Preparation and characterization cibacron blue F3GA attached poly(acrylamide-allylglycidyl ether) cryogels for albumin purification from human plasma

Abstract

Poli(akrilamid-allil glisidil eter) [poli(AAm-AGE)] kriyojeli monomerlerin suluçözeltilerinin cam bir kolon içerisinde dondurulmasıyla gerçekleştirilen yığınpolimerizasyonu ile hazırlandı. Eridikden sonra, monolitik kriyojel, 10-100?mboyutunda gözeneklere sahip sürekli polimerik bir matriks oluşturdu. Cibacron BlueF3GA, epoksi grupları üzerinden poli(AAm-AGE) kriyojeline kovalent olarakimmobilize edildi. Poli(AAm-AGE) kriyojeli, şişme testi, FTIR, taramalı elektronmikroskobu (SEM) ve elemental analiz ile karakterize edildi. Poli(AAm-AGE)monolitik kriyojelinin denge şişme oranı 6,84 g H2O / g kriyojel olarak bulundu. 68,9?mol Cibacron Blue F3GA/ g kriyojel içeren poli(AAm-AGE) kriyojeli, sulu çözeltive insan plazmasından insan serum albumin (HSA) adsorpsiyon-desorpsiyonçalışmalarında kullanıldı. HSA' in spesifik olmayan adsorpsiyonu 0,2 mg/g olarakbulundu. Sulu çözeltiden maksimum HSA adsorpsiyon miktarı, pH 5'de 27 mg/golarak bulundu. En yüksek HSA adsorpsiyonu, %92 saflıkla plazmadan sağlandı(74,2 mg/g). Cibacron Blue F3GA takılı poli(AAm-AGE) kriyojelinden HSA'nindesorpsiyonu 0,5 M NaCl içeren 0,1 M Tris/HCl tamponu kullanılarakgerçekleştirildi. Adsorpsiyon kapasitesinde herhangi bir azalma olmaksızın,poli(AAm-AGE) kriyojeli ile HSA'nin tekrarlanabilir bir şekilde adsorlanıpdesorplandığı gözlendi.

Poly(acrylamide-allyl glycidyl ether) [poly(AAm-AGE)] cryogel was prepared bybulk polymerization which proceeds in aqueous solution of monomers frozen insidea glass column (cryo-polymerization). After thawing, the monolithic cryogelcontains a continuous polymeric matrix having interconnected pores of 10-100 ?msize. Cibacron Blue F3GA was immobilized by covalent binding onto poly(AAm-AGE) cryogel via epoxy groups. Poly(AAm-AGE) cryogel was characterized byswelling studies, FTIR, scanning electron microscopy and elemental analysis. Theequilibrium swelling degree of the poly(AAm-AGE) monolithic cryogel was 6.84 gH2O/g cryogel. Poly(AAm-AGE) cryogel containing 68.9 ?mol Cibacron BlueF3GA/g were used in the adsorption/desorption of human serum albumin (HSA)from aqueous solutions and human plasma. The non-specific adsorption of HSA wasvery low (0.2 mg/g). The maximum amount of HSA adsorption from aqueoussolution in phosphate buffer was 27 mg/g at pH 5.0. Higher HSA adsorption valuewas obtained from human plasma (up to 74.2 mg/g) with a purity of 92%.Desorption of HSA from Cibacron Blue F3GA attached poly(AAm-AGE) cryogelwas obtained using 0.1 M Tris/HCl buffer containing 0.5 M NaCl. It was observedthat HSA could be repeatedly adsorbed and desorbed with poly(AAm-AGE) cryogelwithout significant loss in the adsorption capacity.