2-amino-6-metoksi benzotiyazol ile dipikolinik asidin türevlerinin karbonik anhidraz enzimi üzerine inhibisyon etkilerinin incelenmesi

Abstract

2-AMİNO-6-METOKSİ BENZOTİYAZOL İLE DİPİKOLİNİK ASİDİN TÜREVLERİNİN KARBONİK ANHİDRAZ ENZİMİ ÜZERİNE İNHİBİSYON ETKİLERİNİN İNCELENMESİMelike ASLANKimya Bölümü, Yüksek Lisans Tezi, 2014Tez Danışmanı: Doç. Dr. Metin BÜLBÜLÖZETKarbonik anhidraz (E.C. 4. 2. 1. 1), aktif bölgesinde çinko iyonu bulunduran bir metaloenzimdir. Karbondioksitin HCO3 ve H+ iyonlarına dönüşümlü hidratasyonu reaksiyonunu katalizler.Bu çalışmada glokom hastalığı tedavisinde kullanılmaya aday yeni karbonik anhidraz (CA) inhibitörlerinin, karbonik anhidraz enzimi üzerinde inhibisyon etkileri araştırılmıştır.Bu amaçla önce insan eritrositlerinden karbonik anhidraz izoenzimleri (CA-I, CA-II) afinite kromatografisi ile ayrı ayrı saflaştırıldı. Elektroforez ve spesifik aktivite tayini ile safsızlıkları ispatlandı.Daha sonra sentezlenen yeni bileşiklerin (1-6) insan eritrosit CA-I ve CA-II izoenzimleri üzerindeki inhibisyon etkileri incelendi. Bileşiklerin inhibisyon etkisini belirlemek için karbonik anhidraz enziminin hidrataz ve esteraz aktiviteleri ölçüldü. İnhibisyon etkisi gösteren bileşikler için %Aktivite-[I] grafikleri çizilerek IC50 değerleri belirlendi.Sentezlenen yeni bileşiklerin, CA-I ve CA-II izoenzimlerinin hidrataz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi göstermediği, fakat esteraz aktiviteleri üzerinde inhibisyon etkisi gösterdiği tespit edildi. Esteraz IC50 değerleri CA-I için 0,800 – 0,193 mM arasında, CA-II için ise 0,754 – 0,174 mM arasında bulundu.Anahtar Kelimeler: IC50 Değerleri, İnhibisyon, Karbonik anhidraz, Benzotiyazol, Dipikolinik asit.

THE INHIBITION STUDIES OF 2-AMINO-6-METHOXY BENZOTHIAZOLE AND DIPICOLINIC ACID DERIVATIVES ON CARBONIC ANHYDRASEMelike ASLANChemistry Department, MSc. Thesis, 2014Thesis Supervisor: Assoc. Prof. Metin BÜLBÜLSUMMARYCarbonic anhydrase (E.C. 4.2.1.1) is a metalloenzyme and contains zinc(II) ion in its active side. It catalyses the reversible reaction of CO2 to HCO3- and H+ ions. In this study, the inibition effects of new carbonic anhydrase (CA) inhibitors's, which candidates for treatment of glaucoma, or carbonic anhydrase enzyme have been investigated.Firstly, erythrocyte carbonic anhydrase isoenzymes (CA-I, CA-II) from human erythrocyts were separately purifed by affinity chromatography. Electrophoresis and specific activity was proven by the determination of impurities.Later, the inhibition effects of newly synthesized compounds (1-6) on CA-I and CA-II isoenzymes were determined. To determine inhibitory effects of the compounds, the hydratase and esterase activities of carbonic anhydrase enzyme were measured. %Activity vs. [I] graphics were drawn and the IC50 values were calculated for potential inhibitory compounds.According to in vitro studies, any inhibition effects of 1-6 compounds were not observed on hydratase activity of CA-I and CA-II isoenzymes. These new compounds inhibited the esterase activities of CA-I and CA-II isoenzymes. The IC50 values of compounds for esterase activity are 0,800 – 0,193 mM for CA-I and 0,754 – 0,174 mM for CA-II, respectively.Keywords: IC50 Values, Inhibition, Carbonic Anhydrase, Benzothiazole, Dipicolinic acid.