Ultrasantrifüj metodu ile virüs pürifikasyonu

Abstract

ÖZET Ultrasantrifüj teknikleri, günümüzde virüs pürifikasyonu ve moleküler düzeyde araştırmalar amacıyla sıklıkla kullanılan yöntemlerdir. En uygun tekniğin laboratuvarda tesis edilmesine yönelik olarak yapılan bu metodik çalışmada; prototip virüs olarak seçilen Adenovirus subgrub C serotip 5'in, HeLa sürekli doku kültüründen pürifikasyonu, diferansiyel pellet + rate zonal santrifüjleme tekniği kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Pürifikasyon sonucu Transmisyon Elektron Mikroskopik inceleme ve DNA ölçümleri ile konfirme edilmiş, sedimenfin virüs infektivitesini olumsuz etkilemesine rağmen elde edilen virüs yeniden doku kültüründe üretilebilmiştir. 21

SUMMARY At the present the ultrasantrifuge techniques are commonly used procuders for virus purification and moloculer research In this medhodical study, which is performed for establishment of the most proper technique in laboratory, the purification of Adenovirus subgroup C serotype 5 as a prototype virus from HeLa continious cell line was made by differential pelleting + rate zonal centrifugation technique. The precence of virus in purification product was confirmed by using Transmission Electron Microscope and DNA measurements; although the pelleting affects negatively the virus infectivity, the purified virus could have been propagated in tissue culture. 22