Turgut Özal Tıp Merkezinde 2009 yılında nozokomiyal pseudomonas aeruginosa izolatlarında antibiyotik direnç, indüklenebilir beta-laktamaz ve metallo beta-laktamaz oranlarının belirlenmesi

Abstract

Amaç: Hastane infeksiyonu etkenlerinden olan Pseudomonas aeruginosa birçok antibiyotiğe doğal olarak dirençli olup, mevcut kullanılabilen antibiyotiklere direnci de hastanelere göre değişebilmektedir. P. aeruginosa'nın antibiyotiklere direncinde çeşitli beta-laktamaz enzimleri ve farklı mekanizmalar rol oynamaktadır.Bu çalışmada nozokomiyal infeksiyon etkeni olarak izole edilen P. aeruginosa suşlarında çeşitli antibiyotiklere direnç oranlarının, İBL ve MBL üretiminin araştırılması ve MBL üretimini belirlemek için üç farklı fenotipik yöntemin karşılaştırılması amaçlanmıştır.Gereç ve Yöntem: P. aeruginosa izolatları konvansiyonel yöntemler ile tanımlanmış, antibiyotik duyarlılık testleri CLSI standartlarına göre Kirby-Bauer disk difüzyon yöntemi kullanılarak yapılmıştır. Karbapenem direncini doğrulamak için imipenem ve meropenem E test(AB BIODISK, Solna, Sweden) kullanılmıştır. İBL üretimini belirlemek için disk indüksiyon yöntemi kullanılmıştır. MBL üretimini belirlemek için modifiye Hodge testi, imipenem/EDTA Kombine disk testi, MBL E test kulanılarak sonuçları karşılaştırılmıştır.Bulgular: 110 P. aeruginosa suşunun % 86'sı idrar, trakeal aspirat, kan ve yara örneklerinden izole edilmiştir. Reanimasyon Yoğun Bakım, Dahiliye Yoğun Bakım, Genel Cerrahi ve Nöroloji servisleri etkenin en sık izole edildiği ünitelerdir. İzolatların en duyarlı oldukları antibiyotikler sırasıyla; kolistin, seftazidim, sefepim, amikasin, piperasilinler ve siprofloksasindir. Duyarlılık oranı % 100 olan kolistin ile seftazidim ve sefepim arasında anlamlı etkinlik farkı bulunmamıştır(p>0,10). Seftazidim ve sefepim ile karbapenemler arasındaki etkinlik farkı ileri derecede anlamlıdır(p:<0,0001-0,002). Aminoglikozidler arasında duyarlılık oranı en yüksek olan amikasindir. Netilmisin, imipenem, aztreonam ve meropenem sırasıyla izolatların en dirençli oldukları antimikrobiyallerdir. Disk indüksiyon yöntemi ile izolatların % 90'ında İBL pozitif bulunmuştur. Kombine disk testi ve MBL E testin her ikisi ile pozitif sonuç veren iki izolat MBL üreten izolatlar olarak kabul edilmiştir. Tüm izolatlar içinde MBL pozitif olanların oranı % 1,8'dir.Sonuç: Hastanemizde P. aeruginosa infeksiyonlarının ampirik tedavisinde en çok tercih edilen ilaç grubu olmaları nedeniyle, karbapenemlere(özelliklede imipeneme) direnç oranı diğer beta laktam antibiyotiklere göre yüksektir. P. aeruginosa izolatlarının % 90'ı İBL üretmekte olduğundan, duyarlılık oranı çok yüksek olan seftazidim, sefepim veya piperasilin/tazobaktamın ampirik tedavide bir diğer antipseudomonal ilaç grubu ile kombine kullanımı, tek başına karbapenem kullanımına göre çok daha etkili bir tedavi yaklaşımı olabilir.MBL enzimi tarama testleri olarak IMP/EDTA Kombine disk testi ile MBL E test çalışmamızda birbirleriyle % 86 uyumlu bulunmuş olup, modifiye Hodge testi tutarsız sonuçlar vermiştir. MBL E test kadar güvenli, basit ve hızlı ayrıca; E teste göre maliyeti çok daha düşük olan IMP/EDTA Kombine disk testi, rutin laboratuvar çalışmalarında P. aeruginosa izolatlarında MBL taraması için uygun olabilir. Bu test sayesinde MBL pozitif izolatların hızla saptanması ve infeksiyon kontrol önlemlerinin etkin olarak uygulanması mümkün olabilir.Anahtar Kelimeler: Pseudomonas aeruginosa, antibiyotik duyarlılığı, indüklenebilir beta-laktamaz, metallo beta-laktamaz.

Objectives: Pseudomonas aeruginosa that cause nosocomial infections is naturally resistant to many antibiotics. Amongst hospitals, bacterial resistance to currently used antibiotics may alter. Beta-lactamase enzymes and various resistance mechanisms cause to antibiotic resistance.This study aims to investigate antibiotic resistance and inducible beta-lactamase and metallo beta-lactamase rates of P. aeruginosa strains that isolated from nosocomial infections. Another aim of this study was to compare the three different phenotypic methods for screening of MBL production.Materials and Methods: P. aeruginosa isolates were identified by conventional methods. According to the standards of Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI), antibiotics susceptibility tests were performed by Kirby-Bauer disk diffusion method. Imipenem and meropenem E test (AB Biodisk, Sweden) were used for verification of carbapenem resistance. Disk induction method was used for determination of IBL production. Modified Hodge test and imipenem/EDTA Combined disk test and MBL E test were used for detection of MBL production and the results of these tests were compared.Findings: Eighty-six percent of 110 P. aeruginosa strains have been isolated from urine, tracheal aspirates, blood and wound specimens. P. aeruginosa were most frequently isolated from patients in Anesthesia and Reanimation Intensive Care Unit, Internal Medicine Intensive Care Unit, Clinic of General Surgery and Neurology service. P. aeruginosa isolates were most susceptible to antibiotics respectively, colistin, ceftazidime, cefepime, amikacin, piperacillin and ciprofloxacin. One hundred percent of isolates were susceptible to colistin whereas, there was no statistical difference for activity between colistin and ceftazidime, cefepime antibiotics (p>0.10). Ceftazidime and cefepime were found significantly more active than carbapenems(p:<0,0001-0,002). Among aminoglycosides, amikacin has the highest susceptibility rate. Netilmicin, imipenem, aztreonam, and meropenem, respectively they have the most resistance rates for P. aeruginosa isolates. IBL disk induction method was positive in 90% of the isolates. Two isolates that gave positive results with both of the Combined disk test and the MBL E test were considered as MBL producing isolates. Among all of the isolates, MBL positivity rate was found as 1,8%.Results: The resistance rates to carbapenems(especially to imipenem) were higher than the other beta lactam antibiotics, because of, they are preferred antibiotics for the empiric therapy of P. aeruginosa infections in our hospital. Because of, the susceptibility rates to ceftazidime, cefepime or piperacillin/tazobaktam were very high, combined use of these antibiotics with other antipseudomonal drugs may be a much more effective approach for empiric treatment of P. aeruginosa infections, compared to stand-alone carbapenem usage. As a screening test for MBL enzymes IMP/EDTA Combined disk test and MBL E test in our study were consistent with each other 86%, and the modified Hodge test yielded inconsistent results. IMP/EDTA Combined disk test is safe, simple and fast as much as MBL E test; it also has a much lower cost compared to MBL E test. IMP/EDTA Combined disk test may be suitable for screening of MBL producting isolates in routine laboratory studies. Rapid detection of MBL positive isolates and effective implementation of infection control measures are possible owing to IMP/EDTA Combined disk test.Key words: Pseudomonas aeruginosa, antibiotic susceptibility, inducible beta-lactamase, metallo beta-lactamase.