Ovalbumin ile duyarlılaştırılmış kobay trakeasında adenozin ile oluşturulan kasılma yanıtında ATP duyarlı potasyum kanallarının ve Rho kinaz enziminin rolü

Abstract

VII. ÖZET Ovalbuminle Duyarlılaştırılmış Kobay Trakeasında Adenozin ile Oluşturulan Kasılma Yanıtında ATP Duyarlı Potasyum Kanallarının ve Rho Kinaz Enziminin Rolü Düz kas kasılması astımda önemli rol oynamaktadır, insan ve birçok hayvanın trakea düz kasında KATP kanal açıcıcılarının ve rho kinaz inhibitörlerinin kasılmayı inhibe ettiği bildirilmiştir. Bu çalışmada ovalbumin ile duyarlılaştırılmış kobayların trakeasmda adenozin veya karbakol ile oluşturulan kasılma yanıtlarına KATP kanal açıcısı pinasidilin etkisi ve bu etkide rho kinaz ve PKC enzimlerinin rolü incelenmiştir. Pinasidil konsantrasyon bağımlı olarak gevşeme yanıtı oluşturmuştur. Pinasidilin gevşetici etkisi KATP kanal blokörü glibenklamid (0.1 uM) tarafından tamamen ortadan kaldırılmıştır (n=5). Adenozin (10 uM) ile kasılmış dokularda pinasidil (10 uM) ile oluşan gevşeme yanıtı artarken, karbakol (0.1 uM) ile kasılmış dokularda belirgin olarak azalmıştır (p<0.01). Pinasidilin gevşetici etkisi adenozin ve karbakol ile kasılmış dokularda seçici olmayan KATP kanal blokörü glibenklamid tarafından yaklaşık % 50 oranında bloke edilirken (sırasıyla % 57 ± 5; % 50 ± 5), mitokondriyal KATP blokörü olan 5HD (10 uM) veya sarkoplazmik KATP blokörü olan HMR 1098 (10 uM) tarafından yaklaşık % 25 oranında inhibe edilmiştir (n=5, p <0.05). Protein kinaz C inhibitörü olan seleritrin (10 uM) pinasidil (10 uM) ile oluşan gevşeme yanıtını azaltmıştır (% 33 ± 2'den % 11 ± 3'e, n=5, p <0.01). Seleritrin varlığında adenozin ile kasılan dokularda pinasidil'e bağlı gevşeme yanıtları anlamlı derecede azalırken (% 53 ± 2 den % 13 ± 3'e, n=5, p <0.01), karbakol ile 35kasılmış dokularda azalma görülmemiştir (% 20 ± 4 den % 28 ± 3'e, n=5, p <0.05). Adenozin veya karbakol ile kasılmış dokularda HA 1077 (10 uM) varlığında pinasidil ek gevşeme yanıtı oluşturmuştur (n=5, p <0.05). Glibenklamid adenozin veya karbakol ile kasılmış dokularda HA 1077 (10 uM) ile oluşan gevşeme yanıtlarını pinasidile benzer şekilde azaltmıştır (p <0.05). Sonuç olarak ovalbuminle duyarlılaştırılmış kobay trakeasmda adenozin veya karbakol ile oluşturulan kasılmalara karşı KATP kanal açıcıları gevşetici etkisinde PKC ve rho kinaz'ın önemli rol oynadığı düşünülmektedir.

VIII. SUMMARY The Role of ATP Sensitive Potassium Channels and Rho kinase on Adenosine Induced Contraction in Ovalbumin Sensitized Guinea Pig Trachea. Smooth muscle contraction is one of the hallmarks of asthma. Many Katp channel openers and rho kinase inhibitors has been reported to inhibit the smooth muscle contraction of human and animal trachea but there is no data indicating whether the presence of a link between Katp channel activation and rho kinase in sensitized guinea pig isolated trachea. In the present study, we examined whether Katp channel induced relaxation is mediated by rho kinase or PKC in ovalbumin sensitized guinea pig trachea. Pinacidil caused concentration dependent relaxation. Glibenklamid completely blocked the relaxations induced by pinacidil. When the tissues were precontracted with adenosine (10 uM), pinasidil induced relaxations increased however when the tissues were precontracted with 0.1 uM carbachol, the relaxant response of pinacidil significantly decreased (p < 0.01). Pinacidil induced relaxations on strips precontracted with adenosine or carbachol were inhibited about % 50 by glibenklamide. The relaxant effect of pinacidil were also inhibited about %25 by 5HD (10 uM) or HMR 1098 (10 uM). Preteratment with PKC inhibitor chelerythrine (10 uM) decreased pinacidil induced relaxation from % 33 ± 2 to % 11 ± 3, n=5, p <0.01). Pinacidil induced relaxations were significantly reduced by the presence of chelerythrine (10 uM) on strips precontracted with adenosine (from % 53 ± 2 to % 13 ± 2, n=5, p < 0.01) but not in precontracted with carbachol (from 20 ± 373 to % 28 ± 3, n=5, p<0.05). In the presence of HA-1077 (10uM), pinasidil caused an additional relaxation on strips precontracted with adenosine and carbachol (p< 0.05). Glibenklamid decreased HA-1077 (10uM) induced relaxations like pinacidil on strips precontracted with adenosine or carbachol (p< 0.05). Our study support the hyphothesis that PKC activity and ROCK activity have important role on Katp channel induced relaxation in ovalbumin sensitised guinea pig trachea which are precontracted with adenosine or carbachol. 38