Aronia melanocarpa uygulamasının epiteliyal ovaryum kanseri hücre hattı skov-3 üzerine immünositokimyasal ve apoptotik etkilerinin incelenmesi

Abstract

Ovaryum kanseri, ölümcül jinekolojik kanser türleri arasında ilk sırada yeralmaktadır. Mevcut kemoterapötik yöntemler hastaların çoğunda yetersizkaldığından yeni tedavi seçenekleri üzerine çalışmalar yapılmaktadır. Paklitakselovaryum kanseri de dâhil olmak üzere birçok kanser türleri için kematerapik bir ilaçolarak kullanılmaktadır. Paklitaksel'in kanser hücrelerini apoptozise yönlendirerekkanseri yok etmede kullanıldığı bilinmektedir. Çoğu kanser türleri gibi ovaryumkanseri de, başlangıçta bu kemoterapik ilaca yanıt verirken, uzun vadede, ilaç direncigelişir ve tedavide başarısız olunur. İlaç direncini baskılayabilmek içinkemoterapotik ilaçları ile birlikte antioksidanlar da tedavi için önerilmiştir. AroniaMelanocarpa, antosiyanin içeriği yüksek olan bir bitki olup, çeşitli çalışmalarla antitümöretkileri olduğu gösterilmiştir. Bu çalışmada, Aronia Melanocarpa'nınepiteliyal ovaryum kanseri olan SKOV-3 hücre hattına etkilerinin in vitroyöntemlerle incelenmesi amaçlanmıştır. Aronia Melanocarpa konsantrasyonları 400μg/ml, 300 μg/ml, 200 μg/ml, 150 μg/ml, 100 μg/ml, 75 μg/ml, 50 μg/ml, 25 μg/ml,10 μg/ml, 5 μg/ml, 1 μg/ml şeklinde ve 24 saat, 48 saat ve 72 saat aralıklauygulanmıştır. Aronia Melanocarpa'nın SKOV-3 ovaryum kanseri hücrelerinesitotoksik etkilerini saptamak amacıyla MTT testi ile etkin olan 5 doz seçilerekapoptozis üzerine etkileri TUNEL yöntemiyle araştırılmıştır. Bu etken maddenintümör hücrelerindeki PI3K, mTOR, p 38 MAPK sinyal yolağı üzerinden olan etkisiimmünositokimyasal (ICC) yöntemle belirlenmiştir. Aronia Melanocarpa'nın MTT,ICC ve TUNEL testi ile 5 doz içerisinde en etkin olanı belirlenerek, paklitaksel ilekombinasyon şeklinde uygulama yapıldıktan sonra TUNEL ve immünositokimyasaltestler uygulanmıştır. Bu çalışmada güçlü antioksidan ve antosiyanin içeriği olanAronia Melanocarpa ile paklitakselin kombinasyonunun etkisinin araştırılmasıamaçlanmıştır. Sonuçlar ANOVA istatistik testleri ve Graphpad yazılım programı iledeğerlendirilmiştir.

Ovarian cancer is at the top of the list of deadly gynecological cancers. Sincechemotherapeutic methods are insufficient in the most of patients, new treatmentoptions are being studied. Paclitaxel is used as a chemotherapeutic drug for manytypes of cancer, including ovarian cancer. Paclitaxel is known to be used to destroycancer by directing cancer cells to apoptosis. As with most cancer types, ovariancancer responds to this chemotherapeutic drug initially, while in the long term, drugresistance develops and treatment fails. In order to suppress the drug resistance,antioxidants and chemotherapeutic drugs have been proposed for treatment. AroniaMelanocarpa is a plant with high anthocyanin content and has been shown to haveanti-tumor effects in various studies. The aim of this study is to investigate theeffects of Aronia Melanocarpa on epithelial ovarian cancer SKOV-3 cell line by invitro methods. Aronia Melanocarpa concentrations is selected as 400 μg / ml, 300μg / ml, 200 μg / ml, 150 μg / ml, 100 μg / ml, 75 μg / ml, 50 μg / ml, 25 μg / ml, /ml, 1 μg / ml and supplied by 24 hours, 48 hours and 72 hours. In order to determinethe cytotoxic effects of Aronia Melanocarpa on SKOV-3 ovarian cancer cells, 5effective doses are selected by MTT test and effects on apoptosis are investigated byTUNEL method. The effect of this active substance on PI3K, mTOR, p38 MAPKsignalling pathways in tumor cells is determined via immunocytochemical (ICC)methods. With the results of MTT, ICC and TUNEL tests of Aronia Melanocarpa,the most effective dose in 5 doses is determined and TUNEL andimmunocytochemical tests are applied after combination with paclitaxel. In thisstudy, it is aimed to investigate the effect of the combination of Aronia Melanocarpaand paclitaxel, which are strong antioxidants and anthocyanins. The results areinterpreted with ANOVA statistical tests and Graphpad software program.