Kronik B hepatitli hasta serumlarında HBV DNA`nın Chemiluminescence ve polimeraz zincir reaksiyonu yöntemleri ile gösterilmesi

Abstract

1.0ZET Anahtar sözcükler: HBV, HBV DNA, Chemiluminescence, PCR Oluşturduğu akut ve kronik infeksiyonlarla toplumun büyük bir kısmını etkileyen B hepatiti önemli bir halk sağlığı problemidir. Çok bulaşıcı olması, tüm vücut sıvılarının bulaşta rol oynaması, kesin bir sağaltım yönteminin bulunmaması bu infeksiyonu saptamaya yönelik testlerin daha duyarlı hale getirilmesini gerektirmiştir. Serolojik olarak antijen ve antikorları saptayan testlerin duyarlılığı arttıkça karşılaşılan olağan dışı serolojik tablolar ise infektivitenin kesin göstergesi olan HBV DNA'nın saptanmasını zorunlu hale getirmiştir. Çalışmamızda HBV DNA'yı saptama amacıyla geliştirilmiş bir sıvı hibridizasyon testi olan chemiluminescence yöntemi ile polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) yöntemini kullanarak hepatit B yüzey antijeni(HBsAg) olumlu 245 hastanın serumunda HBV DNA olumluluğunu araştırdık. Chemiluminescence yöntemi ile incelediğimiz 245 serumun 126' sında ( % 51.4) HBV DNA' nın olumlu olduğu saptandı. İkinci aşamada, bu çalışma için laboratuvarımızda standardize ettiğimiz PCR yöntemi kullanıldı. Bu yöntemle çalıştığımız 245 serumun 134'ünde (%54.6) HBV DNA gösterildi.Sonuçlarımız istatistiksel olarak Mc Nemar simetri testi ile karşılaştırıldı ve farkın anlamlı olduğu (p=0.05)bulundu. Seçilmiş olgularda ileri tanı yöntemi olarak kantitatif bir basamağın eklendiği PCR yönteminin, HBV DNAyı saptama açısından daha duyarlı bir yöntem olduğu sonucunu gördük ve uygun koşullarda özellikle sağaltımın takibinde bu yöntemin uygulanmasını öneriyoruz.

2. SUMMARY Keywords: HBV, HBV DNA, Chemiluminescence, PCR. Hepatit B virus infection is a major public health problem of worldwide concern. Because that the virus has a very contagious character and we don't have a very effective therapy, the serologic assays to detect this infection must be highly sensitive.As the sensitivity of antigen and antibody detecting assays increased, the necessity to detect HBV DNA arised, because of the extraordinary serological profiles. We used chemiluminescence and PCR methods on 245 HBsAg positive patients to detect the positivity of HBV DNA. We found that 126 of 245 patients were positive for HBV DNA ( %51.4) with the chemiluminescence method. In the second step we used an in house PCR and HBV DNA was found in 134 sera. The Mc Nemar test of symmetry showed a statistically significant difference between the chemiluminescence and PCR. As a result considering the sensitivity the choice must be PCR and adding a quantitative step will be useful in following the patients on therapy.