Azospermik bireylerde azospermia faktör gen delesyonlarının polimeraz zincir reaksiyonu ile belirlenmesi

Abstract

IV ÖZET AZOSPERMİK BİREYLERDE AZOSPERMİA FAKTÖR GEN DELESYONLARININ POLİMERAZ ZİNCİR REAKSİYONU İLE BELİRLENMESİ Y kromozomunun q kolu üzerinde Azospermia faktör (AZF) geni bulunur. AZF geni, AZFa, AZFb, AZFc olmak üzere 3 bölgeye ayrılmaktadır. Bu bölgelerdeki delesyonların azospermi ile ilişkisi gösterilmiştir. Çalışmamızda, azospermi ön tanısı ile gelen 30 erkek, sex kromozom anomalisi ile gelen 4 bayan hasta ve 10 kontrolün periferal kan örneklerinden DNA izolasyonu yapıldı. Bunlara ilaveten, 20 azospermik hastanın parafinli testis biopsisinden DNA elde edildi. AZF gen delesyonları bu bölgeyi tanıyan 15 çift primerin kullanılarak PCR yöntemi ile tespit edildi. Ayrıca, kan örnekleriyle çalıştığımız 34 hastaya periferik kandan kromozom analizi de yapıldı. Yapılan kromozom analizinde 23 azospermik hastada 46,XY, bir azospermik hastada 46,XX, 6 hastada 47,XXY karyotipi tespit edildi. 46,XX karyotipi gösteren hastada aynı zamanda AZF gen delesyonuda gözlendi. Bir azospermik bireyde DAZ2 geninde (AZFe) kopya sayısının arttığı, herrnafroditizm ön tanısı ile gelen bir bayan hastada da AZF bölgelerinin tamamının bulunduğu tespit edildi. Parafin blokların kullanıldığı hastalardan 8 'inde çeşitli AZF bölgelerinde delesyon gözlendi. Literatürde, azospermik ve ciddi oligozoospermik bireylerde AZF gen delesyonları oranının %10-15 civarında olduğu bildirilmiştir. Bulgularımızı literatürle karşılaştırdığımızda AZF geni mikrodelesyonlannın oranlarının farklı olduğu gözlendi. Bu farklılıkların muhtemel nedenleri arasına hasta seçimindeki kriterleri ve populasyon farklılıklarını katabiliriz. Bizim parafinli doku örnekleri ile yaptığımız çalışmada 20 hastanın 8 inde (%40) AZF delesyonu bulunurken, kan örnekleri ile yaptığımız çalışmada 30 hastanın birinde (%3) AZF gen delesyonu bulunmuştur. Biz AZF gen delesyonunun kan dokusundan ziyade testis biyopsileri ile çalışılmasının daha uygun olacağı kanısındayız. Anahtar kelimeler : AZF, Erkek İnfertilitesi, Y Kromozomu

ABSTRACT DETECTION OF AZOOSPERMIA FACTOR GENE DELETION WITH POLIMERASE CHAIN REACTION IN AZOSPERMIC MALE The Azospermia factor (AZF) gene is located on q arm of Y chromosome. The AZF gene is divided into three parts as AZFa, AZFb, AZFc. Deletions on this region has been shown to be related with azospermia. In our study, DNA isolation was done from peripheral blood samples 30 patients with the diagnosis of azospermia, 4 patients with sex chromosomal anomalies and 1 0 controls. In addition to this, DNA isolatin was done from testicular biopsy paraffine blocks of 20 azospermic patients. AZF gene deletion was detected with PCR methods using 15 pair primer spesific to this region. Also chromosomal analysis from peripheral blood was performed in 34 patients. In chromosomal analysis, 46;XY karyotype was detected in 23 azospermic patient, 46,XX karyotype was detected in one azospermic patient and 47,XXY karyotype was detected in 6 patients. Also, AZF gene deletion was detected in a patient with 46,XX karyotype. Copy number of DAZ2 gene (AZFc) increase was detected in one azospermic male, all AZF regions were found in one female patient with the diagnosis hermaphroditism. Deletions were detected in different regions in 8 of 20 patients whose paraffine blocks have been used. AZF gen deletion ratio has been raported to be 10-15% in the literature. When we compare our result with the literatüre, AZF gene microdeletion ratios were different. We can add criteria of patient selection and population differences in possible reason of this discrepancy. While AZF deletion was found in 8 of 20 patients (%40) in paraffine tissue samples, AZF gene deletions was found in only 1 of 30 (%3) in blood samples. We think that testicular tissue is more suitable than blood samples for AZF gene deletion detection. Key words: AZF, Male Infertility, Chromosome Y