Büyümeye bağlı olarak glikoproteinlerin ifadesi

Abstract

ABSTRAKT Doktora Tezi BÜYÜMEYE BAİLI OLARAK GLİKOPROTEİNLERÎN ÎFADESÎ Ali ATEŞ Selçuk Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Biyoloji Anabilim Dalı Danışmanı Prof. Dr. Hasan BA?CI 1992, Sayfa: 45 Jüri: Prof.Dr. Hasan BA?CI Prof.Dr. M. Yaşar AKSOYLAR Doç.Dr. Zekiye SULUDERE Farklı gelişme devresinde bulunan Swiss faresi 3T3 fibroblastlarının glikoprotein profilleri çalışıldı. Çoğalan ve quiescent fibroblast kültürleri, fo 0.5 iyonik olmayan deterjan Triton 7 - 100 ile muamele edildikten sonra, deterjana dirençli materyaller poliakrilamid gel elektroforezi ile ayrıştırıldı. Poliakrilamid gel elektroforezi ile ayrıştırılmış materyal, elektroforetik olarak nitroselüloz membrana transfer edildi ve blot, peroksidaz bağlı, Conconavalin A (Con - A), wheat germ aglutinin (WGA), Ricinus communis aglutinin (RCA), Lotus tetragonolobus aglutinin ( LTA ) ve Ulex europaeus (UEÂ) a^lutinini gibi lektinlerie boyanarak, ` glikoproteinler görünür hale getirildi. Con - A, her iki durumdaki hücrelerde molekül ağırlığı 220 - kD, 175 - kD, 1^5 - kD, 85 - kD ve 70 -kD olan glikoproteinleri boyadı. Ouiescent hücrelerdeki 1^5 - kD glikoprotein, çoğalan hücrelerde farkedilmedi. Çoğalan hücrelerdeki 85 - kD ve 70 - kD Con - A reaktif bandlar, quiescent hücrelerde daha zayıf olarak boyandı. WGA'nin quiescent hücrelerde farkettiği 175 - kD band, çoğalan hücrelerde bulunmamaktadır. Çoğalan hücrelerde en göze çarpan WGA reaktif bandlar 85 - kD ve 70 - kD iken bu bandlar in WGA reakti vitesi quiescent hücrelerde önemli derecede azalmıştır. Çoğalan hücrelerdeki 68 - kD RCA re aktif band quiescent hücrelerde fark edilmedi. Anahtar kelimeler: glikoprotein, lektin, 3T3 fibroblast, hücre gelişmesi. III

ABSTRACT Ph.D. Thesis GROWTH - RELATED EXPRESSION OP GLYCOPROTEINS Ali ATEŞ Selçuk University Graduate School of Natural and Applied Sciences Department of Biology Supervisor» Prof.Dr. Hasan BA?CI 1992, Page» 45 Jury» Prof.Dr. Hasan BA?CI Pof.Dr. M. Yaşar AKSOYLAR Assoc Prof.Dr. Zekiye SULUDERE Glycoprotein profiles of Swiss mouse 3T3 fibro blast at different stages of srowth were studied. After treatment of cultured growing and quiescent fibroblasts with 0.5 <fo non - ionic detergent Triton X - 100, the de tergent - insoluble materials were separated by polyac - rylamide gel electrophoresis. The separated material was transferred electrophoretically onto nitrocellulose memb rane and the glycoproteins of the cells visualized,' by staining the blot with peroxidese - conjugated lectins, such as, Conconavalin A (Con -A), wheat germ agglutinin (WGA), Ricinus communis agglutinin (RCA), Lotus te trago- nolobus agglutinin and Ulex europaeus agglutinin (UEA;. Con - A revealed several glycoprotein bands in both state cells with molecular weights of 220 - kD, 175 - kD, 145 - kD, 85 - kD and ?0 - kD. The 145 - kD glyco protein in quiescent cells was not detected in growing cells. The 85 - kD and 70 - kD Con - A binding glycopro teins in growing cells, stained very faintly in quiescent cells. WGA recognized a band with a molecular weight of around 175 - kD in quiescent cells which is absent in gro wing cells. While the 85 - kD and 70 - kD bands are the striking WGA - binding glycoproteins in growing cells, their WGA sensitivity greatly reduced in quiescent cells. The 68 - kD RCA - binding glycoprotein in growing cells, was not detected in quiescent cells. Key words» glycoprotein, lectin, 3T3 fibroblast, cell growth. IV