Ziehl-Neelsen boyama yönteminde mikrodalga ışınımının kullanılması

Abstract

Özeti: Bu çalışmada, son yıllarda görülme sıklığı yeniden artmış olan Tüberküloz hastalığının teşhisindekullanılan ve pozitifliği tanıda önemli yer tutan Erlich-Ziehl-Neelsen (EZN) boyama yöntemi,mikrodalga ışınımı ile yapıldı. Bu modifiye boya yönteminde, süre kısaltılması, boyama kalitesininartırılması ve laboratuvar şartlarında riskli ve rahatsız edici olan alevle ısıtma aşamasının ortadankaldırılması amaçlanmıştır. Çalışma için gerekli materyel, hastaneye başvuran ve Tbc hastalığı şüphesiile balgam örneği alınan hastalardan elde edildi. Bu örneklerden yayma preparatlar hazırlandı.Hazırlanan yayma preparatlar farklı altı grup işlemden geçirildi. Bu grupların hepsinde EZN boyamatekniği kullanılıp sadece bazı aşamalar mikrodalga ışınımıyla gerçekleştirildi. Özellikle rutin yöntemdekialevle ısıtmanın bulunduğu, fiksasyon ve karbolfuksin ile boyama aşamasında, mikrodalga ışınımıkullanıldı. Rutin yöntemde ısıtma aşamasının bulunmadığı, metilen mavisi ile boyama aşamasında damikrodalga fırın kullanıldı. Boyama sonuçları 100'lük objektif altında ışık mikroskopik olarak incelendi.Her bir preparat, basil boyanması, renk canlılığı, morfolojik yapının korunması ve zeminboyanmasındaki kalite açısından değerlendirilip birbirleriyle karşılaştırıldı. Fiksasyon aşamasındamikrodalga ışınımı uygulamanın basili öldürüp öldürmediği de araştırıldı. Sonuç olarak mikrodalgaışınımının EZN boyama tekniğinde, özellikle fiksasyon ve karbolfuksin aşamalarında kullanıldığındadoyurucu sonuç verdiği ve basili öldürdüğü görüldü. Anahtar kelimeler: Tüberküloz basili, Erlich-Ziehl-Neelsen boyama metodu, mikrodalga ışınımı, ışık mikroskopik inceleme.

SUMMARY In this study, Erlich-Ziehl-Neelsen (EZN) staining technique that is usefull for diagnosis of tuberculosis which is increasingly seen today, wasprocessed by microwave irradiation. By this modified method, we aimed to reduce time that is required, increase the quality of staining and reduce the risks of flame by eliminatingheating step. Material that is used for this study were obtained from patients suspiciously having tuberculosis which applied to hospital and gave the sputum. Smears were preparedfrom these materials. These smears were processed in six different ways. İn all groups EZN staining procedure were used, microwave irradiation only used in some steps.Especially, steps that are having heating process by flame in routine technique, (fixation and staining by carbol-fuchsin), were done by microwave irradiation. Methylene bluestaining step was also done by microwave irradiation although there is no heating process in routine technique. Stained smears were evaluated according to bacilli determination, colour brightness, preservation of morphological features, staining quality of ground and comparisions between each group were done. Killing effect of microwave irradiation that was used for fixaiton on bacilli were also studied. As a result, satisfactory results were obtained by the use of microwave irradiaion in EZN technique, especially in the steps of fixation and carbol-fuchsin staining and the killing effect of microwave irradiation was seen.Key words: tubercle bacilli, Erlich-Ziehl-Neelsen staining method, microwave irradiation,light microscopic examination.