Tavşanlarda akut parasetamol uygulamasının karaciğerdeki CuZn-SOD, GSH Px ve katalaz enzimlerinin mRNA seviyelerine etkisi

Abstract

Parasetamol agrı kesici ates düsürücü olarak kullanılan bir ilaçtır. Karaciger veböbrekte metebolizma edilir. Diger birçok ilaçta oldugu gibi Parasetamol de metabolizeolurken vücutta serbest radikal olusumunu arttırmaktadır. Vücut bu radikalleri ortadankaldırmak için antioksidan savunma sistemleri gelistirmistir. Süper Oksit Dismutaz(SOD), Katalaz (CAT) ve Glutatyon Peroksidaz (GSH-Px) bu sistemlerin en önemlienzimlerindendir.Bu tezde Parasetamolün tavsan karacigerindeki etkileri moleküler düzeydearastırıldı. Parasetamol grubundaki tavsanlara 500mg/kg vücut agırlıgı oranındaintraperitonal yolla Parasetamol verildi ve uygulamadan 4 saat sonra kesim islemiyapıldı. Karaciger dokusundan alınan parçalardan toplam RNA saflastırıldı ve PoliTprimeri kullanılarak ters transkripsiyon reaksiyonu ile cDNA elde edildi. PolimerazZincir Reaksiyonları ile CuZnSOD, GSH-Px, CAT ve kontrol amaçlı GAPDH içinspesifik primerler kullanılarak istenilen büyüklükte DNA ürünleri elde edildi. Agarozjelinde kosturulan enzim RT-PZR bantlarının GAPDH RT-PZR bandına oranlarıkarsılastırılarak semikantitatif mRNA analizleri yapıldı. Bu analiz sonucundaparasetamol uygulamasının CuZnSOD, GSH-Px, CAT mRNA seviyelerinde herhangi birdegisiklige neden olmadıgı görüldü.Anahtar kelimeler ; RT-PZR, mRNA, serbest radikaller, CuZnSOD, GSH-Px, CAT veGAPDH.

Paracetamol is a drug that is used for its analgesic and antipyretic properties. It ismetabolized in liver and kidneys. As other drugs, Paracetamol increases the amount offree radicals in the body during metabolism. The body developed several antioxidantdefense systems to combat these radicals. Superoxide Dismutase (SOD), Catalase (CAT)and Glutathione Peroxidase are the most importants of these enzymes.In this thesis, the effects of Paracetamol on rabbir liver was studied. Paracetamolwas injected intraperitoneally as 500 mg/kg body weight to paracetamol group animalsand they were killed 4 hrs later. Total RNA were isolated from liver samples and cDNAwas made with PolyT primer in revers transcription reaction. Desired lengths of DNAfrom Polimerase Chain Reactions were obtained by using specific primers for CuZnSOD,GSH-Px, CAT and GAPDH control. Enzyme RT-PCR bands from agarose jells wereanalyzed semiquantitatively by comparing them with GAPDH RT-PCR bands. As aresult, it was observed that mRNA levels of CuZnSOD, GSH-Px, CAT was notinfluenced from Paracetamol application.Keywords: RT-PCR, mRNA, free radicals, CuZnSOD, GSH-Px, CAT and GAPDH.