Diyabetli sıçan ovaryumlarında galektin-1 ve galektin-3`ün immünolokalizasyonu

Abstract

Diabetes mellitus (DM), pankreasın insülin salgılanmasının yetersizliği ve/veya dokuların insüline cevabının bozulmasıyla oluşan, protein, yağ ve karbonhidrat metabolizmasını etkileyen metabolik bir hastalıktır. Bu çalışmada beta-galaktoz-bağlayıcı proteinlerinden galektin-1 ve galektin-3'ün diyabetli sıçan ovaryumlarında immunolokalizasyonları gösterilerek diyabetle olan ilişkisi incelendi.Bu amaçla, vücut ağırlıkları 250-300 gram arasında değişen 8-10 haftalık Wistar cinsi 50 adet erişkin dişi sıçan kullanıldı. Hayvanlarda diyabet oluşturmak için streptozotosin (60 mg/kg) uygulandı. Streptozotosin uygulanan hayvanlara 30 gün sonrasında 200 mg/kg pentotal sodyum intraperitoneal yolla uygulanarak ötenazi sağlandı. Diyabetli ve diyabetli olmayan sıçanların ölüm sonrası alınan ovaryum dokularına immünohistokimyasal incelemeler için rutin takip protokolleri uygulandı. Kesitler Olympus marka mikroskopta değerlendirilip uygun alanlardan fotoğraflar alındı. Galektin-1 ve galektin-3'ün diyabetli sıçanlarda yoğun olarak ovaryum germinal epitellerinde, damar endotellerinde kuvvetli eksprese edildiği görülmüştür. Galektin-1 en yoğun olarak zona pellucidada; galektin-3'ün ise sitoplazmik alanlarda ekspresse edildiği görülmüştür. Zona pellucida insan ve farede ZP1, ZP2 ve ZP3 olarak adlandırılan 3 protein kompleksini içermektedir ve bu proteinler karbonhidrat alanları tanıma özelliğine sahip proteinlerdir. Galektinlerin bu bölgelerde yoğun olarak eksprese edilmesi, galektinlerin karbonhidrat bağlayıcı proteinler olması ve gal-1'in karbonhidrat bağlama özelliğinin fazla olmasından kaynaklanıyor olabilir. Ayrıca gal-3'ün büyüyen folikül hücrelerinin sitoplazmik alanlarında daha yoğun lokalize olması folikül büyümesinde etkili olabileceği konusunda fikir verebilir.Sonuç olarak, bu çalışmada beta-galaktoz-bağlayıcı proteinlerinden Gal-1 ve Gal-3'ün diyabetli sıçan ovaryumlarında kontrollerle karşılaştırıldığında daha yoğun eksprese olduğu ve diyabetin Galektin-1 ve Galektin-3 ekspresyonunu artırdığı söylenebilir. Semi-kantitatif değerlendirmelerde iki ekspresyon arası anlamlı fark bulundu. Bu çalışmanın sonuçları, sıçan ovaryal dokusunda diyabetin de etkisi ile Gal-1 ve Gal-3 proteinlerinin farklı immünolokalizasyonları, bu dokudaki yaygın varlıklarını ve sıçan ovaryal fonksiyonunda önemli rollerinin olduğunu destekler nitelikte olduğunu göstermiştir.Anahtar sözcükler: Galektin-1, galektin-3, ovaryum, diyabet, sıçan

Key words: Galektin-1, galektin-3, ovary, diabetes, ratDiabetes mellitus (DM), is a metabolic disease occuring via insulin secretion deficiency from the pacreas and/ or an insufficiency of tissue response to insulin. In the present study, immunolocalizations of beta-galactose-binding proteins Galektin-1 and Galektin-3 in diabetic rat ovarium were shown and their relationship with diabetes have been demonstrated. In this study, 8-10 weeks old, 250-300 g weighing 50 mature female rats were used. In order to establish diabetes mellitus in those animals, 60 mg/kg-IV streptozotocin was injected to each animal. Animals were killed by 200 mg/kg IP sodium pentothal injection 30 days after streptozotocin injection. Rootin tissue processing steps were done to rat ovarial tissues for immunohistochemical investigation. Five micrometer thick tissue sections were evaluated under an Olympus light microscope and photographs were taken from the convenient fields of views. Strong expressions of Galektin-1 and Galektin-3 were observed in the ovarial germinal epithelium and vascular endothelial. While the strongest expression of Galektin-1 was seen in the zona pellucida, Galektin-3 expression was strongest in the cytoplesmic regions of cells. Zona pellucida has 3 protein complexes (ZP1, ZP2, ZP3) in rats and in humans and they have the capability of recognizing the carbonhydrate fields in tissues. The strong expression of galektins in those regions could be the result of carbonhydrate binding properties expression of Gal-3 in the cytoplasmic regions of growing follicles could suggest the idea that Gal-3 could have effects on follicle growth. In conclusion, beta galactose-binding proteins Gal-1 and Gal-3 had stronger immunülocalization in diabetic rat ovarium when compared to the controls. Diabetes could increase the Gal-1 and Gal-3 expressions in the ovarial tissue. The difference between the diabetic group and the control group was found to be statistically significant in semiquantitative assessment. Findings of the present study indicated the increased immunolocalization of Galektins in the ovarium under the effects of diabetes and they could have crucial roles on rat ovarial function.Key words: Galektin-1, galektin-3, ovary, diabetes, rat