazin I'e ve 6-Sübstitüe-3(2H)piridazinon II'e karşı 10-2 dilüsyonundaçalışmaya dahil edilen 11 M. tuberculosis suşu da direnç göstermiştir.Çalışmada elde edilen olgulara göre; birincil seçenek ilaçlara karşıda sensitif olaniki hasta suşunun, yeni sentezlenen Etil 6-sübstitüe-3(2H)-pridazinon-2-il asetat III'ekarşı 10-2 dilüsyonunda 50 μg/ml konsantrasyonlarında ilaca karşı sensitiflık gösterdiğigörülmektedir.Alamar mavisi yöntemi( 10-2 dilüsyonunda 50 μg/ml konsantrasyonu) ile agarproporsiyon yönteminin(10-2 dilüsyonunda 40 μg/ml konsantrasyonu) karşılartırılmasıyapılmıştır.Agar proporsiyon yöntemini ve alamar mavisi yöntemi arasında suşlar üzerindeilaç sensitiflik MİK hesaplanırken uyumlu bir sonuç elde edilebileceği sonucunavarılabilir. Buradan da her iki yöntem arasında MİK belirlemede uyum olduğugörülmektedir.

Mycobacterium tuberculosis compleks (MTC) is one of the most mortalityreason that arise from infectious diseases and drugs used for treatment of tuberculosiscan be determined in two groups. Drugs used for the treatment of tuberculosis can bedetermined in two groups. Primary drugs are; isoniazid (INH), rifampicin (RMP),pyrazinamide (PZA), ethambutol (ETM), streptomycin (SM) ve thiacetazone, (T)'dur.Rifabutin, rifapentine, cycloserine, ethiyonamide, amikacin, kanamycin, capreomycin,paraaminosalicylic acid, levofloxacin ve moxifloxacin which are more toxic and hardlytolarable are placed in the secondary drugs group. Hydrazide derivates are beinginvestigated as new choice drugs.3-chloro-6substitue-pyridazine, 6-substitue-3(2h)pyridazinone ve etil 6-substitue-3(2h)-pyridazinone-2-yl acetate derivates are prepared for our study. 5 strainsthat have been determined to be resistant at least two of first choice antituberculosisdrugs present at the Laborautary of Mycobacteriolgy Of Depatment Of MedicalMicrobiology Of Medical Faculty, Mersin University reserves and 5 strains which areknown to be sensitive for antituberculosis drugs and one standard M.tuberculosis strainM.tuberculosis (H37Rv), in total 11 M.tuberculosis strains are included in the study.The strains which have been obtained from clinical samples are resistant atleast two maximum 3 antituberculosis drugs and half of the strains were resistant toIsoniazide, all were sensitive to ethambutol. BACTEC has been used as a sensitivityindex against antituberculosis drugs that had been obtained through MGIT 960 System.The patients included in the study were examined against the first choiceantituberculosis drug susceptibility patterns with MGIT 960 system.The sensitivity patterns of M. tuberculosis H37Rv and the patients includedin the study against 3-chloro-6substitue-pyridazine, 6-substitue-3(2h)pyridazinone veetil 6-substitue-3(2h)-pyridazinone-2-yl acetate derivates has been evaluated via AgarProportion method and the Alamar Blue method.Sensitivity is observed against 3-chloro-6substitue-pyridazine at 40 μg/ml concentrationwith 10-4 dilution. The strains obtained from the study; only one of the patient hadsensitivity against 6-substitue-3(2h)pyridazinone at 40 μg/ml with 10-4 dilution.According to the obtained cases from the study strains of two patient issensitive to first choice of drugs, at 10-2 and 10-4 dilution level, 40 μg/ml concentrationsample which is newly synthisized against etil 6-substitue-3(2h)-pyridazinone-2-ylacetate III via agar proprotion method have been seen to be sensitive to the drugs.According to obtained cases from the study; 3 patients strains which aresensitive to first choice drugs via agar proportion method have been observed to besensitive to newly synthsized etil 6-substitue-3(2h)-pyridazinone-2-yl acetohidrazid IVat 40 μg/ml with 10-2 and 10-4 concentration. However, when results of the studycontinued to be examine 3 patients strains are sensitive to the newly synthsized 6-substituted-3 (2H) -pyridazinone-2-yl asetohidrazid IV at 40 μg/ml with 10-4 dilution.It's known that the patients who have sensitivity against newly synthisized 6-substitute-3 (2H) -pyridazinone-2-yl asetohidrazid IV are also sensitive to RIF and EMB.Resistance and sensitivity patterns of the strains selected against hyrazidederivates that have been newly synthsized at 50 μg/ml concentration with 10-2 dilutionvia Alamar Blue method were examined. After the study via Alamar Blue methodagainst 3-chloro-6substitue-pyridazine, 6-substitue-3(2h)pyridazinone II, all the 11 M.tuberculosis strains included in the study also showed resistance. According to the casesobtained from the study; two patient's strains which are sensitive to first choice drugsare also sensitive to newly synthisized etil 6-substitue-3(2h)-pyridazinone-2-yl acetateat 50 μg/ml concentraition with 10-2 dilution.Comparision of Alamar Blue method ( at 50 μg/ml concentration with 10-2dilution ) and agar proprotion methods (at 40 μg/ml concentraition with 10-2 dilution)have been performed.A compliance outcome can be obtained while drug MIC sensitivity beingcalculated among the strains through agar proprotionmethod and Alamar Blue method .In conclusion MIC determination seems to be complient among two methods.Here it is seen that there isan accordance between the two methods fordetermining MIC.