Alloimmünizasyonla oluşan anti-HLA antikorlarının mikrolenfositotoksisite yöntemi ile belirlenmesi

Abstract

Bu çalışmada anti-HLA antikoru oluşum sebeplerinden kan transfüzyonu, gebelik vetransplantasyon öyküsüne sahip olan KBY hastalarından alınan serum örneklerinin fizyolojikşartlara yakın ortamda antikor antijen etkileşimi gözlemlenebilen mikrolenfositotoksisiteyöntemi ile panel reaktif antikor taraması yapıldı. Bunun için laboratuvarımıza rutin anti-HLAantikoru taraması için başvuran KBY hastalarının arasından Luminex PRA taramasonuçlarındaki HLA sınıf I ve HLA sınıf II pozitifliğine göre hastalar seçildi. Ardından 21seruma sınıf I tanımlama, 8 seruma sınıf II tanımlama, 13 seruma hem sınıf I hem sınıf IILuminex PRA tanımlama testi yapılmıştır. Elde edilen sonuçlara göre 5 farklı temada terasakiplakları düzeninde serumlar laboratuvarımıza başvuran doku tipi bilinen verici adaylarındanelde edilen lenfositler serumların üzerine eklenerek mikrolenfositotoksisite yöntemi iletestlendi. Sentetik boncukların üzerine HLA fragmentlerinin yerleştirilmesi ile antikortanımlaması yapılan Luminex PRA yönteminin fizyolojik şartlarda gerçek hücre üzerindekiHLA antijenleri ile antikor birleşmesi sağlayan mikrolenfositotoksisite yöntemi ile her zamanaynı antikorları saptamadığı görüldü.

In this study, panel reactive antibodies were screened in Chronic Kidney Disease (CKD) patientsera samples who had blood transfusion, pregnancy, and previous transplantation history bymicrolymphocytotoxicity method which was performed under conditions similar tophysiological conditions. For this purpose, the samples were selected from the patients, whoapplied to our laboratory for routine anti-HLA antibody screening test, according to theirLuminex PRA class I and II positive results. 21 sera samples were identified for class I PRA, 8samples were identified for class II PRA, and 13 samples were identified for both class I andclass II PRA by Luminex PRA identification method. These sera were then added on the wellsof Terasaki plates which were designed in 5 different theme according to the identificationresults. The lymphocytes obtained from donors, whose HLA tissue types were known, weretested by adding on the sera samples on Terasaki plate for microlymphocytotoxicity method. Inconclusion, it was determined that the results obtained from antibody identification by HLAfragments attached to synthetic beads for Luminex PRA identification method were not alwaysthe same as the results obtained from identification under physiological conditions.