Koyunların listerial ensefalitisinde hücresel bağışıklık yanıt ile HMGB1 protein ilişkisinin belirlenmesi

Abstract

Listeriozis, insan ve hayvanlarda ölüme neden olması ve çok yaygın olarakgörülmesi nedeni ile mücadele edilmesi gereken önemli bir hastalıktır. Hastalıkhayvanlarda yavru atmaya, merkezi sinir sistemi lezyonlarına ve septisemiye nedenolup, ileriki safhalarda ölümle sonuçlanan hastalık tablosu oluşturabilmektedir.Koyunlarda listeriozisin ensefalitis (rombensefalitis) formunda lezyonların özelliklerive salınan sitokinler az sayıdaki çalışmayla gösterilmiştir. Bununla birlikte dokuhasarının patogenezi henüz tam olarak aydınlatılamamıştır. HMGB1 (High mobilitygroup box 1) proteini, MSS dahil birçok organda yangısal dejeneratif lezyonlarınoluşmasında rol alan bir alarmindir. Bu çalışma ile koyunlarda listerik ensefalitistekilezyonların oluşum sürecinde, HMGB1'in rolü hakkında daha ayrıntılı bilgi edinilmesiamaçlanmıştır.Çalışmada, doğal olarak şekillenen listerik ensefalitisli 15 adet koyuna aitarşivsel parafin bloklar kullanıldı. Beş adet normal koyuna ait beyin dokusu ise kontroldoku olarak incelendi. Dokulardan hazırlanan kesitler hematoksilen-eozin ileboyanarak, lezyonlar süresine göre değerlendirildi. Beyinin rombensefalon bölgesineait kesitlerde bakterinin varlığı immunohistokimyasal (IHC) olarak gösterildi. Aynımetotla yapılan boyamalarda rombensefalon bölgesinde nöron, endotel hücreleri,makrofaj ve nötrofilde HMGB1 proteinin subselüler yerleşimi ve yoğunluğudeğerlendirildi. Bu kesitlerde HMGB1'in ekspresyonu, oligodentrosit, astrosit vemikroglia hücre belirteçleri ile ikili immunofloresan teknikle incelendi.HMGB1 ekspresyonu en yoğun nöron, oligodentrosit, makrofaj ve mikrogliadagörülmüşür. Akut olgularda oligodentrositlerden, subakut ve kronik olgulardamikrogliada HMGB1 salınımının daha fazla olduğu saptanmıştır. Lezyon süresinegöre yapılan değerlendirmede akut olgularda hücre çekirdek ve sitoplazmalarındayoğun immunpozitiflik varken, subakut ve kronik olgularda bu hücrelerdekireaktivitesi azalmıştır.Listerial ensefalitiste şekillenen lezyonların oluşum sürecinde katkısı bulunanhücrelerde HMGB1'in eksprese edildiği görüldü. HMGB1'in yangısal süreçlerekatkıda bulunduğu ve hastalığın patogenezisinde rol aldığı düşünülmektedir.Anahtar Sözcükler: Alarminler, ensefalitis, HMGB1, koyun, listeriozis

Listeriosis is an important disease that needs to be struggled because it causesdeath in humans and animals and its widespread appearance. The disease can causeabortion, central nervous system lesions and septicemia leading to death in later stagesin animals. In addition, listeriosis can cause large economic losses in sheep breedersresulting in abortion and deaths. The characteristics of the lesions and the releasedcytokines in the form of listeric encephalitis (rhombencephalitis) in sheep have beendemonstrated by a small number of studies. However, the pathogenesis of tissuedamage has not yet been fully elucidated. HMGB1 protein is an alarmin that plays arole in the formation of inflammatory degenerative lesions in many organs, includingthe central nervous system (CNS). In the study, it was aimed to obtain more detailedinformation about the role of HMGB1 in the formation process of the lesions in listericencephalitis in sheep.Archival paraffin blocks belonging to 15 sheep with naturally occurring listericencephalitis were used in the study. Brain tissues from 5 normal sheep served ascontrol tissue. Sections prepared from tissues were stained with hematoxylin-eosin andevaluated according to the duration of the lesions. The presence of the bacteria insections of the rhombencephalon region of the brain has been demonstratedimmunohistochemically (IHC). The subcellular localization and density of HMGB1protein in the neuron, endothelial cells, macrophage (mikroglia) and neutrophil in therhombencephalon region were evaluated with the same method. Expression ofHMGB1 in these sections was examined by dual immunofluorescence technique witholigodendrocyte, astrocyte and microglia cell markers.HMGB1 expression was most densely seen in neurons, oligodendrocytes,macrophages and microglia. HMGB1 release was higher in oligodendrocytes in acutecases and in microglia in chronic and subacute cases. In the evaluation made accordingto the duration of the lesion, there was intense immunity in the cell nuclei andcytoplasm in acute cases, while the reactivity in the cells decreased in subacute andchronic cases. It was observed that HMGB1 was expressed in the cells that contributedto the formation process of the lesions shaped in listerial encephalitis.It is thought that HMGB1 is contribute to inflammatory processes and play arole in the pathogenesis of the listerial encephalitis.Keywords: Alarmins, encephalitis, HMGB1, sheep. listeriosis.