Leishmaniozisli köpeklerde klinik, hematolojik, biyokimyasal parametreler ve lipid profilinin belirlenmesi

Abstract

Bu çalışmada serolojik olarak leishmaniozis tespit edilen köpeklerde klinik, hematolojik ve biyokimyasal enzim aktivitesi (AST, ALT, LDH, CK, CK-MB) ile lipid profili (trigliserit, total kolesterol, VLDL, LDL, HDL kolesterol) değişimlerinin ortaya konulması amaçlanmıştır. Mevcut çalışmada her iki cinsiyetten, yaşları 1-8 arasında değişen ve 8-60 kg ağırlıklarında 20 köpek (16 erkek ve 4 dişi) oluşturdu. Hayvanlar 10 leishmanialı ve 10 sağlıklı olmak üzere iki gruba ayrıldı. Tüm köpeklerde hastalığın klinik hikayesi, fiziksel muayeneler (davranış, rektal ısının ölçümü, deri ve mukozaların muayenesi, lenf yumrularının ve abdomenin palpasyonu) yapıldı. Hematolojik ve biyokimyasal parametrelerin değerlendirilmesi için kan örnekleri alındı. Tam kandan elde edilen serum örnekleri kuru tüplere alındı. Köpek serumlarından anti-leishmania antikorlarını belirlemek için indirekt immunofloresan antikor testi (IFAT) standart prosedürler kullanılarak yapıldı. IFAT local Leishmania infantum stoklarından (Leishmania infantum zymodeme MON-1 promastigot) promastigotlar kullanılarak gerçekleştirildi. 37°C'de 30 dakika süreyle inkubasyonu takiben, hazırlanan preperatlar yıkandı, FITC'le işaretlenmiş anti-köpek IgG konjugatları (Sigma, A9042) PBS ile 1:200 dilue edildi. Preperatlar kapatılarak floresan mikroskopta maueyene edildi. 1:128 titre verenler pozitif olarak kabul edildi. Serum trigliserit, kolesterol ve fraksiyonları ile apolipoproteinlerin miktarları mevcut ticari kitler kullanılarak (Roche Diagnostic, Turkey) enzimatik metotlara göre ölçüldü.Köpeklerde CanL'nin birden fazla klinik bulguları gözlendi. Bu köpeklerde kilo kaybı, alopesi, deride ülserler, hiperkeratozis, eksfoliatif dermatitis, ayak tırnaklarında uzama, mukoz membranlarda solgunluk, lenf yumrularında genişleme, iştahsızlık ve burun kanaması gibi canine leishmaniozisin tipik bulguları gözlendi. Kontrol grubundaki köpeklerde klinik bulgulara rastlanmadı ve serolojik olarak negatif olarak belirlendi. Leishmanialı grupta kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, eritrosit sayıları, hemoglobulin ve hematokrit düzeylerinde istatistiksel olarak belirgin bir azalma vardı. Kan serum total protein (p<0,05) ve globulin (p<0,01) düzeyleri belirgin olarak yükselmiş, ancak albumin düzeyi azalmıştı (p<0,01). Kolesterol, trigliserit ve LDL-kolesterol düzeylerinde istatistiksel olarak belirgin bir artış, bununla birlikte HDL-kolesterol düzeyinde belirgin bir azalma gözlendi (P<0,01).Bu çalışmanın sonucu olarak, düşük hematokrit ve hemoglobulin düzeyleri leishmaniozisin yüksek oranda enfeksiyonla sonuçlanabilmektedir. Kan parametreleri ile klinik bulguların şiddeti arasında bir korelasyon gözlenmedi. Semptomatik köpeklerde yüksek enfeksiyon oranı ve şiddetli enfeksiyon mevcuttur. Bu nedenle, istatistiksel olarak kolesterol, trigliserit ve LDL düzeylerindeki artış hastalığın gelişmesi sonucu ortaya çıkan yetmezliğin, karaciğer hastalığının ve konakla parazitin normal kolesterol metabolizmasının etkileşmeye girmesiyle alakalı olabileceğini göstermektedir.Anahtar sözcükler: leishmania, köpek, hemotoloji, biyokimya, lipid profili

The aim of the study was to investigate clinical, haemotogical and biochemicial enzyme activities (aspaprtate aminotransferase-AST, alanine aminotransferase-ALT, lactate dehydrogenase-LDH, creatine kinase-CK, creatine kinase MB-CK-MB) and changes of lipid profile (triglyceride, total cholesterol, VLDL, LDL, HDL cholesterol) of the dogs with leishmaniosis determined serologically positive. The present study included 20 dogs of both genders (16 males and 4 females) aged between 1 and 8 years and 8?60 kg body weight. Animals were divided in to two groups 10 dogs with leishmaniosis and ten halthy dogs. For all dogs, the clinical history, physical examination (behaviour, measurement of rectal temperature, observation of skin and mucosa, palpation of lymph nodes and abdominal palpation) were performed. Blood samples were obtained for the assessment of heamatological and biochemical parameteres. Serum samples were obtained from total blood collected into dry tubes. To detect anti-Leishmania antibodies in dog sera, the indirect immunofluoresence assay (IFAT) was performed by using standard procedures. The IFAT was carried out using promastigotes from local Leishmania infantum stocks (Leishmania infantum zymodeme MON-1 promastigotes). Following an incubation at 37°C for 30 min, slides were washed and stained with FITC-labeled anti-dog IgG conjugate (Sigma, A9042) diluted 1:200 in PBS. Slides were covered and examined under a fluorescence microscope. Titers 1:128 were scored as positive. The serum amounts of triglycerides, cholesterol and fractions and apolipoproteins were determined with the use of commercially available kits (Roche Diagnostic, Turkey), using enzymatic methodologies.In dogs showed more than one clinical signs of CanL. These dogs had typical signs of canine leishmaniosis such as, loss of weight, alopecia, skin ulcerations, hyperkeratosis, exfoliative dermatitis, onychogryphosis, pale mucosae membranes, enlarged lymph nodes, anorexia and epistaxis. Control dogs did not show any clinical signs. All the animals from control group were serologically negative. In leishmaiosis grup, there were a statistically significant decrease in number of erythrocyte, the levels of haemoglobulin and hematocrit when compared with control group. Blood serum total protein (p<0,05) and globulin (p<0,01) levels were significantly raised, while albumin levels was decreased (p<0,01). Statistically significant increases in cholesterol, triglyceride and LDL-cholesterol levels were observed. There was, however, a statistically significant decrease in HDL- cholesterol level (P<0,01).As a result of this study, it is concluded that lower haematocrit and hemoglobulin levels were able to infect the highest proportion of Leishmaniosis. No correlation was observed between blood parameteres and the intensity of clinical signs. Symptomatic dogs presented the highest infection rate and intensity of infection. Statistically significant increases in cholesterol, triglyceride and LDL levels are therefore shown to undergo changes which may be attributed to the consumptive evolution of the disease, hepatic disorders and interactions between the parasite and the normal cholesterol metabolism of the host.Keywords: leishmania, dog, haemotology, biochemistry, lipid profile