İnsan meme kanseri mcf-7 hücrelerinde borun genotoksik ve anjiogenik etkilerinin araştırılması

Abstract

Meme kanseri, kadınlarda en çok görülen kanser türü olup, dünyada kadın ölüm sebepleriarasında ikinci sırada yer almaktadır. Meme kanserine çözüm bulunması amacıyla,tedaviye yönelik farklı çalışmalar yapılmakta ve farklı ilaç ve maddelerin bu hastalıküzerindeki etkileri yoğun bir şekilde araştırılmaktadır. Bu çalışmada meme kanseri hücredizisinde (MCF-7) borik asit kullanımının antiproliferatif, apoptotik, anjiyojenik veantioksidan etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır.Kemoterapötik ajanlar neoplastik hücrelere zarar verirken bazı normal hücreler de bundanetkilenmekte ve bu durum çeşitli yan etkilere neden olmaktadır. Borik asidin bazı kanserhücresi tiplerinin çoğalmasını kontrol ettiği gösterilmiştir. Borik asit peptitler, proteazlar,proteazomlar, arginaz, nitrik oksit sentaz ve transpeptidazların bir inhibitörüdür. Borikasidin güçlü bir antioksidan etki göstermesi, özellikle kanser tedavilerinde kullanılanilaçların yan etkilerinin azaltılması ve reaktif oksijen türlerinin (ROS) seviyesini azaltmasıaçısından önem teşkil etmektedir. iiBu çalışmada borik asidin ortalama latel doz (LD50) değerlerini belirlemek için MCF-7hücre dizisi üzerine borik asidin farklı konsantrasyonları uygulandı ve sitotoksikaktiviteleri 24, 48 ve 72. saatte hücre sayım (CCK-8) ELİSA kiti kullanılarakantiproliferatif etkisi belirlendi. Bulunan sonuçlarda en anlamlı değişiklikler 48.saattegörülmüştür. Bu sebeple diğer analizler 48 saatlik inkübasyon süresi üzerinden yapılmıştır.Biyokimyasal parametrelerin tayini için belirlenen konsantrasyonlar hücrelereuygulandıktan sonra hücre lizatları elde edildi. Elde edilen numunelerle anjiyogeniketkilerin belirlenmesi için vasküler endotelyal büyüme faktörü (VEG-F) elisa kitikullanıldı. Apoptotik etkileri belirlemek amacıyla da Poli(ADP-riboz) polimeraz (PARP)elisa kiti kullanıldı. Total antioksidan ve oksidan seviyeleri belirlemek için ise TAS veTOS elisa kitleri kullanıldı.Sonuç olarak bu çalışmada konsantrasyon ve zamana bağlı borik asidin MCF-7 memekanseri hücre hattında proliferasyonun azaldığı gözlemlendi. Aynı zamanda elde ettiğimizPARP sonuçlarına göre borik asit konsantrasyonlarının kontrol grubuna göre anlamlıfarklılık gösterdiği tespit edilmiştir. Borik asit konsantrasyonları ile Cis Platin gruplarıarasında anlamlı farklılık görülmemiştir. Her iki grubun da kontrol grubuna göre artışgöstermesi, borik asidin hücreyi nekroza götürdüğünü düşündürmektedir. Borik asidinanjiyogenez ile ilişkisini açıklamak amacıyla yapılan VEG-F sonuçlarına bakıldığında ayrıayrı hem kontrol grubu hem de Cis Platin ile anlamlı farklılıklar gözlemlendi. Analizlerdeborik asit gruplarında MCF-7 meme kanseri hücre hattında Cis Platinden daha etkilisonuçlar elde edilmiştir ve bu durum borik asidin antianjiyogenik bir etkisininolabileceğini düşündürmektedir. Yapılan TAS-TOS analizleri sonucu antoksidan kapasiteve oksidan kapasite konsantrasyona bağlı artış gösterdi. Bu durum hücrenin oksidatif stresegirdiğine ve buna karşılık antioksidan seviyelerini denge kurmak amacıyla arttırdığınıdüşündürmektedir. Bu açıdan bakıldığında, MCF-7 hücrelerinde yapılan biyokimyasalanalizlerin doza bağlı değişimlerinin literatüre katkı sağlayacağı kanaatindeyiz.Anahtar Kelimeler: MCF-7, Borik Asit, PARP, VEGF

Breast cancer is the most common type of cancer in women and ranks second in the worldamong the causes of female death. In order to find a solution to breast cancer, differentstudies conducted for treatment and the effects of different drugs and substances on thisdisease investigated intensively. In this study, it was aimed to investigate theantiprolipheratif, apoptotic, angiogenic and antioxidant effects of boric acid use in breastcancer cell line (MCF-7).Chemotherapeutic agents damage neoplastic cells, while some normal cells are affected,causing various side effects. Boric acid has been shown to control the proliferation ofcertain types of cancer cells. Boric acid is an inhibitor of peptides, proteases, proteasomes,arginase, nitric oxide synthase and transpeptidases. Boric acid has a strong antioxidanteffect, especially in reducing the side effects of drugs used in cancer treatment and reactiveoxygen species (ROS) is important to reduce the level.In this study, different concentrations of boric acid were applied on the MCF-7 cell line todetermine the mean latel dose (LD50) values of the boric acid and the antiproliferativeeffect was determined using the cytotoxic activity of the cell count (CCK-8) ELISA kit at iv24, 48 and 72 hours. The most significant changes in the results were seen at 48 hours. Forthis reason, other analyzes were made over a 48-hour incubation period. After theconcentrations determined for the determination of biochemical parameters were applied tothe cells, cell lysates were obtained. Vascular endothelial growth factor (VEG-F) elisa kitwas used to determine angiogenic effects with the samples obtained. In order to determineapoptotic effects, Poly (ADP-ribose) polymerase (PARP) elisa kit was used. TAS and TOSelisa kits were used to determine total antioxidant and oxidant levels.As a result, in this study, it was observed that the concentration and time-dependent boricacid decreased proliferation in the MCF-7 breast cancer cell line. At the same time,according to the PARP results we obtained, it was determined that the boric acidconcentrations showed a significant difference compared to the control group. Nosignificant difference was observed between boric acid concentrations and Cis Platingroups. The increase in both groups compared to the control group suggests that boric acidleads the cell to necrosis. When looking at the results of VEG-F performed to explain therelationship of boric acid with angiogenesis, significant differences were observed withboth control group and Cis Platinum. In the analysis, more effective results were obtainedfrom Cis Platin in the MCF-7 breast cancer cell line in boric acid groups, suggesting thatboric acid may have an antiangiogenic effect. As a result of TAS-TOS analysis, theanthoxidant capacity and oxidant capacity increased due to concentration. This suggeststhat the cell undergoes oxidative stress and in turn increases antioxidant levels in order tobalance. From this point of view, we believe that the dose-dependent changes ofbiochemical analyzes in MCF-7 cells will contribute to the literature.Keywords : MCF-7,Boric Acid, PARP, VEGF