Cyperus rotundus ekstresinin iskemi/reperfüzyon oluşturulmuş sıçanlarda gastral mukozal hasara karşı etkisi

Abstract

Bu çalisma için denekler (Wistar-albino) Ankara Hifzisihha Serum Çiftligi' nden teminedildi. 30 adet denek her grupta n=6 olacak sekilde 5 esit gruba ayrildi. Deneyden 18 saatönce aç birakilan siçanlara su serbest birakildi. Bütün siçanlara Ketamin (35 mg/kg) veXylazine (5 mg/kg) anestezi (i.m.) uygulandi. Grup 1; sham kontrol grubu, Grup 2; kontroliskemi- hasta grup, Grup 3; C. rotundus + Iskemi grubu olup (200 mg/kg) bitki ekstresi (GumArabica'da %10'luk süspansiyon içerisinde) orogastrik yolla verildi. Grup 4; C. rotundus +Iskemi/Reperfüzyon grubu ve Grup 5; Vitamin E + Iskemi grubu olarak adlandirildi.Olusturulan gruplarin içinde sham kontrol grubu hariç diger gruplarda iskemi gerçeklestirildi.Sham kontrol grubuna herhangi bir islem yapilmamis olup, sadece normal degerlerinsaptanmasi amaçlandi. 2. grup olan kontrol iskemi grubu hasta grup olup yalnizca iskemigerçeklestirildi. 3. ve 4. gruplara deneye baslamadan 10 dakika önce orogastrik olarak oralyolla (200 mg/kg) bitki ekstresi verildi. 5. gruba ise Iskemi uygulamasindan 10 dakika önceoral yolla (100 mg/kg) Vitamin E verildi. Yalnizca 4. grupta siçanlar iskemiden sonra 60dakika boyunca kiskacin kaldirilmasi ile reperfüze edilerek I/R uygulamasi gerçeklestirildi.Deney sonunda öldürülen bütün siçanlarin izole edilen midelerinin yarisi biyokimyasalanalizler (MDA ve GSH) için, diger yarisi da histopatolojik inceleme için kullanildi.Biyokimyasal analiz sonucunda GSH ölçümü yapilan kontrol iskemi grubunun (Grup 2)GSH degeri (125 nmol GSH/100 mg mide yas agirligi), sham kontrol grubunun (Grup 1)GSH degerinden (118 nmol GSH/100 mg mide yas agirligi) düsük oldugu görülmüstür (Sekil4.1.). Vitamin E grubunda GSH degeri (114 nmol GSH/100 mg mide yas agirligi) ile kontrolIskemi gurubu (125 nmol GSH/100 mg mide yas agirligi) karislastiginda anlamli farklilik P<0.05 görülmüstür.Biyokimyasal analiz sonucunda MDA ölçümü yapilan Sham kontrol (Grup 1) ileVitamin E + Iskemi (Grup 5) gruplari arasinda anlamli fark görülmüstür (p<0.05). KontrolIskemi (Grup 2) ile C. rotundus + I/R (Grup 4) gruplari arasinda anlamli fark görülmüstür (p<0.05). Diger gruplar arasinda yapilan karsilastirmalarda anlamli fark gözlenmemistir(Sekil4.2.).Nicel olarak histopatolojik degerlendirme skorlama metodu kullanilarak yapildi. Midedokularinin histopatolojik incelenmesi, dorsal ve ventral yüzeylerin boyuna kesilerekglandular bölgeden çikarilmasiyla yapildi. Midelerin yarisinda preparat hazirlamak içinparafin yöntemi kullanildi. Degerlendirilme, zarar gören ve apse olusan bölgelerde skorlamametodu kullanilarak Cyperus rotundus ve Vitamin E kriterleri tespitiyle yapildi.Sonuç olarak midede Iskemi ve Iskemi/Reperfüzyon modelleri uygulanmasina bagliolarak mukozal bütünlügün bozuldugu görülmüstür. Mide dokusunda iskemi, hücreleri hasaraugratip, hücre ölümüne yol açabilir. Bu nedenle iskemi durumunda dokulardaoksijenizasyonun tekrar saglanmasi hasarli bölgede reaktif oksijen türlerinin artmasina vegeçici olarak hasarin agirlasmasina sebep olmaktadir. Serbest radikallerin birikimi ile lipitperoksidasyon ürünü olan MDA konsantrasyonu artmakta oldugu ve buna bagli olarak birantioksidan olan GSH konsantrasyonunun azaldigi görülmüstür. Kullanilan antioksidanlarinise peroksidasyon ürünü olan MDA olusumunu engelledigi ve antioksidan olan GSHmiktarini korudugu tespit edilmistir.

In this study albino Wistar rats (weight 200±20 gr) were used. The animals obtainedfrom (Ankara Hifzisihha Serum Çiftligi) Ankara. 30 rats were divided into equal 5 groupseach containing 6 animals. All animal were fasted for 18 hours before the experiment, waterfree add libitum. All rats were anesthetizing (i.m.) using Ketamin (35mg/kg) and Xylazine(5mg/kg). Group 1 was Sham group (control not treated with vehicle), group 2 was Ischemiagroup for 60 minutes and served as control group. Group 3 (Ischemia group) was treated with200 mg/kg body weight C. rotundus before 10 minutes of Ischemia (suspended into %10Gum Arabica). Group 4 Ischemia /Reperfusion treated with 200 mg/kg body weight C.rotundus before 10 minutes of Ischemia for 60 minutes followed reperfusion for 60 minutes.Group 5 was treated with Vitamin E 100 mg/kg body weight before 10 minutes of Ischemiafor 60 minutes.At the end of the experiment all rats were killed by dislocation, the stomach removedand divided into 2 parts, one part for biochemical analysis (for MDA and GSH), other forhistopathological examination.The biochemical analysis of GSH sho wed when we compared GSH value of VitaminE (114 nmol GSH/100 mg wet weight) and control group (125 nmol GSH/100 mg wetweight) there are significant P<0.05 had been see p>0.05 between all group in experiment(Fig. 4.1.)The biochemical analysis of MDA shows, group 2 MDA value is (3.58 nmolMDA/100 mg) of stomach wet weight. In this group when compared with group 3 and group4 shows no significant p>0.05 value but significant p<0.05 when compared with group 4 (Fig.4.2.).Quantitative histopathological assessment was performed using techniques of thescore method. Briefly the stomach was divided along a line running across the upper part ofthe glandular mucosa and the cut edge derived from the ventral surface of the stomach wasembedded in paraffin using standard technique. The criteria of damage were absence of cellsor gross disruption of cells in groups treated with Cyperus rotundus and Vitamin E.As a result the stomach Ischemia and Ischemia/Reperfusion models the mucosaldisrupter was shown in the experimental groups. This is the cause of increase of peroxidationssubstrates MDA and decreased the level of GSH which is an antioxidant. Both Ischemia andReperfusion appear to contribute to the extent of farther expression of Ischemia orReperfusion injury not prevented by the treatments designed to block reactive oxygenmetabolites.