HepG2 hücre hattının canlılığı üzerine medium pH`sının etkilerinin incelenmesi

Abstract

Amaç: Kanser hücreleri glikolitik metabolizmalarına bağlı olarak asidik mikro-çevreye sahiptirler. Asidik mikro-çevre nedeniyle tümör hücreleri invazyon ve metastaz yapma gibi malign özellikler kazanırlar. Bu çalışmada insan hepatosellüler karsinom (HepG2) hücrelerinin medium pH'ları değiştirilerek asidik tümör mikro-çevresi taklidi ve alkali uygulamaların hücre canlılığına etkisinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır.Materyal ve Metot: Çalışmada HepG2 hücreleri farklı pH'lı mediumlarda çoğaltıldıktan sonra WST-1 ve tripan mavisi testleri ile hücre canlılık değerlendirmeleri yapıldı.Bulgular: WST-1 testi sonuçlarına göre medium pH'sı 6.6 ve 6.8 olan gruplar ile kontrol grubu (pH 7.2) karşılaştırıldığında hücrelerin proliferasyon yeteneklerinde bozulma olmadan çoğalabildikleri gözlemlendi. Medium pH'sı azaldıkça (pH 6.4, 6.2, 6.0) hücre canlılığında önemli oranda azalma saptandı (p<0,05). Alkali gruplarda ise pH 7.6'dan itibaren hücre canlılığında kısmi azalma gözlemlenmiş olup, pH 7.8, pH 8.0 ve pH 8.5 grupların canlılık açısından belirgin bir azalma saptandı (p<0,05). Tripan mavisi testi sonuçlarına göre pH 6.6'da hücre sayısında artış gözlemlenmekle birlikte bu artış istatiksel olarak önemli bulunmamıştır (p>0,05). Her iki alkali grupta da (pH 7.6 ve 7.8) hücre canlılığında azalma saptanmış olup bu azalma pH 7.8'de önemli bulundu (p<0,05).Sonuç: Alkali ortamın kanser hücrelerinin proliferasyonunu azalttığı ve canlılık oranını düşürdüğü tespit edilmiştir. Bu nedenle mevcut tedavi stratejilerine ek olarak mikro-çevrenin pH'sını yükselten tampon tedavilerinin yapılması tümör hücrelerinin davranışını değiştirerek tedaviye olumlu yanıt şansını artıracaktır.Anahtar Kelimeler: HepG2; kanser; mikro-çevre; proliferasyon

Aim: Cancer cells have an acidic micro environment due to their glycolytic metabolism. Depending on the acidic micro-environment, tumor cells gain malignant properties such as invasion and metastasis. In this study, it was aimed to evaluate the effect of acidic tumor micro-environment imitation and alkaline applications on cell viability by changing medium pH of human hepatocellular carcinoma (HepG2) cells.Material and Method: In the study, HepG2 cells were grown in different pH mediums and WST-1 and trypan blue tests were performed to evaluate the cell viability.Results: According to the WST-1 test results, it was observed that the cells were able to multiply without deterioration in their proliferation ability compared with the control group with medium pH of 6.6 and 6.8. As the pH of the medium decreased (pH 6.4, 6.2, 6.0), a statistically significant decrease was observed in cell viability. A slight decrease was observed in alkaline groups from pH 7.6 and a significant decrease in cell viability was found in the groups with pH 7.8, pH 8.0 and pH 8.5 (p <0.05). According to the results of the trypan blue test, an increase in the number of cells in pH 6.6 was observed but this increase was not statistically significant (p>0.05). In both alkaline groups (pH 7.6 and 7.8), cell viability decreased and this decrease was found to be significant at pH 7.8 (p <0.05).Conclusion: It was found that alkaline environment reduces the proliferation of cancer cells and decreases the viability of them. Therefore, in addition to the current treatment strategies, buffer therapies that increase the pH of the micro-environment will change the behavior of the tumor cells and increase the chance of positive response to treatment.Keywords: Cancer; HepG2; micro-environment; proliferation