Testiküler konneksin 43 ifadesi üzerine seftriaksonun etkileri

Abstract

Amaç: Konneksin 43 oluklu bağlantı kanallarını oluşturan protein ailesinin bir üyesidir. Son çalışmalar; oluklu bağlantıların erkek üreme fonksiyonlarının özellikle spermatogenezisin düzenlenmesinde çok önemli rolleri olduğunu göstermektedir. Bu çalışmada, seftriaksonun konneksin 43 ifadesi, sperm parametreleri ve oksidatif stres üzerindeki etkilerinin; immunokimyasal ve biyokimyasal yöntemler ile değerlendirilmesi amaçlandı.Materyal ve metot: Wistar Albino cinsi erkek sıçanlar; seftriakson (n=15) ve serum fizyolojik (n=15) olmak üzere 2 gruba ayrıldı. 10 günlük deney sonunda sakrifiye edilen sıçanların testis ve epididimisleri alındı. Parafin bloklardan elde edilen seri kesitlere hemotoksilen- eozin, TUNEL ve anti-konneksin 43 immun boyama metodları uygulandı. Ayrıca sperm örnekleri yoğunluk, motilite ve morfoloji yönünden değerlendirildi. Bulgular: Sonuçlar seftriaksonun testis ağırlıklarında, seminifer tübül çapında, germinal epitel yüksekliğinde ve plazma testesteron seviyesinde azalmaya (p<0.05), seminifer tübüllerde de hasara neden olduğunu gösterdi. TUNEL pozitif boyanan apoptotik hücrelerin, ölü ve amorf başlı sperm sayısının; seftriakson grubunda, kontrol grubuna göre istatiksel olarak anlamlı derecede arttığı saptandı (p<0.05). Ayrıca seftriaksonun, testiküler dokuda konneksin 43 boyanma yoğunluğunda azalmaya neden olduğu gözlendi. Biyokimyasal analizlerde; seftriakson grubunda kontrol grubuna göre; malondialdehit (MDA) seviyesi, total oksidan durum (TOS) ve oksidatif stres endeksi (OSİ) değerlerinin istatiksel olarak anlamlı derecede arttığı; KAT aktivitesinin ise azaldığı izlendi. Diğer antioksidan enzimler (SOD, GPx) ve total antioksidan durum (TAS) değerleri açısından gruplar arasında istatiksel olarak anlamlı bir fark bulunmadı (p>0.05).Sonuç: Çalışmamız; seftriaksonun seminifer tübül epitel hasarı, oksidatif stres, testesteron seviyesinde ve semen kalitesinde azalma gibi fertilite üzerindeki olumsuz etkilerini ortaya koymaktadır. Ayrıca seminifer tübül epitelinde hücrelerarası iletişimi sağlayan konneksin 43 protein ifadesinde azalmaya ve apoptozise yol açtığını göstermektedir. Anahtar kelimeler: Sıçan, Testis hasarı, Seftriakson, Sperm analizi, İmmünohistokimya

Aim: Connexin 43 belongs to a family of proteins that form gap junction channels. Gap junctions are essential in the control of male reproductive functions, especially spermatogenesis. In this study, we aimed to investigate the effect of ceftriaxone, on connexin 43 expression, sperm parameters and oxidative stress by using immunochemical and biochemical methods.Material and method: Wistar albino male rats were divided into ceftriaxone (n=15) and saline group (n=15). After 10 days, rats were sacrificed. Epididymis and testis were removed. Obtained serial section from paraffin blocks were stained with hematoxylin eosin, TUNEL and connexin 43 immunostaining method. Furthermore, sperm samples were evaluated in terms of concentration, motility and morphological aspects. Results: Results show that there were a significant statistical decrease in testis weight, seminiferous tubule diameter, the height of the germinal epithelium and plasma testosterone levels in ceftriaxone group compared to the control group (p<0.05). Also seminiferous tubules were damaged in ceftriaxone group. It was found that TUNEL positive staining apoptotic cells, and the number of dead and amorphous head sperm were statistically significantly increased in the ceftriaxone group (p<0.05). Also it was observed that connexin 43 expression in tissue decreased in ceftriaxone group. Biochemical analysis showed that; MDA level, TOS and OSI values were statistically significantly increased but CAT activity was statistically significantly decreased in ceftriaxone group. There was no statistically significant difference in terms of other antioxidant enzymes (SOD, GPx) and TAS values between groups (p> 0.05).Conclusion: Our study demonstrates ceftriaxone's negative impact on fertility like seminiferous tubule epithelial damage, oxidative stress, decrease in testosterone levels and semen quality. Moreover, it showed that ceftriaxone causes decreased connexin 43 protein expression which is responsible for intracellular communication in seminiferous tubule epithelium, and apoptosis. Keywords: Rat, Testicular damage, Ceftriaxone, Sperm Analysis, Immunohistochemistry.