Otozomal resesif non-sendromik işitme kayıplı bireylerde GJB2 gen mutasyonlarının SSCP ve DNA dizi analizi ile belirlenmesi

Abstract

Non-sendromik otozomal resesif konjenital işitme kaybının büyük bir kısmına GJB2 (Connexin 26) mutasyonlarının neden olduğu bugüne kadar yapılan çeşitli toplum çalışmalarında gösterilmiştir. 35delG mutasyonu beyaz ırkta görülen en yaygın GJB2 mutasyondur. GJB2 mutasyonlarının Türk toplumundaki sağırlık üzerinde olan etkisini belirlemek için non-sendromik otozomal resesif konjenital işitme kayıplı ve akraba olmayan 96 hasta tarandı. 35delG mutasyonu, geliştirdiğimiz yarışmalı amplification ferfactory mutation system (C-ARMS) ile gösterildi. Diğer GJB2 mutasyonları single strand conformation polymorphism (SSCP) ve silver sequencing analizi ile belirlendi. Şiddetli ve derin işitme kayıplı 28 hastada altı farklı mutasyon görüldü. 35delG mutasyonu en yaygım olup mutant GJB2 allellerinin %76.8'ini oluşturmaktaydı. Birden fazla allelde görülen W24X, 310dell4 ve delE120 mutasyonlarının rölatif sıklıkları sırasıyla %10.7, % 5.4 ve %3.6 idi. Ayrıca iki bireyde 35delG ile kompaund heterozigot olarak iki yeni missense mutasyon (P173S ve Q80K) tanımlandı. Bizim sonuçlarımız, otozomal resesif non-sendromik konjenital işitme kayıplı Türk hastalarının %29'una GJB2 mutasyonlarının neden olduğunu göstermiştir. Anahtar Kelimeler: Non-sendromik işitme kaybı, GJB2, DFNB1, Connexin 26, 35delG

Mutations in connexin 26 gene (GJB2) lead to significant proportion of non- syndromic autosomal recessive congenital hearing loss in all populations studied so far. The 35delG mutation is the most common GJB2 mutation in white populations. To determine the percentage of hearing loss attributed to connexin 26 gene and the types of mutations in Turkish population, unrelated 96 patients with autosomal recessive non-syndromic congenital deafness were screened. The 35delG mutations were detected with competitive amplification refractory mutation system (C-ARMS) that we developed. The other GJB2 mutations were screened with single strand conformation polymorphism (SSCP) and silver sequencing analysis. Six different types of mutations were found in 28 of the patients with severe to profound hearing loss. Mutation 35delG was the most common, accounting for 76.8% of all GJB2 deafness alleles. Three non-35delG mutations (W24X, 310dell4 and delE120) were identified more than once with relative frequencies of 10.7%, 5.4%, and 3.6%, respectively. Two novel missense mutations (P173S and Q80K) compound heterozygous with 35delG mutation also were observed. Our results indicate that connexin 26 mutations are the cause in 29% of Turkish patients with autosomal recessive non-syndromic congenital hearing loss. Key Words: Non syndromic hearing loss, GJB2, DFNB1, Connexin 26, 35delG