Fare vas deferens biyoesey yöntemi ile ağrılı ve ağrısız hastaların beyin omurilik sıvılarında met-enkefalin düzey tayini

Abstract

VII.OZET Endorfinlerin insanlardaki etkileri daha önceki yıllarda yapılan araştırmalarda etraflıca belirlenmiş ve bu endojen opioid peptidlerin analjezik etki mekanizmaları etraflıca açıklanmıştır (40). Araştırmamızda akut ağrılı 27 erişkin hastanın, 20 ağrısız çocuk hastanın, ağrısız 28 erişkin hastanın ve anestezi altında incelenen 6 hastanın BOS met-enkefalin düzeyleri incelenmiştir. Met-enkefalinler sentetik bir reçineye (Amberlit XAD-2R) adsorbe ettirilip metanolle yıkanmak suretiyle BOS'tan ekstrakte edildi ve elektriksel olarak stimüle edilen fare vas deferens dokusuna uygulandı. Çalışmamızda 30-40 gram ağırlığındaki erkek fareler kullanıldı, vas deferensleri çıkartıldıktan sonra 37 derecedeki %95 oksijen %5 karbondioksit ile gazlandırılmış Krebs solüsyonu içine 20 mililitrelik organ banyolarına asıldı. 200 mg istirahat gerilimi altında 30 dakikalık bir dinlenme periyodu sonrası dokulara 10 Hz,25 Volt, 0.5 milisaniyelik elektriksel alan stimülasyonu Grass S48 stimulator aracılığıyla uygulandı. İzometrik kontraksiyonlar Grass 7F Poligrafa bağlı Grass R force- displacement transdüserler aracılığıyla yazdırıldı. Ekstrakte edilen BOS örneklerine 50 mikrolitre distile su ilave edilerek organ banyosuna eklendi ve elektriksel alan stimülasyonlarında oluşturdukları inhibisyonlar kaydedildi. Sonuçlar 3 nokta yöntemi ile 1 mi BOS'taki met-enkefalinin pikomol eşdeğerleri olarak hesaplandı. İstatistiksel analiz için Student's t test kullanıldı ve p<0.05 olan sonuçlar anlamlı olarak kabul edildi. Akut ağrılı erişkin hastaların BOS met-enkefalin düzeyleri ağrısız erişkin hastalar, anestezi altında örnek toplanan hastalar ve ağrısız çocuk hastaların değerlerinden belirgin olarak düşük bulundu. Anestezi altındaki hastalarla ağrısız erişkin hastaların değerleri karşılaştırıldığında istatistiksel olarak bir 54anlamlılık gözlenmedi. Benzer olarak erişkin ve çocuk hastaların met-enkefalin düzeyleri arasında da anlamlılık bulunmadı. Çalışmamızda elde edilen temel bulgu akut ağrılı hastaların met-enkefalin düzeylerinde gözlenen belirgin düşmedir. Sonuçlar bize akut ağrının met- enkefalin düzeylerini düşüren önemli bir etken olduğunu göstermektedir. Buna karşın ağrısız erişkinlerin ve çocukların BOS met-enkefalin düzeyleri arası anlamlı bir farklılık gözlenmemesi, yaş faktörünün etkili olmadığını düşündürmüştür. 55